热水浴法提取菊花中总黄酮的工艺研究(附件)
摘 要本论文对黄酮的药理学作用和提取方法进行了概述，并对野菊花中总黄酮的提取方法进行了综述，最终选取热水浴法来提取野菊花中的黄酮，具体的实验结论如下通过实验优化了野菊花中总黄酮的提取条件，选择的变量为对实验有影响的因素，如溶剂浓度、液固比、提取时间以及温度，各因素变化的趋势通过实验所得的提取率来反应，其中得到的最佳条件为乙醇浓度70%、液固比20:1mL/g、提取温度70℃、提取时间2h。
目 录
1 绪论 1
1.1 野菊花研究进展 1
1.2 黄酮化合物药理学研究进展 1
1.2.1 抗氧化作用 1
1.2.2 保护肝脏 2
1.2.3 抗癌作用 2
1.2.4 抗菌作用 2
1.2.5 保护心血管作用 2
1.2.6 其他作用 3
1.3 黄酮提取方法 3
1.3.1 热水浴浸渍法 3
1.3.2 有机溶剂提取法 3
1.3.3 水提醇沉法 4
1.3.4 微波法 4
1.3.5 超声波提取法 4
1.3.6 大孔树脂吸附法 4
1.3.7 超临界二氧化碳萃取技术 5
1.3.8 其他方法 5
1.4 本论文研究方法及技术路线 5
1.4.1 研究方法 5
1.4.2 技术路线 7
2.野菊花中总黄酮的提取实验 8
2.1 实验试剂和仪器 8
2.1.1 实验的原料和试剂 8
2.1.2 实验设备和仪器 8
2.2 黄酮含量测定 9
2.2.1 芦丁标准品溶液的配制 9
2.2.2 测定波长的选择 9
2.2.3 绘制标准曲线图 9
2.2.4 供试品溶液的制备 10
2.3 单因素实验 11
2.3.1 乙醇浓度对提取率的影响 11
2.3.2 液固比对提取率的影响 11
2.3.3 提取温度对提取率的影响 12
2.3.4 提取时间对提取率的影响 13 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.4 正交实验 14
2.5 方差分析 15
3 结 论 17
参考文献 18
致 谢 20
1 绪论
1.1 野菊花研究进展
野菊花生长于我国大部分地区，属于野生植物，在野地的山坡、草地、公路旁等都能够见着，它的外形与菊花很相似，都具有头状花序，因此被称为野菊花[1]，野菊花性凉，味苦、归肺肝经，具有清热解毒、疏风消肿之功效，临床上常用于治疗风热感冒、目赤肿痛、头晕目眩、疔疮、心胸烦热、肿毒等病；在多类中成药里野菊花都为主要成分，野菊花的叶、花及全草入药[2]，具有散瘀，明目，降血压的作用，因其具有很多药理学作用而受到越来越多研究者的关注。
从现有的研究中我们发现野菊花富含很多有效的化学成分，如萜类物质、挥发油、黄酮化合物、维生素以及人体所必须的一些微量元素(铜、铁、锌、钴、锰、锶、硒等)，而且B、Ca、Mg、Fe的含量比菊花中的高很多[35]，这都促进了野菊花在医药方面的广泛应用。野菊花中黄酮化合物的药理学作用研究广泛而且多样，它对人类疾病的治疗和防治起到了很大的作用，目前对于野菊花药理学的应用主要包括抗氧化作用，保护肝脏，抗癌作用、抗菌作用还有保护心血管作用等其他作用。
1.2 黄酮化合物药理学研究进展
黄酮化合物是一类化合物的总称，在自然界中黄酮有很多的种类，它们存在于不同的药材中，现发现的种类就超过了8000多种，它主要是根据化合物在结构上的不同而进行分类的，人们所熟悉的化合物包括了黄酮、异黄酮、花色苷等。由于黄酮化合物中含有黄酮苷、酚羟基等基团，使得该类化合物具有很好的药理学作用。
1.2.1 抗氧化作用
通过研究野菊花不同提取物的抗氧化活性，从而发现了野菊花黄酮类化合物还具有超氧阴离子的能力、清除羟自由基能力，其抗氧化活性与黄酮类化合物的含量成正比，野菊花水提液对离心体大鼠心、脑、肝、肾LPO均有不同程度的抑制作用，能够大大提高小鼠体内的抗氧化酶活力，其抗氧化作用随着药液浓度的增加而增加，具有很显著的量效关系[6]。
1.2.2 保护肝脏
野菊花提取物中包含了一些对肝损伤有修复功能的物质，如多糖、三萜类化合物等，这些物质主要是促进了肝细胞的增殖作用，达到保护肝脏的作用。金沈锐等人[7]采用野菊花提取物进行小鼠肝脏体外实验研究，发现提取物有效地抑制了肝脏细胞产生大量的过氧化物，通过测定细胞内谷胱甘肽过氧化酶的活性，发现该酶的活性得到增强，清除自由基的能力加强，因此也就起到了保护肝脏的作用。有研究指出，从艾纳香中提取的二氢黄酮以及黄蔑中提取的黄蔑总黄酮等，对中毒性肝损害、急慢性肝炎、肝硬化等也有良好的治疗作用[8]。
