富营养化水体中鲢鳙鱼幼鱼肠道结构的初步研究
本实验选取3个不同水域暂养的鲢鳙鱼作为实验样本测量样本鲢鳙鱼幼鱼的基本生物学数据，对样本鱼的肠道进行切片，观察鲢鳙鱼肠道的组织结构，采集肠道相关的数量性状，证实鲢鳙鱼肠道系数和水域的营养化程度是有一定关系的。结果得出竺山湖的鲢鳙鱼的肠道系数在三个富营养化水域中是最高的；三个水域中鲢鳙鱼肠道绒毛数、皱襞个数以及肌层厚度，三国城水域的鲢鳙鱼最高，通过分析鱼类肠道的功能发现肠道的这些数量性状都从一定程度上反映了鱼类的生长环境，进而可以了解太湖水体环境对鲢鳙鱼生活的影响，以及放流花白鲢在不同水域中的抑藻效果，为评价鲢鳙鱼增殖放流效果提供基础数据。
目录
摘要 1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验时间与地点 2
1.2 实验材料 2
1.3 主要实验仪器2
1.4 测定指标2
1.5 实验方法2
1.5.1形态学指标的测定 2
1.5.1.1 样品采集及编号 2
1.5.1.2 组织切片制作 2
1.5.1.3 观察及拍照 3
1.5.1.4数据测量方法 3
2 结果与分析 3 2.1 样本形态学指标的测定的结果3
2.2 鲢鳙鱼肠道系数计算结果 4
2.3 肠道组织形态观察与分析4
2.4 鲢鳙鱼肠道绒毛数、皱襞个数、肌层厚度5
3 讨论6
4 展望6
致谢 7
参考文献 7
富营养化水体中鲢鳙鱼幼鱼肠道结构的初步研究
水产养殖学生 袁辉
引言
鱼类消化道对食物的消化和吸收直接关系鱼类生长、发育乃至繁殖等重要生命活动。国内外许多学者已对多种鱼类的消化道或消化系统进行过形态学和组织学的研究，有关其大体解剖、生化、发生、生态、生理、繁殖等方面的报道较多[15]，但是在细胞和组织学方面，特别是对整个消化道组织结构的具体描述的报道较少，国内外相关的基础研究也不多。鲢(Hypophthu *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
lmachthys molatrax)、鳙( Arastachthys nobalas)是我国传统的养殖鱼类种，具有较高经济开发价值，目前仍是大宗淡水养殖种类。迄今为止，人们对这几种鱼已经进行了大量研究，其养殖颇具规模，但对它们消化道组织形态学结构与食性相关性的研究尚不够深入。
已有的研究报道对多种鱼类肠道的结构特征、组织构成、组织形态、细胞种类、细胞形态等方面进行了详细的描述[612] :多数学者将鱼类肠道划分为粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜层四个部分;其中粘膜层是消化管管壁的最里层,由粘膜上皮、固有膜和基膜组成。
为改善太湖水环境，保护太湖生物资源，提高生物多样性，促进经济社会可持续发展，省太湖办启动了太湖流域主要湖泊鱼类抑藻放流项目。太湖渔业管理委员会办公室在竺山湖、乌龟山等部分富营养化水域，开展了净水渔业工作，通过放流鲢鳙鱼进行控藻、净水。本研究拟通过对放流鲢鳙的肠道结构初步分析，掌握富营养化水体中鲢鳙幼鱼肠道结构的特征，为下一步研究蓝藻对鲢鳙消化道的影响提供基础数据，也为净水渔业的相关研究提供理论基础。
1材料与方法
1.1试验时间与地点
实验时间：2014.9——2015.5
实验地点：大学无锡渔业学院大水面增养殖实验室。
1.2实验材料
实验对象：1龄鲢鳙鱼，由太湖富营养化湖区中暂养的鲢鳙夏花采样得到。
实验试剂：Bouin液，多聚甲醛，甲醇与甲醛混合固定液，苏木素，伊红，1%盐酸酒精，碱性水(3050°C 的洗衣粉水)，95%酒精，无水酒精，二甲苯。
1.3主要实验仪器
(1)生物用全自动组织包埋机,切片机(RM2235型，德国玩Leica公司）,摊片机(KDTsl型，浙江金华科迪仪器设备有限公司）,烤片机(Hl1220型,德国址Leica公司）；
