秦岭凹叶厚朴内生真菌与宿主致病菌的相关性研究(附件)
摘 要此文通过对秦岭凹叶厚朴愈伤组织的培养、内生真菌的接种等方法研究秦岭凹叶厚朴内生真菌与宿主致病菌两者的关系并对其进行再分离。结果表明（1）凹叶厚朴内生真菌QAY-1、QAY-3、QAY-7对宿主致病菌对枯草芽孢杆菌、裂殖酵母、厚朴球腔菌、炭疽菌等表现出一定的抑制作用，且抑菌活性表现出良好的宿主相关性。（2）凹叶厚朴内生真菌QAY-1的抑菌作用和生长都受到宿主成分刺激而加强。内生真菌处于植物体内氧气供应充足的部位，则抑菌活力高，在供氧不足的地方，则抑菌能力弱。（3）凹叶厚朴内生真菌QAY-1抑菌能力受到pH、温度、紫外线影响，活内生真菌菌株对植物拮抗病菌有更好的效果。
目 录
1 绪论 1
1.1 凹叶厚朴 1
1.2 内生真菌与宿主致病菌 1
1.1. 内生真菌的生理活性 1
1.1.1. 内生真菌对植物抗旱性的影响 1
1.1.2. 内生真菌对药用植物生长发育的影响 2
1.1.3. 内生真菌对药用植物活性成分合成和积累的影响 3
1.1.4. 内生真菌对药用植物抗逆性的影响 3
1.2. 宿主致病菌的生理活性 3
1.2.1. 植物致病菌的宿主专一性 3
1.2.2. 致病菌对植物的作用受环境因子的影响 4
2 实验部分 5
2.1材料与试剂 5
2.1.1材料 5
2.1.2试剂 5
2.1.3实验菌株 5
2.1.4培养基 5
2.2方法 5
2.2.1愈伤组织的培养方法 5
2.2.2抑菌实验方法 6
2.2.3生长条件对愈伤组织生长的影响的实验方法 7
2.2.4内生真菌、病原菌接种及重新分离方法 7
2.3结果与分析 7
2.3.1生长条件对愈伤组织生长的影响结果 7
2.3.2添加宿主植物浸汁对内生真菌抑菌作用的影响 8
2.3.3不同培养基成分对QAY1抑菌活性的影响 9
2.3.4培养方式对内生菌抑菌的影响 10
2.3.5内生菌在植株体内对 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
病原菌的抑制作用 10
2.3.6培养时间对QAY1抑菌活力的影响 11
2.3.7影响发酵液抑菌活性的因素 11
3结论与展望 14
3.1 结论 14
3.2 展望 14
参考文献 16
致 谢 19
1 绪论
1.1 凹叶厚朴
厚朴，植物学范围内别名紫朴、紫油朴、温朴等，为木兰科、木兰属植物，常见为厚朴(原亚种) M. officinalis subsp. officinalis与凹叶厚朴(亚种)M.officinalis subsp. biloba两种，主产于四川、湖北等地。中药材中专指该植物的干燥干皮、根皮及枝皮。46月剥取根皮及枝皮直接阴干，干皮置沸水中微煮后堆置阴湿处，“发汗”至内表面皮紫褐色或棕褐色时，蒸软取出，卷成筒状，干燥。切丝，姜制用。对食积气滞、腹胀便秘、湿阻中焦等疾病有治疗作用。还能加入癌症药物中。凹叶厚朴（学名：Magnolia officinalis）为木兰科木兰属植物。落叶乔木，高可达15米，树形雄伟，花大，是优良的园林绿化树种。秦岭凹叶厚朴由于地势的原因更呈现出它独特的优势，据研究发现凹叶厚朴具有抗菌、抗溃疡、抗痉挛、抗过敏、肌肉松弛等作用。
1.2 内生真菌与宿主致病菌
内生真菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官的细胞间隙或细胞内的细菌，可通过组织学方法或从严格表面消毒的植物组织中分离或从植物组织内直接产生扩增出微生物DNA的方法来证明其内生。目前许多报到已经证明在不同的植物体内都存在大量的内生真菌，但是人们对此知之甚少。近年来由于发现内生真菌对植物具有促生长抗逆境等有益影响，有关植物内生真菌的生物学，生理生态学，次生产物化学的研究日益增多，并取得了可喜的成绩，显示了其具有重要的理论研究意义和广泛的应用前景。
致病菌（Pathogenic?bacteria?)能引起疾病的微生物称为病原微生物或致病菌。病原微生物包括细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体、衣原体、支原体、真菌及放线菌等。一般所说的致病菌指的是病原微生物中的细菌。细菌的致病性与其毒力、侵入数量及侵入门户有关。虽然绝大多数细菌是无害甚至有益的，但是相当大一部分可以致病。
