轮枝镰刀菌中swi4swi6复合体生物学功能研究
轮枝镰孢菌所造成的的玉米穗腐和茎基腐病是玉米上重要的一种病害。通过对轮枝镰孢菌突变体?FvSwi4和?FvSwi6对玉米粒和玉米茎干的致病性检测发现，在玉米粒上突变体?FvSwi4和?FvSwi6的菌丝明显减少，玉米粒的腐烂现象明显减弱。在玉米茎干上，发现突变体?FvSwi4和?FvSwi6的褐色病斑长度明显小于野生型菌株Fv102。这表明突变体?FvSwi4和?FvSwi6对玉米致病性减弱。真菌的无性生殖对真菌在环境中存活，并对真菌对对植物侵染是保证迅速扩展与是植物发病有重要意义。在不同培养基上的生长速率说明，突变体?FvSwi4和?FvSwi6在PDA、CM和MM培养基上的生长速率菌小于野生型菌Fv102。对分生孢子的产孢量的测定表明，这两个基因会影响轮枝镰孢菌的分生孢子的形成，从而导致轮枝镰孢菌的生长缓慢。有性生殖是真菌进化中必不可少的阶段，对轮枝镰孢菌的子囊壳产生的实验表明，突变体?FvSwi4和?FvSwi6完全无法产生子囊壳，说明这两个基因对轮枝镰孢菌的有性生殖过程也有着重要影响。敲除突变体?FvSwi4、?FvSwi6影响真菌色素的合成，本研究进一步扩大培养，通过硅胶层析、凝胶、HPLC等分离技术分离提纯色素化合物，并通过核磁共振分析、质谱分析等技术分析其化学结构，一共得到3个化合物。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 菌株 2
1.1. 2 抗菌实验指示菌株2
1.1.3 质粒 2
1.1.4 主要仪器2
1.1.5 主要试剂及耗材 3
1.1.6 常用培养基3
1.2 方法 3
1.2.1 轮枝镰孢菌的培养、保存、以及产胞方法3
1.2. 2 轮枝镰孢菌对玉米茎干及玉米粒的致病性测定3
1.2.3 钢珠法小量粗提基因组DNA3
1.2.4 CTAB法大抽提轮枝镰孢菌DNA4
1.2.5 DNA电泳方法4
1.2.6 大肠杆菌的转化4
1.2.7 质粒的提 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
取方法4
1.2.8 质粒酶切5
1.2.9 敲除载体的构建5
1.2.10 PEG介导的轮枝镰孢菌原生质转化6
1.2.10.1 分生孢子制备6
1.2.10.2 幼殖体制备6
1.2.10.3 原生质体制备6
1.2.10.4 原生质体转化6
1.2.11 菌株ΔFvSwi6代谢产物研究技术路线7
1.2.12 ΔFvSwi6代谢产物的分离纯化7
1.2. 13 化合物的结构鉴定9
1.2. 14 化合物的抗菌活性测定10
1.2.14. 1 菌丝生长抑制法10
1.2.14. 2 化合物有效抑制中浓度（EC50）的测定10
2 结果与分析11
2.1 基因FvSwi4和FvSwi6的敲除11
2.2 敲除基因的突变体菌株在培养基中的生长12
2.3 轮枝镰孢菌对玉米穗及玉米茎干致病性测定12
2.4 基因敲除后突变体菌株ΔFvSwi6和ΔFvSwi4代谢产物中色素组成13
2.5 ΔFvSwi6中两种色素化合物的分离结果13
2.6 化合物的结构鉴定（从菌株ΔFvSwi6中分离获得）14
3 讨论 14
致谢15
参考文献15
轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)中 Swi4Swi6复合体生物学功能研究
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 菌株 2
1.1. 2 抗菌实验指示菌株2
1.1.3 质粒 2
1.1.4 主要仪器2
1.1.5 主要试剂及耗材 3
1.1.6 常用培养基3
1.2 方法 3
1.2.1 轮枝镰孢菌的培养、保存、以及产胞方法3
1.2. 2 轮枝镰孢菌对玉米茎干及玉米粒的致病性测定3
1.2.3 钢珠法小量粗提基因组DNA3
1.2.4 CTAB法大抽提轮枝镰孢菌DNA4
1.2.5 DNA电泳方法4
1.2.6 大肠杆菌的转化4
1.2.7 质粒的提 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
取方法4
1.2.8 质粒酶切5
1.2.9 敲除载体的构建5
1.2.10 PEG介导的轮枝镰孢菌原生质转化6
1.2.10.1 分生孢子制备6
1.2.10.2 幼殖体制备6
1.2.10.3 原生质体制备6
1.2.10.4 原生质体转化6
1.2.11 菌株ΔFvSwi6代谢产物研究技术路线7
1.2.12 ΔFvSwi6代谢产物的分离纯化7
1.2. 13 化合物的结构鉴定9
1.2. 14 化合物的抗菌活性测定10
1.2.14. 1 菌丝生长抑制法10
1.2.14. 2 化合物有效抑制中浓度（EC50）的测定10
2 结果与分析11
2.1 基因FvSwi4和FvSwi6的敲除11
2.2 敲除基因的突变体菌株在培养基中的生长12
2.3 轮枝镰孢菌对玉米穗及玉米茎干致病性测定12
2.4 基因敲除后突变体菌株ΔFvSwi6和ΔFvSwi4代谢产物中色素组成13
2.5 ΔFvSwi6中两种色素化合物的分离结果13
2.6 化合物的结构鉴定（从菌株ΔFvSwi6中分离获得）14
3 讨论 14
致谢15
参考文献15
轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)中 Swi4Swi6复合体生物学功能研究
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