(2)Leica CM900冰冻切片机,多功能全自动聚焦显微镜成像系统,标尺，天枰等。
1.4测定指标
鱼体全长，体长，肠道长度，肠道绒毛数，肌层厚度，粘膜皱襞个数。
1.5实验方法
1.5.1形态学指标的测定
1.5.1.1样品采集及编号
实验鲢鳙鱼采样后,置放有冰块的保温箱中带回,回到实验室立即进行鱼的全长、体长，重量等生物学指标的测量，每个地点随机选取3条花鲢，3条白鲢，然后采用T型标记法进行标记，再解剖，取出肠道，量取长度后放入Bouin液中固定,记录样鱼的编号以及相关的生物学指标。
1.5.1.2组织切片制作
采得的肠道样本,置于Bouin液(饱和苦味酸的水溶液75ml+甲醛25ml+冰醋酸5ml)或者多聚甲醛中固定，用于组织形态研究的肠道样本：①前期使用的是石蜡切片机进行连续横向切片，厚度在5μm，步骤是：取样置于石蜡盒然后标号密封→脱水→透明→浸蜡→石蜡包埋→切片→展片→烤片→然后用HE染色法进行染色，性树胶封片，整个过程用时两天半；②后期使用德国Leica CM900冰冻切片机横向连续切片,厚度为58μm,先取样→OTC包埋→低温固定→切片→铺片于清洁的载玻片上→脱水固定→染色,中性树胶封片，整个过程顺利的话约20分钟。
1.5.1.3观察及拍照
光学显微镜下进行观察,并使用多功能全自动聚焦显微摄影系统拍照。每个肠道样本制作石蜡切片5张,选取相对完整的1张进行拍照及数据测量,而后使用ImageJ14.0图像分析软件进行图像数据测量；每个肠道样本制作3个冰冻切片，选取相对完好的1张进行拍照及测量，分析工具同上。
1.5.1.4数据测量方法
分别测量肌层厚度、肠道绒毛数、皱襞个数。
(1)皱襞是指由粘膜层和粘膜下层向肠腔凸起的部分，皱襞个数指的是肠腔横切面上粘膜皱襞的个数。
(2)肌层厚度的测量:在每张切片中随机测量30处肌层的厚度,取其平均值作为测量结果。
(3)肠道绒毛数是指肠腔横切面上绒毛的个数。
2 结果与分析
2.1样本形态学指标的测定的结果
三个水域随机选择的鲢鳙鱼幼鱼作为样本，采样时间地点，样本编号以及不同水域的鲢鳙鱼测量的全长，体长，重量结果如下表所示：
目录
摘要 1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验时间与地点 2
1.2 实验材料 2
1.3 主要实验仪器2
1.4 测定指标2
1.5 实验方法2
1.5.1形态学指标的测定 2
1.5.1.1 样品采集及编号 2
1.5.1.2 组织切片制作 2
1.5.1.3 观察及拍照 3
1.5.1.4数据测量方法 3
2 结果与分析 3 2.1 样本形态学指标的测定的结果3
2.2 鲢鳙鱼肠道系数计算结果 4
2.3 肠道组织形态观察与分析4
2.4 鲢鳙鱼肠道绒毛数、皱襞个数、肌层厚度5
3 讨论6
4 展望6
致谢 7
参考文献 7
富营养化水体中鲢鳙鱼幼鱼肠道结构的初步研究
水产养殖学生 袁辉
引言
鱼类消化道对食物的消化和吸收直接关系鱼类生长、发育乃至繁殖等重要生命活动。国内外许多学者已对多种鱼类的消化道或消化系统进行过形态学和组织学的研究，有关其大体解剖、生化、发生、生态、生理、繁殖等方面的报道较多[15]，但是在细胞和组织学方面，特别是对整个消化道组织结构的具体描述的报道较少，国内外相关的基础研究也不多。鲢(Hypophthu *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
lmachthys molatrax)、鳙( Arastachthys nobalas)是我国传统的养殖鱼类种，具有较高经济开发价值，目前仍是大宗淡水养殖种类。迄今为止，人们对这几种鱼已经进行了大量研究，其养殖颇具规模，但对它们消化道组织形态学结构与食性相关性的研究尚不够深入。