内生真菌的生理活性
内生真菌对植物抗旱性的影响
内生真菌广泛地存在在植物体内，它们在植物体内的生活不会对植物引起任何感病症状，而且内生真菌侵染对植物生长、生物和非生物胁迫抗性很好的促进作用，理解内生真菌在提高植物干旱胁迫耐受性方面的作用和机理对其在缓解植物干旱胁迫中的应用有重要意义。内生真菌对植物抗旱性提高的机理包括:干旱耐受、干旱回避和干旱恢复。内生真菌指寄生于植物的活组织内而不引起任何明显的负影响的真菌。内生真菌在植物体内广泛存在，目前分离和研究得最多的是牧草内生真菌。有资料呈现, 某些内生真菌可以提高植物对生物胁迫与非生物胁迫, 包括干旱、高温、矿物质失调和高盐的耐受性[15]，从而使内生真菌感染过的植株比未感染植株对有限的资源更具竞争力而且长得更好。与病原真菌相比,，内生真菌的研究历史不长。 关于内生真菌的研究一般集中于牧草的抗病方面, 最近其在植物抗逆性上的研究日益引起人们的关注。干旱、盐碱和低温是限制作物产量的三大非生物因素,，其中干旱造成的损失最大。 在我国尤其是干旱和半干旱地区，缺水问题一直是限制农业生产的最主要因子之一。 如何通过提高作物的抗旱性来增加粮食产量、节约资源和改善环境，已成为我国农业持续高效发展的重大课题。 植物内生真菌的研究可望为植物的抗旱性研究提供新的思路，因此人们对植物内生真菌对植物抗旱性的影响及其在农业上的应用潜力日益关注。
内生真菌对药用植物生长发育的影响
内生真菌可增加药用植物的总生物量、单株花序数量和种子数量，提高药用植物种子的饱满率和发芽率，促进幼苗存活和分蘖生长，如一些内生真菌可提高天麻、 长苏石斛、细叶石斛等兰科药用植物的种子发芽率[6]。铁皮石斛气生根可与内生真菌Mycena sp.共生形成内生型的“兰科菌根”，促进水分和营养物质的吸收，供其正常生长与发育[7]。从兰科植物根系分离的内生真菌 Epulorhiza sp.（MF15和MF18）及Mycena sp.（MF23和MF24）与金钗石斛共生培养能促进金钗石斛的生长[8]。线莲分别与开唇兰小菇、石斛小菇和兰小菇3种内生真菌共生培养一段时间，可以促进金线莲无菌苗的生长，增加气生根的数量,从而提高无菌苗出瓶后的成活率，使之更易适应环境，这对保护、扩繁与人工栽培石斛、金线莲等珍稀濒危药用植物具有重要的指导意义[9]。
目 录
1 绪论 1
1.1 凹叶厚朴 1
1.2 内生真菌与宿主致病菌 1
1.1. 内生真菌的生理活性 1
1.1.1. 内生真菌对植物抗旱性的影响 1
1.1.2. 内生真菌对药用植物生长发育的影响 2
1.1.3. 内生真菌对药用植物活性成分合成和积累的影响 3
1.1.4. 内生真菌对药用植物抗逆性的影响 3
1.2. 宿主致病菌的生理活性 3
1.2.1. 植物致病菌的宿主专一性 3
1.2.2. 致病菌对植物的作用受环境因子的影响 4
2 实验部分 5
2.1材料与试剂 5
2.1.1材料 5
2.1.2试剂 5
2.1.3实验菌株 5
2.1.4培养基 5
2.2方法 5
2.2.1愈伤组织的培养方法 5
2.2.2抑菌实验方法 6
2.2.3生长条件对愈伤组织生长的影响的实验方法 7
2.2.4内生真菌、病原菌接种及重新分离方法 7
2.3结果与分析 7
2.3.1生长条件对愈伤组织生长的影响结果 7
2.3.2添加宿主植物浸汁对内生真菌抑菌作用的影响 8
2.3.3不同培养基成分对QAY1抑菌活性的影响 9
2.3.4培养方式对内生菌抑菌的影响 10
2.3.5内生菌在植株体内对 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
病原菌的抑制作用 10
2.3.6培养时间对QAY1抑菌活力的影响 11
2.3.7影响发酵液抑菌活性的因素 11
3结论与展望 14
3.1 结论 14
3.2 展望 14
参考文献 16
致 谢 19
1 绪论
1.1 凹叶厚朴
