女贞叶内生真菌抗菌活性研究(附件)
摘 要本次实验首先从女贞叶中分离内生真菌，然后对分离出的21株内生真菌进行显微观察，并鉴定这些内生真菌的种属，同时利用菌饼法筛选21株内生真菌的抗菌活性。从女贞叶中分离得到的21株内生真菌分为5个属，结果表明女贞叶内生真菌中广泛分布着有抗菌活性的菌株。其中的优势菌属包括青霉属和毛霉菌，这两种菌属对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及大肠杆菌的抑制活性都比较高，因此未来的研究价值非常高，具有非常广阔的空间可以进一步研究。 目 录
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述 1
1.1.1 植物内生真菌的定义 1
1.1.2 植物内生真菌的物种多样性 1
1.1.3 内生真菌的优势 2
1.1.4 内生真菌的分布规律 2
1.1.5 国内外对内生真菌的研究现状及其生物活性物质 2
1.2 女贞的研究概况 4
1.2.1 女贞简介 4
1.2.2 女贞药理作用研究 4
1.2.3 女贞叶化学成分研究 5
1.2.4 女贞叶的临床应用 5
1.3 研究的目的及意义 5
2 实验内容
2.1 材料与方法 7
2.1.1 试验样本及指示菌 7
2.1.2 配制培养基 7
2.1.3 实验方法 8
2.2 结果与分析 9
2.2.1 确定实验对照方法 9
2.2.2 内生菌的种群分类组成 9
2.2.3 女贞内生真菌抑菌活性的筛选 10
2.2.4 女贞内生真菌抑菌试验结果 13
3 小结 16
讨 论 17
参考文献 18
致 谢 20
附 录 21
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述
1.1.1 植物内生真菌的定义
关于植物内生真菌的定义众说纷纭，每个人对内生菌的概念范畴都有自己的理解。但有一个中心是不会变的—即内生真菌是寄
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
/> 3 小结 16
讨 论 17
参考文献 18
致 谢 20
附 录 21
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述
1.1.1 植物内生真菌的定义
关于植物内生真菌的定义众说纷纭，每个人对内生菌的概念范畴都有自己的理解。但有一个中心是不会变的—即内生真菌是寄生于植物体内的一种特殊微生物，并且和宿主植物是互惠共生体。内生真菌因表面没有任何肉眼可见的菌体结构，所以难以辨认。1866年De Bary第一次提出了内生真菌的概念，之后Carroll再一次将内生菌的定义具体化，强调了内生菌与植物的互惠共生关系。内生真菌即为在不引起明显病害症状的情况下生活在地上部分、活的植物组织内的真菌。所以，植物致病菌和菌根菌不包括在Carroll的这个内生菌范畴内[1]。
1.1.2 植物内生真菌的物种多样性
我国自然资源丰富，尤其是植物资源更是非常充足，但在植物资源的利用上却还不够完全。自从1991年有学者提出内生真菌的概念后，人们开始了对植物内生真菌的探索。在这条漫长的科学旅途中，对内生真菌的概念范畴进行了一次又一次的验证，最终将内生真菌定义为一类寄生于植物体内但并不会对植物体造成任何伤害的特殊菌种。在对植物内生真菌的探索中发现了内生菌物种具有多样性，这就无形间加大了内生真菌的探索难度。关于内生真菌多样性的认识，目前还不够深入，所以需要我们去研究发掘[2]。Hawkswortb 在1991 年发现了内生真菌的存在，他对研究过的数百种植物进行比对，发现内生真菌普遍存在于植物体内[3]。植物体内可以分离出大量内生真菌，并且这些内生真菌都不相同，每一种植物中都可以分离出多种内生真菌。Fisher 等1993 报道了Eucalyptus nitens 上的内生菌有60 种，Bills 和Polishook 1992 发现Chamaecyparis thyotdes 上的内生真菌有88 种之多。在内生真菌的研究中，内生真菌种类多样、和寄主的关系也比较复杂，所以对很多内生真菌的认识还不够清楚。
