穿山龙中薯蓣皂苷提取及抗氧化性能研究
摘 要本篇论文以穿山龙根茎为实验材料，分析乙醇回流提取法对穿山龙薯蓣皂苷得率的效果，先做单因素试验，再做正交试验，使最终提取的穿山龙薯蓣皂苷的量达到最大化，就可得到最好的提取工艺，即提取时间60 min、溶剂用量1 g10 mL、醇溶浓度60%的条件各提取两次，进行实验，穿山龙薯蓣皂苷得率在0.0088~0.044 mg/mL之间线性良好，并对正交试验的结果进行了验证；抗氧化实验中，以维生素C为对照组，以穿山龙薯蓣皂苷对DPPH自由基和羟基自由基（·OH）的清除效果为指标，发现其具有明显的清除能力，只是没有维生素C清除的多。
目 录
1 绪论 1
1.1 论文选题的意义 1
1.2 国内外的研究成果 1
1.2.1 穿山龙的性状 1
1.2.2 穿山龙的药用价值 1
1.3 提取工艺研究进展 3
1.3.1 溶剂提取法 3
1.3.2 水蒸气蒸馏法 3
1.3.3 超临界流体萃取法 3
1.3.4 微波萃取法 3
1.4 主要研究方法 4
2 实验步骤 5
2.1 药品和仪器 5
2.2 穿山龙薯蓣皂苷的含量测定 5
2.2.1 提取工艺流程 5
2.2.2 制备标品 6
2.2.3 波长的测定 6
2.2.4 标曲的绘制 6
2.2.5 供试品溶液的制备及含量的测定 6
2.3薯蓣皂苷的单因素试验 7
2.3.1 提取时间的影响 7
2.3.2 溶剂用量的影响 7
2.3.3 醇溶浓度的影响 7
2.3.4 提取次数的影响 7
2.4 正交试验 7
2.5 验证试验 8
2.6 抗氧化实验 8
2.6.1 DPPH清除率的测定 8
2.6.2 OH清除率的测定 9
3 结果与讨论 11
3.1 标曲的绘制 11
3.2 单因素试验的影响 11
3.2.1 提取时间的影响 11
3. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.2 溶剂用量的影响 11
3.2.3 醇溶浓度的影响 12
3.2.4 提取次数的影响 12
3.3 正交试验 13
3.4 验证试验 14
3.5 薯蓣皂苷抗氧化能力 15
3.5.1 薯蓣皂苷对DPPH的清除效果 15
3.5.2 薯蓣皂苷对OH的清除效果 15
4 结论 17
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
1.1 论文选题的意义
穿山龙是穿龙薯蓣的根茎，它可促进血液循环，消除疟疾和防止水肿。多数研究显示，穿山龙具有多种药理作用，如对于心血管功能、免疫调节、咳嗽和哮喘的治疗，而它对脂肪瘤，高脂血症，痛风性关节炎，心绞痛和慢性支气管炎有更好的治疗效果。最近几年，随着穿山龙药理研究的深入，发现其在抗病毒、抗肿瘤、抗艾滋、减肥等领域也发挥着作用。薯蓣皂苷中所含的过氧化分解酶，具有明显的抗衰老作用，充分说明，其具有一定的抗氧化作用。
查文献得，穿山龙中的有效成分主要是甾体皂苷类，因为甾体激素类的独特临床效果，它的发现为获得资源丰富的甾体原料药开辟了新的途径，所以人们开始重视穿山龙资源的开发，以提高其产率[1]。
1.2 国内外的研究成果
1.2.1 穿山龙的性状
穿山龙，又名穿龙薯蓣。线状的小根分布在根部，长15 cm左右，根直径1.5 cm左右。根表面为土黄色且有细小须根分布，质地坚硬难折[2]。断面颜色偏白，有略微粉末，气味弱，味苦涩。穿山龙主要以饮片的形式被人们食用，其饮片为1.5 cm左右的薄片，断面偏白，有星点状的浅棕色维管分布其间，气味与原药材相同。
1.2.2 穿山龙的药用价值
