海滨雀稗pvhma3基因克隆及其序列分析

镉作为一种生物毒性最强的重金属元素,是影响植物生长和生态安全的重要胁迫因子。利用耐镉草坪草进行土壤重金属修复具有绿色、经济、环保的优势,耐镉草坪草资源挖掘及其耐镉分子机制解析能加快草坪草耐镉育种的进程。前期实验发现,海滨雀稗(Paspalum vaginatum)是耐镉性最强的暖季型草坪草,但其耐镉分子机制尚不清楚。已有研究发现heavy metal ATPase3(HMA3)正调控了植物耐镉性;本研究拟从海滨雀稗中克隆PvHMA3基因,并通过生物信息学软件进行序列聚类分析、跨膜区分析及其蛋白修饰位点检测。本研究的实施,将为草坪草耐镉分子育种提供优异基因资源,同时为深入解析HMA蛋白的翻译后修饰机制奠定基础。
目录
摘要 1
关键词 1
ABSTRACT 1
KEY WORDS 1
1材料与方法 2
1.1材料 2
1.1.1植物材料 2
1.1.2载体 3
1.1.3试剂及试剂盒 3
1.1.4培养基 3
1.2方法 3
1.2.1序列同源搜索及引物的设计 3
1.2.2海滨雀稗总RNA的提取 3
1.2.3海滨雀稗RNA反转录cDNA 3
1.2.4海滨雀稗PvHMA3基因的克隆 4
1.2.5构建植物表达载体 5
1.2.6菌落PCR 6
1.2.7质粒小提试剂盒方法 6
2结果与分析 7
2.1PvHMA3基因cDNA全长的克隆 7
2.2PvHMA3的序列分析 7
2.3PvHMA3 蛋白跨膜结构域 10
2.4PvHMA3蛋白修饰位点的预测 11
3讨论 11
致谢 12
参考文献 13
海滨雀稗PvHMA3基因克隆及其序列分析

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