1.2.3 抗癌作用
由于存在酚羟基等功能基团能够对癌细胞起作用，同时这类化合物也能够抑制癌细胞的增殖，通过进入到癌细胞中使细胞凋亡或阻滞癌细胞的细胞周期等途径，达到防癌抗癌的效果[9]。
1.2.4 抗菌作用
除了对机体的病变情况具有防治能力外，黄酮还具有很强的抗菌和抗病毒作用，而且该化合物的抗性对象范围是比较广的，如常见的球菌、杆菌等，都具有抑制作用，不仅能够从体内进行抗菌，在体外同样具有很高的抗性作用[10,11]。刘云波等人[12]采用黄芪的提取液进行体外抗性实验，发现浸提液对一般普通的细菌都有很好的抑制作用，而黄芪提取液中的有效物质主要是黄酮，表明了黄酮具有很好的抗菌效果。
1.2.5 保护心血管作用
黄酮化合物对于心血管的预防和治疗具有很好的功效，从正面不仅可以抑制心肌组织中ATP的酶活力，而且可以使得脂蛋白在血液中的含量降低，反面同时能够显著增强机体的抗氧化能力，使得自由基对人体内部器官的细胞损伤降低，心肌功能得到明显的改善。李庆林等人[13]将黄蜀葵的提取物注射到大鼠体内，检测大鼠体内酶活作用情况，发现一些具有抗氧化、保护心血管的酶活力得到了提高，而一些具有损伤作用的化合物，如丙二醛等则受到了抑制，表明黄酮是具有一定的保护心血管作用。
1.2.6 其他作用
除了上述的药理学作用，野菊花还有其他的一些药用价值，如野菊花中的内脂、黄酮苷对降低血压有很好的作用，野菊花的解聚作用是丹参和党参的几十倍对血小板的聚集影响很大，野菊花的水提物和挥发油有抗炎免疫作用，它能够对疾病起到预防发生的作用，同时由于野菊花的色素属于天然的，质量较高，也是一种很好的天然食用添加剂，兼具了药理学和食用功能，因此开发野菊花有利于其得到充分的应用。
1.3 黄酮提取方法
1.3.1 热水浴浸渍法
热水浴浸渍法是将原材料用适宜的溶剂通过热水浴控制提取温度，浸泡出有效成分的一种提取方法。取一定量粉碎后的原材料，放在有盖的容器中，在容器中加入适量的溶剂之后将盖子密封，搅拌或者震荡，浸渍至规定时间使得有效成分尽量多的浸出。倒出上清液，过滤多次之后压榨残渣，合并滤液和压榨液，过滤浓缩至适宜浓度。
目 录
1 绪论 1
1.1 野菊花研究进展 1
1.2 黄酮化合物药理学研究进展 1
1.2.1 抗氧化作用 1
1.2.2 保护肝脏 2
1.2.3 抗癌作用 2
1.2.4 抗菌作用 2
1.2.5 保护心血管作用 2
1.2.6 其他作用 3
1.3 黄酮提取方法 3
1.3.1 热水浴浸渍法 3
1.3.2 有机溶剂提取法 3
1.3.3 水提醇沉法 4
1.3.4 微波法 4
1.3.5 超声波提取法 4
1.3.6 大孔树脂吸附法 4
1.3.7 超临界二氧化碳萃取技术 5
1.3.8 其他方法 5
1.4 本论文研究方法及技术路线 5
1.4.1 研究方法 5
1.4.2 技术路线 7
2.野菊花中总黄酮的提取实验 8
2.1 实验试剂和仪器 8
2.1.1 实验的原料和试剂 8
2.1.2 实验设备和仪器 8
2.2 黄酮含量测定 9
2.2.1 芦丁标准品溶液的配制 9
2.2.2 测定波长的选择 9
2.2.3 绘制标准曲线图 9
2.2.4 供试品溶液的制备 10
2.3 单因素实验 11
2.3.1 乙醇浓度对提取率的影响 11
2.3.2 液固比对提取率的影响 11
2.3.3 提取温度对提取率的影响 12
2.3.4 提取时间对提取率的影响 13 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.4 正交实验 14
2.5 方差分析 15
3 结 论 17
参考文献 18
致 谢 20
1 绪论
1.1 野菊花研究进展
野菊花生长于我国大部分地区，属于野生植物，在野地的山坡、草地、公路旁等都能够见着，它的外形与菊花很相似，都具有头状花序，因此被称为野菊花[1]，野菊花性凉，味苦、归肺肝经，具有清热解毒、疏风消肿之功效，临床上常用于治疗风热感冒、目赤肿痛、头晕目眩、疔疮、心胸烦热、肿毒等病；在多类中成药里野菊花都为主要成分，野菊花的叶、花及全草入药[2]，具有散瘀，明目，降血压的作用，因其具有很多药理学作用而受到越来越多研究者的关注。