厚朴，植物学范围内别名紫朴、紫油朴、温朴等，为木兰科、木兰属植物，常见为厚朴(原亚种) M. officinalis subsp. officinalis与凹叶厚朴(亚种)M.officinalis subsp. biloba两种，主产于四川、湖北等地。中药材中专指该植物的干燥干皮、根皮及枝皮。46月剥取根皮及枝皮直接阴干，干皮置沸水中微煮后堆置阴湿处，“发汗”至内表面皮紫褐色或棕褐色时，蒸软取出，卷成筒状，干燥。切丝，姜制用。对食积气滞、腹胀便秘、湿阻中焦等疾病有治疗作用。还能加入癌症药物中。凹叶厚朴（学名：Magnolia officinalis）为木兰科木兰属植物。落叶乔木，高可达15米，树形雄伟，花大，是优良的园林绿化树种。秦岭凹叶厚朴由于地势的原因更呈现出它独特的优势，据研究发现凹叶厚朴具有抗菌、抗溃疡、抗痉挛、抗过敏、肌肉松弛等作用。
1.2 内生真菌与宿主致病菌
内生真菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官的细胞间隙或细胞内的细菌，可通过组织学方法或从严格表面消毒的植物组织中分离或从植物组织内直接产生扩增出微生物DNA的方法来证明其内生。目前许多报到已经证明在不同的植物体内都存在大量的内生真菌，但是人们对此知之甚少。近年来由于发现内生真菌对植物具有促生长抗逆境等有益影响，有关植物内生真菌的生物学，生理生态学，次生产物化学的研究日益增多，并取得了可喜的成绩，显示了其具有重要的理论研究意义和广泛的应用前景。
致病菌（Pathogenic?bacteria?)能引起疾病的微生物称为病原微生物或致病菌。病原微生物包括细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体、衣原体、支原体、真菌及放线菌等。一般所说的致病菌指的是病原微生物中的细菌。细菌的致病性与其毒力、侵入数量及侵入门户有关。虽然绝大多数细菌是无害甚至有益的，但是相当大一部分可以致病。
内生真菌的生理活性
内生真菌对植物抗旱性的影响
内生真菌广泛地存在在植物体内，它们在植物体内的生活不会对植物引起任何感病症状，而且内生真菌侵染对植物生长、生物和非生物胁迫抗性很好的促进作用，理解内生真菌在提高植物干旱胁迫耐受性方面的作用和机理对其在缓解植物干旱胁迫中的应用有重要意义。内生真菌对植物抗旱性提高的机理包括:干旱耐受、干旱回避和干旱恢复。内生真菌指寄生于植物的活组织内而不引起任何明显的负影响的真菌。内生真菌在植物体内广泛存在，目前分离和研究得最多的是牧草内生真菌。有资料呈现, 某些内生真菌可以提高植物对生物胁迫与非生物胁迫, 包括干旱、高温、矿物质失调和高盐的耐受性[15]，从而使内生真菌感染过的植株比未感染植株对有限的资源更具竞争力而且长得更好。与病原真菌相比,，内生真菌的研究历史不长。 关于内生真菌的研究一般集中于牧草的抗病方面, 最近其在植物抗逆性上的研究日益引起人们的关注。干旱、盐碱和低温是限制作物产量的三大非生物因素,，其中干旱造成的损失最大。 在我国尤其是干旱和半干旱地区，缺水问题一直是限制农业生产的最主要因子之一。 如何通过提高作物的抗旱性来增加粮食产量、节约资源和改善环境，已成为我国农业持续高效发展的重大课题。 植物内生真菌的研究可望为植物的抗旱性研究提供新的思路，因此人们对植物内生真菌对植物抗旱性的影响及其在农业上的应用潜力日益关注。
内生真菌对药用植物生长发育的影响
内生真菌可增加药用植物的总生物量、单株花序数量和种子数量，提高药用植物种子的饱满率和发芽率，促进幼苗存活和分蘖生长，如一些内生真菌可提高天麻、 长苏石斛、细叶石斛等兰科药用植物的种子发芽率[6]。铁皮石斛气生根可与内生真菌Mycena sp.共生形成内生型的“兰科菌根”，促进水分和营养物质的吸收，供其正常生长与发育[7]。从兰科植物根系分离的内生真菌 Epulorhiza sp.（MF15和MF18）及Mycena sp.（MF23和MF24）与金钗石斛共生培养能促进金钗石斛的生长[8]。线莲分别与开唇兰小菇、石斛小菇和兰小菇3种内生真菌共生培养一段时间，可以促进金线莲无菌苗的生长，增加气生根的数量,从而提高无菌苗出瓶后的成活率，使之更易适应环境，这对保护、扩繁与人工栽培石斛、金线莲等珍稀濒危药用植物具有重要的指导意义[9]。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zygc/486.html