已有的研究报道对多种鱼类肠道的结构特征、组织构成、组织形态、细胞种类、细胞形态等方面进行了详细的描述[612] :多数学者将鱼类肠道划分为粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜层四个部分;其中粘膜层是消化管管壁的最里层,由粘膜上皮、固有膜和基膜组成。
为改善太湖水环境，保护太湖生物资源，提高生物多样性，促进经济社会可持续发展，省太湖办启动了太湖流域主要湖泊鱼类抑藻放流项目。太湖渔业管理委员会办公室在竺山湖、乌龟山等部分富营养化水域，开展了净水渔业工作，通过放流鲢鳙鱼进行控藻、净水。本研究拟通过对放流鲢鳙的肠道结构初步分析，掌握富营养化水体中鲢鳙幼鱼肠道结构的特征，为下一步研究蓝藻对鲢鳙消化道的影响提供基础数据，也为净水渔业的相关研究提供理论基础。
1材料与方法
1.1试验时间与地点
实验时间：2014.9——2015.5
实验地点：大学无锡渔业学院大水面增养殖实验室。
1.2实验材料
实验对象：1龄鲢鳙鱼，由太湖富营养化湖区中暂养的鲢鳙夏花采样得到。
实验试剂：Bouin液，多聚甲醛，甲醇与甲醛混合固定液，苏木素，伊红，1%盐酸酒精，碱性水(3050°C 的洗衣粉水)，95%酒精，无水酒精，二甲苯。
1.3主要实验仪器
(1)生物用全自动组织包埋机,切片机(RM2235型，德国玩Leica公司）,摊片机(KDTsl型，浙江金华科迪仪器设备有限公司）,烤片机(Hl1220型,德国址Leica公司）；
(2)Leica CM900冰冻切片机,多功能全自动聚焦显微镜成像系统,标尺，天枰等。
1.4测定指标
鱼体全长，体长，肠道长度，肠道绒毛数，肌层厚度，粘膜皱襞个数。
1.5实验方法
1.5.1形态学指标的测定
1.5.1.1样品采集及编号
实验鲢鳙鱼采样后,置放有冰块的保温箱中带回,回到实验室立即进行鱼的全长、体长，重量等生物学指标的测量，每个地点随机选取3条花鲢，3条白鲢，然后采用T型标记法进行标记，再解剖，取出肠道，量取长度后放入Bouin液中固定,记录样鱼的编号以及相关的生物学指标。
1.5.1.2组织切片制作
采得的肠道样本,置于Bouin液(饱和苦味酸的水溶液75ml+甲醛25ml+冰醋酸5ml)或者多聚甲醛中固定，用于组织形态研究的肠道样本：①前期使用的是石蜡切片机进行连续横向切片，厚度在5μm，步骤是：取样置于石蜡盒然后标号密封→脱水→透明→浸蜡→石蜡包埋→切片→展片→烤片→然后用HE染色法进行染色，性树胶封片，整个过程用时两天半；②后期使用德国Leica CM900冰冻切片机横向连续切片,厚度为58μm,先取样→OTC包埋→低温固定→切片→铺片于清洁的载玻片上→脱水固定→染色,中性树胶封片，整个过程顺利的话约20分钟。
1.5.1.3观察及拍照
光学显微镜下进行观察,并使用多功能全自动聚焦显微摄影系统拍照。每个肠道样本制作石蜡切片5张,选取相对完整的1张进行拍照及数据测量,而后使用ImageJ14.0图像分析软件进行图像数据测量；每个肠道样本制作3个冰冻切片，选取相对完好的1张进行拍照及测量，分析工具同上。
1.5.1.4数据测量方法
分别测量肌层厚度、肠道绒毛数、皱襞个数。
(1)皱襞是指由粘膜层和粘膜下层向肠腔凸起的部分，皱襞个数指的是肠腔横切面上粘膜皱襞的个数。
(2)肌层厚度的测量:在每张切片中随机测量30处肌层的厚度,取其平均值作为测量结果。
(3)肠道绒毛数是指肠腔横切面上绒毛的个数。
2 结果与分析
2.1样本形态学指标的测定的结果
三个水域随机选择的鲢鳙鱼幼鱼作为样本，采样时间地点，样本编号以及不同水域的鲢鳙鱼测量的全长，体长，重量结果如下表所示：
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