穿山龙是穿龙薯蓣经过干燥处理后的根茎，它的主要功效是除湿祛风、通络舒筋、平喘止血[3]，除了这些以外，穿山龙总皂苷类还有调节人体免疫功能和改善心血管功能的效果，并且还有抗肿瘤、止痛、抵抗炎症等多种功效。其所含有的薯蓣皂苷含有上百种药物成分，是避孕药和类固醇激素的主要合成原料[4]。
（1） 抗癌、抗肿瘤及免疫调节作用
张紫薇[5]等通过对薯蓣皂苷的抗癌机制研究进展研究，表明薯蓣皂苷具有良好的抗癌活性，可通过参与线粒体途径和死亡受体途径，对活性氧、B淋巴细胞瘤2基因家族、细胞周期的调控，对信号通路、相关酶类的调节及细胞分化诱导等方面诱导细胞凋亡，从而起到抗癌作用。研究发现，肿瘤与炎症之间存在密切的关系，而且，癌症治疗也可引起相关炎症。有研究者通过对薯蓣皂苷抗炎症分子机制的研究中发现薯蓣皂苷可通过阻断NFkB信号通路抑制炎症反应，这就表明了薯蓣皂苷可以通过对炎症反应的抑制从一定程度上预防肿瘤的形成并且抑制其发展。
（2） 抗艾滋病作用
王晓鹏[6]通过对薯蓣皂苷生物活性研究进展的研究，发现OS可以改善由于HIV感染所导致的智力损伤。OS可发生在HIV感染患者的脑组织和脑脊液中，且其可以被脑脊液里的毒性代谢产物诱导，而减轻OS可通过阻截脑脊液中毒性代谢物质的产生来实现。这就说明HIV病毒可以使有毒物质进入脑脊液中诱发脑炎，而薯蓣皂苷恰好作为一种阻断剂将其通道阻断了。从另一种意义上来讲，刚好可以抵抗艾滋病。
（3） 抗痛风性关节炎的作用
林芳芳[7]等人以痛风性关节炎大鼠的尿液为实验目标，向里面加入不同剂量的穿山龙总皂苷，发现其尿液中尿酸的量变多了，这就说明穿山龙总皂苷它在治疗痛风性关节炎时主要是以促进尿酸的排泄实现的。该项实验还发现，在痛风性关节炎大鼠中，大鼠尿液肌酐的量都比较低，在穿山龙总皂苷给药后，其含量显著上升。说明穿山龙总皂苷可能通过修复肾脏损伤、改善肾脏功能、促进体内肌酐的排泄达到治疗痛风性关节炎的目的。另有研究表明，在痛风性关节炎患者体内，尿酸晶体沉积在肾小管、肾间质和肾髓质处，阻滞了物质在肾脏中正常排泄的通道，致使肾小管萎缩和血管变性，造成肾损伤。
目 录
1 绪论 1
1.1 论文选题的意义 1
1.2 国内外的研究成果 1
1.2.1 穿山龙的性状 1
1.2.2 穿山龙的药用价值 1
1.3 提取工艺研究进展 3
1.3.1 溶剂提取法 3
1.3.2 水蒸气蒸馏法 3
1.3.3 超临界流体萃取法 3
1.3.4 微波萃取法 3
1.4 主要研究方法 4
2 实验步骤 5
2.1 药品和仪器 5
2.2 穿山龙薯蓣皂苷的含量测定 5
2.2.1 提取工艺流程 5
2.2.2 制备标品 6
2.2.3 波长的测定 6
2.2.4 标曲的绘制 6
2.2.5 供试品溶液的制备及含量的测定 6
2.3薯蓣皂苷的单因素试验 7
2.3.1 提取时间的影响 7
2.3.2 溶剂用量的影响 7
2.3.3 醇溶浓度的影响 7
2.3.4 提取次数的影响 7
2.4 正交试验 7
2.5 验证试验 8
2.6 抗氧化实验 8
2.6.1 DPPH清除率的测定 8
2.6.2 OH清除率的测定 9
3 结果与讨论 11
3.1 标曲的绘制 11
3.2 单因素试验的影响 11
3.2.1 提取时间的影响 11
3. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.2 溶剂用量的影响 11
3.2.3 醇溶浓度的影响 12
3.2.4 提取次数的影响 12
3.3 正交试验 13
3.4 验证试验 14
3.5 薯蓣皂苷抗氧化能力 15
3.5.1 薯蓣皂苷对DPPH的清除效果 15
