水稻白叶枯病菌hpa1基因无痕敲除及功能研究
水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)是水稻上的一个致病病原菌，该病原引起水稻的维管束病害。Hpa1属于harpin蛋白，harpin 的基本特征是富含甘氨酸、热稳定以及多效性。这种蛋白与病原菌在寄主植物上的致病性有关，并在非寄主植物上诱导过敏性反应(HR)，还能促进植物生长，诱导植物抗病、抗虫、耐旱。本文介绍通过无痕敲除水稻黄单胞菌Hpa1基因，经PCR 鉴定获得无痕敲除菌株，并用PXO99野生菌株及实验室先前构建含Kan的Hpa1敲除突变体作为对照，研究了该无痕敲除菌株在水稻品种日本晴上的致病力变化。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法3
1.1 供试菌株和质粒 5
1.2 培养基、抗生素和培养温度5
1.2.1 培养基5
1.2.2 培养温度6
1.2.3 抗生素6
1.3 电泳缓冲液及主要试剂6
1.3.1 核酸电泳缓冲液6
1.3.2 主要试剂6
1.4 引物 6
1.5 水稻品种7
1.6 主要试剂7
1.7 实验器材7
1.8 实验原理7
1.8.1 敲除载体构建策略7
1.8.2 同源重组原理 8
1.9 试验方法 9
1.9.1 SacB介导的基因无痕敲除9
1.9.2 PXO99A突变体的致病性测定 12
2 结果与分析 13
2.1 Hpa1基因同源敲除载体的构建 13
2.2 PXO99单交换突变体的筛选13
2.3 PXO99双交换突变体的筛选14
2.4 突变的目的菌株的功能变化的研究15
3 讨论 16
致谢16
参考文献16
水稻白叶枯病菌Hpa1基因的无痕敲除及功能研究
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法3
1.1 供试菌株和质粒 5
1.2 培养基、抗生素和培养温度5
1.2.1 培养基5
1.2.2 培养温度6
1.2.3 抗生素6
1.3 电泳缓冲液及主要试剂6
1.3.1 核酸电泳缓冲液6
1.3.2 主要试剂6
1.4 引物 6
1.5 水稻品种7
1.6 主要试剂7
1.7 实验器材7
1.8 实验原理7
1.8.1 敲除载体构建策略7
1.8.2 同源重组原理 8
1.9 试验方法 9
1.9.1 SacB介导的基因无痕敲除9
1.9.2 PXO99A突变体的致病性测定 12
2 结果与分析 13
2.1 Hpa1基因同源敲除载体的构建 13
2.2 PXO99单交换突变体的筛选13
2.3 PXO99双交换突变体的筛选14
2.4 突变的目的菌株的功能变化的研究15
3 讨论 16
致谢16
参考文献16
水稻白叶枯病菌Hpa1基因的无痕敲除及功能研究
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