从现有的研究中我们发现野菊花富含很多有效的化学成分，如萜类物质、挥发油、黄酮化合物、维生素以及人体所必须的一些微量元素(铜、铁、锌、钴、锰、锶、硒等)，而且B、Ca、Mg、Fe的含量比菊花中的高很多[35]，这都促进了野菊花在医药方面的广泛应用。野菊花中黄酮化合物的药理学作用研究广泛而且多样，它对人类疾病的治疗和防治起到了很大的作用，目前对于野菊花药理学的应用主要包括抗氧化作用，保护肝脏，抗癌作用、抗菌作用还有保护心血管作用等其他作用。
1.2 黄酮化合物药理学研究进展
黄酮化合物是一类化合物的总称，在自然界中黄酮有很多的种类，它们存在于不同的药材中，现发现的种类就超过了8000多种，它主要是根据化合物在结构上的不同而进行分类的，人们所熟悉的化合物包括了黄酮、异黄酮、花色苷等。由于黄酮化合物中含有黄酮苷、酚羟基等基团，使得该类化合物具有很好的药理学作用。
1.2.1 抗氧化作用
通过研究野菊花不同提取物的抗氧化活性，从而发现了野菊花黄酮类化合物还具有超氧阴离子的能力、清除羟自由基能力，其抗氧化活性与黄酮类化合物的含量成正比，野菊花水提液对离心体大鼠心、脑、肝、肾LPO均有不同程度的抑制作用，能够大大提高小鼠体内的抗氧化酶活力，其抗氧化作用随着药液浓度的增加而增加，具有很显著的量效关系[6]。
1.2.2 保护肝脏
野菊花提取物中包含了一些对肝损伤有修复功能的物质，如多糖、三萜类化合物等，这些物质主要是促进了肝细胞的增殖作用，达到保护肝脏的作用。金沈锐等人[7]采用野菊花提取物进行小鼠肝脏体外实验研究，发现提取物有效地抑制了肝脏细胞产生大量的过氧化物，通过测定细胞内谷胱甘肽过氧化酶的活性，发现该酶的活性得到增强，清除自由基的能力加强，因此也就起到了保护肝脏的作用。有研究指出，从艾纳香中提取的二氢黄酮以及黄蔑中提取的黄蔑总黄酮等，对中毒性肝损害、急慢性肝炎、肝硬化等也有良好的治疗作用[8]。
1.2.3 抗癌作用
由于存在酚羟基等功能基团能够对癌细胞起作用，同时这类化合物也能够抑制癌细胞的增殖，通过进入到癌细胞中使细胞凋亡或阻滞癌细胞的细胞周期等途径，达到防癌抗癌的效果[9]。
1.2.4 抗菌作用
除了对机体的病变情况具有防治能力外，黄酮还具有很强的抗菌和抗病毒作用，而且该化合物的抗性对象范围是比较广的，如常见的球菌、杆菌等，都具有抑制作用，不仅能够从体内进行抗菌，在体外同样具有很高的抗性作用[10,11]。刘云波等人[12]采用黄芪的提取液进行体外抗性实验，发现浸提液对一般普通的细菌都有很好的抑制作用，而黄芪提取液中的有效物质主要是黄酮，表明了黄酮具有很好的抗菌效果。
1.2.5 保护心血管作用
黄酮化合物对于心血管的预防和治疗具有很好的功效，从正面不仅可以抑制心肌组织中ATP的酶活力，而且可以使得脂蛋白在血液中的含量降低，反面同时能够显著增强机体的抗氧化能力，使得自由基对人体内部器官的细胞损伤降低，心肌功能得到明显的改善。李庆林等人[13]将黄蜀葵的提取物注射到大鼠体内，检测大鼠体内酶活作用情况，发现一些具有抗氧化、保护心血管的酶活力得到了提高，而一些具有损伤作用的化合物，如丙二醛等则受到了抑制，表明黄酮是具有一定的保护心血管作用。
1.2.6 其他作用
除了上述的药理学作用，野菊花还有其他的一些药用价值，如野菊花中的内脂、黄酮苷对降低血压有很好的作用，野菊花的解聚作用是丹参和党参的几十倍对血小板的聚集影响很大，野菊花的水提物和挥发油有抗炎免疫作用，它能够对疾病起到预防发生的作用，同时由于野菊花的色素属于天然的，质量较高，也是一种很好的天然食用添加剂，兼具了药理学和食用功能，因此开发野菊花有利于其得到充分的应用。
1.3 黄酮提取方法
1.3.1 热水浴浸渍法
热水浴浸渍法是将原材料用适宜的溶剂通过热水浴控制提取温度，浸泡出有效成分的一种提取方法。取一定量粉碎后的原材料，放在有盖的容器中，在容器中加入适量的溶剂之后将盖子密封，搅拌或者震荡，浸渍至规定时间使得有效成分尽量多的浸出。倒出上清液，过滤多次之后压榨残渣，合并滤液和压榨液，过滤浓缩至适宜浓度。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zygc/573.html