3.5.2 薯蓣皂苷对OH的清除效果 15
4 结论 17
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
1.1 论文选题的意义
穿山龙是穿龙薯蓣的根茎，它可促进血液循环，消除疟疾和防止水肿。多数研究显示，穿山龙具有多种药理作用，如对于心血管功能、免疫调节、咳嗽和哮喘的治疗，而它对脂肪瘤，高脂血症，痛风性关节炎，心绞痛和慢性支气管炎有更好的治疗效果。最近几年，随着穿山龙药理研究的深入，发现其在抗病毒、抗肿瘤、抗艾滋、减肥等领域也发挥着作用。薯蓣皂苷中所含的过氧化分解酶，具有明显的抗衰老作用，充分说明，其具有一定的抗氧化作用。
查文献得，穿山龙中的有效成分主要是甾体皂苷类，因为甾体激素类的独特临床效果，它的发现为获得资源丰富的甾体原料药开辟了新的途径，所以人们开始重视穿山龙资源的开发，以提高其产率[1]。
1.2 国内外的研究成果
1.2.1 穿山龙的性状
穿山龙，又名穿龙薯蓣。线状的小根分布在根部，长15 cm左右，根直径1.5 cm左右。根表面为土黄色且有细小须根分布，质地坚硬难折[2]。断面颜色偏白，有略微粉末，气味弱，味苦涩。穿山龙主要以饮片的形式被人们食用，其饮片为1.5 cm左右的薄片，断面偏白，有星点状的浅棕色维管分布其间，气味与原药材相同。
1.2.2 穿山龙的药用价值
穿山龙是穿龙薯蓣经过干燥处理后的根茎，它的主要功效是除湿祛风、通络舒筋、平喘止血[3]，除了这些以外，穿山龙总皂苷类还有调节人体免疫功能和改善心血管功能的效果，并且还有抗肿瘤、止痛、抵抗炎症等多种功效。其所含有的薯蓣皂苷含有上百种药物成分，是避孕药和类固醇激素的主要合成原料[4]。
（1） 抗癌、抗肿瘤及免疫调节作用
张紫薇[5]等通过对薯蓣皂苷的抗癌机制研究进展研究，表明薯蓣皂苷具有良好的抗癌活性，可通过参与线粒体途径和死亡受体途径，对活性氧、B淋巴细胞瘤2基因家族、细胞周期的调控，对信号通路、相关酶类的调节及细胞分化诱导等方面诱导细胞凋亡，从而起到抗癌作用。研究发现，肿瘤与炎症之间存在密切的关系，而且，癌症治疗也可引起相关炎症。有研究者通过对薯蓣皂苷抗炎症分子机制的研究中发现薯蓣皂苷可通过阻断NFkB信号通路抑制炎症反应，这就表明了薯蓣皂苷可以通过对炎症反应的抑制从一定程度上预防肿瘤的形成并且抑制其发展。
（2） 抗艾滋病作用
王晓鹏[6]通过对薯蓣皂苷生物活性研究进展的研究，发现OS可以改善由于HIV感染所导致的智力损伤。OS可发生在HIV感染患者的脑组织和脑脊液中，且其可以被脑脊液里的毒性代谢产物诱导，而减轻OS可通过阻截脑脊液中毒性代谢物质的产生来实现。这就说明HIV病毒可以使有毒物质进入脑脊液中诱发脑炎，而薯蓣皂苷恰好作为一种阻断剂将其通道阻断了。从另一种意义上来讲，刚好可以抵抗艾滋病。
（3） 抗痛风性关节炎的作用
林芳芳[7]等人以痛风性关节炎大鼠的尿液为实验目标，向里面加入不同剂量的穿山龙总皂苷，发现其尿液中尿酸的量变多了，这就说明穿山龙总皂苷它在治疗痛风性关节炎时主要是以促进尿酸的排泄实现的。该项实验还发现，在痛风性关节炎大鼠中，大鼠尿液肌酐的量都比较低，在穿山龙总皂苷给药后，其含量显著上升。说明穿山龙总皂苷可能通过修复肾脏损伤、改善肾脏功能、促进体内肌酐的排泄达到治疗痛风性关节炎的目的。另有研究表明，在痛风性关节炎患者体内，尿酸晶体沉积在肾小管、肾间质和肾髓质处，阻滞了物质在肾脏中正常排泄的通道，致使肾小管萎缩和血管变性，造成肾损伤。
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