全世界目前已经发现了69 000多种内生真菌，但科学的脚步并没有停下来，每年被发现的新的内生真菌都有1000余种，全世界内生真菌保守估计总数可达150×104余种[4]。对于药用植物而言，目前统计的12 807种的中药中植物药有11 146种，约占中药资源总数的87％。研究表明，植物体每种细胞内都含有大约4～5种内生真菌，且这些内生真菌都比较专一。因此，具有专一性的内生真菌就有6万多种，药用植物内生真菌具有很好的前景，同时也是一个巨大的资源宝库，值得我们去探索研究。
1.1.3 内生真菌的优势
植物内生真菌与宿主细胞之间存在着特殊的生态关系是因为它们长期需要进行共同作用。从而增强植物适应环境变化的能力。对于其他微生物而言，内生真菌的优势主要集中在三个方面。
第一，内生真菌在国内的研究相对较少，研究发展的空间较大，因此前景广阔； 第二，内生真菌与宿主细胞之间存在特殊生态关系，这就增加了发现其次生代谢产物的几率；
第三，种类多，数量大是内生真菌之所以广泛存在于植物体内的原因，所以需要我们去研究和拓展内生真菌，并且为以后研究其次生代谢产物可以提供相应的素材。
1.1.4 内生真菌的分布规律
关于女贞内生菌的分布规律已经有很多人在探究，无论是女贞叶还是女贞的其他组织器官都可以分离出内生菌。这已经得到了验证，在以往对女贞不同组织的研究中发现，不同植物组织中内生真菌的含量也不相同，因此，在不同植物中内生菌占据着不同的生态位。
1.1.5 国内外对内生真菌的研究现状及其生物活性物质
内生真菌分布广泛，大多数植物中都含有内生真菌。我国地大物博、自然资源丰富，因此从一些药用植物中分离内生真菌是一条很好的途径。在对天然植物资源的利用要追溯到古代，我国古时治病大多采用的都是植物药，因此植物入药早已屡见不鲜，对植物药用的研究也是有一定优势的。在植物资源的探索过程中我国拥有绝对的优势，可以作为参考的资料以及书籍有很多。在此研究中还发现很多植物中都存在内生真菌，因此内生菌普遍存在于植物体内。内生真菌作为新药研究的一项重要内容具有重大意义，因此在药用植物中寻找天然活性物质一直是医学界研究的重点。近几年来，由于抗生素滥用所引起的疾病增多，使大
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述 1
1.1.1 植物内生真菌的定义 1
1.1.2 植物内生真菌的物种多样性 1
1.1.3 内生真菌的优势 2
1.1.4 内生真菌的分布规律 2
1.1.5 国内外对内生真菌的研究现状及其生物活性物质 2
1.2 女贞的研究概况 4
1.2.1 女贞简介 4
1.2.2 女贞药理作用研究 4
1.2.3 女贞叶化学成分研究 5
1.2.4 女贞叶的临床应用 5
1.3 研究的目的及意义 5
2 实验内容
2.1 材料与方法 7
2.1.1 试验样本及指示菌 7
2.1.2 配制培养基 7
2.1.3 实验方法 8
2.2 结果与分析 9
2.2.1 确定实验对照方法 9
2.2.2 内生菌的种群分类组成 9
2.2.3 女贞内生真菌抑菌活性的筛选 10
2.2.4 女贞内生真菌抑菌试验结果 13
3 小结 16
讨 论 17
参考文献 18
致 谢 20
附 录 21
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述
1.1.1 植物内生真菌的定义
关于植物内生真菌的定义众说纷纭，每个人对内生菌的概念范畴都有自己的理解。但有一个中心是不会变的—即内生真菌是寄
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
/> 3 小结 16
讨 论 17
参考文献 18
致 谢 20
附 录 21
1 前言
1.1 植物内生真菌的简述
1.1.1 植物内生真菌的定义
关于植物内生真菌的定义众说纷纭，每个人对内生菌的概念范畴都有自己的理解。但有一个中心是不会变的—即内生真菌是寄生于植物体内的一种特殊微生物，并且和宿主植物是互惠共生体。内生真菌因表面没有任何肉眼可见的菌体结构，所以难以辨认。1866年De Bary第一次提出了内生真菌的概念，之后Carroll再一次将内生菌的定义具体化，强调了内生菌与植物的互惠共生关系。内生真菌即为在不引起明显病害症状的情况下生活在地上部分、活的植物组织内的真菌。所以，植物致病菌和菌根菌不包括在Carroll的这个内生菌范畴内[1]。
1.1.2 植物内生真菌的物种多样性
我国自然资源丰富，尤其是植物资源更是非常充足，但在植物资源的利用上却还不够完全。自从1991年有学者提出内生真菌的概念后，人们开始了对植物内生真菌的探索。在这条漫长的科学旅途中，对内生真菌的概念范畴进行了一次又一次的验证，最终将内生真菌定义为一类寄生于植物体内但并不会对植物体造成任何伤害的特殊菌种。在对植物内生真菌的探索中发现了内生菌物种具有多样性，这就无形间加大了内生真菌的探索难度。关于内生真菌多样性的认识，目前还不够深入，所以需要我们去研究发掘[2]。Hawkswortb 在1991 年发现了内生真菌的存在，他对研究过的数百种植物进行比对，发现内生真菌普遍存在于植物体内[3]。植物体内可以分离出大量内生真菌，并且这些内生真菌都不相同，每一种植物中都可以分离出多种内生真菌。Fisher 等1993 报道了Eucalyptus nitens 上的内生菌有60 种，Bills 和Polishook 1992 发现Chamaecyparis thyotdes 上的内生真菌有88 种之多。在内生真菌的研究中，内生真菌种类多样、和寄主的关系也比较复杂，所以对很多内生真菌的认识还不够清楚。
全世界目前已经发现了69 000多种内生真菌，但科学的脚步并没有停下来，每年被发现的新的内生真菌都有1000余种，全世界内生真菌保守估计总数可达150×104余种[4]。对于药用植物而言，目前统计的12 807种的中药中植物药有11 146种，约占中药资源总数的87％。研究表明，植物体每种细胞内都含有大约4～5种内生真菌，且这些内生真菌都比较专一。因此，具有专一性的内生真菌就有6万多种，药用植物内生真菌具有很好的前景，同时也是一个巨大的资源宝库，值得我们去探索研究。
1.1.3 内生真菌的优势
植物内生真菌与宿主细胞之间存在着特殊的生态关系是因为它们长期需要进行共同作用。从而增强植物适应环境变化的能力。对于其他微生物而言，内生真菌的优势主要集中在三个方面。
第一，内生真菌在国内的研究相对较少，研究发展的空间较大，因此前景广阔； 第二，内生真菌与宿主细胞之间存在特殊生态关系，这就增加了发现其次生代谢产物的几率；
第三，种类多，数量大是内生真菌之所以广泛存在于植物体内的原因，所以需要我们去研究和拓展内生真菌，并且为以后研究其次生代谢产物可以提供相应的素材。
1.1.4 内生真菌的分布规律
关于女贞内生菌的分布规律已经有很多人在探究，无论是女贞叶还是女贞的其他组织器官都可以分离出内生菌。这已经得到了验证，在以往对女贞不同组织的研究中发现，不同植物组织中内生真菌的含量也不相同，因此，在不同植物中内生菌占据着不同的生态位。
1.1.5 国内外对内生真菌的研究现状及其生物活性物质
内生真菌分布广泛，大多数植物中都含有内生真菌。我国地大物博、自然资源丰富，因此从一些药用植物中分离内生真菌是一条很好的途径。在对天然植物资源的利用要追溯到古代，我国古时治病大多采用的都是植物药，因此植物入药早已屡见不鲜，对植物药用的研究也是有一定优势的。在植物资源的探索过程中我国拥有绝对的优势，可以作为参考的资料以及书籍有很多。在此研究中还发现很多植物中都存在内生真菌，因此内生菌普遍存在于植物体内。内生真菌作为新药研究的一项重要内容具有重大意义，因此在药用植物中寻找天然活性物质一直是医学界研究的重点。近几年来，由于抗生素滥用所引起的疾病增多，使大
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