连翘中连翘苷的提取方法研究
摘 要研究不同提取方法对连翘中连翘苷提取率的影响，从而优选出最佳的提取方法，并设计出实际生产中最佳的提取工艺。通过百度文库、中国知网、万方数据库、学校图书馆等查阅关于连翘的国内外文献资料，并对连翘中连翘苷的不同提取方法进行比较，优选出最佳提取方法并设计出最佳工艺。本实验以连翘苷含量为指标，采用中国药典收载的HPLC法进行分析测定，比较不同提取方法的连翘苷提取率，优选出最佳提取方法，然后利用正交试验对最佳提取方法进行考察因素，分别考察不同粉碎度、加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素对连翘苷提取率的影响。不同提取方法中连翘苷的提取率测定结果表明，水煎煮法和渗漉法提取率相近，均可以得到较高的提取率，而水煮-醇沉法的提取率最低。考虑实际应用的可行性，操作简单，适应性广泛，因此实际生产中应选择水煮煎法作为连翘苷的最佳提取方法。采用正交试验对影响水煎煮法的不同影响因素进行考察，结果表明，连翘用水煎煮法并采用正交试验设计的最佳工艺为A1B3C2D3，即连翘粉末过50目筛，加水量为30倍，每次煎煮60min，共煎煮3次。因此用水煎煮法提取率高，稳定性好，操作易行，无污染，适合实际应用的生产，为实际生产提供了依据。目 录
1 绪论
1.1 选题意义 1
1.2 国内外的研究发展状况 1
1.2.1 国外的研究现状 1
1.2.2 国内的研究现状 2
2 连翘的概述
2.1 连翘的植物学研究 3
2.1.1 连翘的简介 3
2.1.2 连翘的形态特征 3
2.1.3 连翘分布环境的特点 3
2.2 连翘化学成分的研究 4
2.2.1 苯乙醇苷类 4
2.2.2 木脂素及其苷类 4
2.2.3 黄酮类 5
2.2.4 挥发性成分 5
2.2.5 三萜类 5
2.3 连翘药理活性的研究 5
2.3.1 抗菌作用? 5
2.3.2 抗病毒、抗炎作用 5
2.3.3 解热、抗内毒素作用? 6
2.3.4 抑制弹性蛋白酶活力的作用 6
2.3.5 镇痛、镇吐作用? 6
2.3.6
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
5
2.2.4 挥发性成分 5
2.2.5 三萜类 5
2.3 连翘药理活性的研究 5
2.3.1 抗菌作用? 5
2.3.2 抗病毒、抗炎作用 5
2.3.3 解热、抗内毒素作用? 6
2.3.4 抑制弹性蛋白酶活力的作用 6
2.3.5 镇痛、镇吐作用? 6
2.3.6 对心血管的作用? 7
2.3.7 其他作用? 7
2.4 连翘前景展望的研究 7
3 实验内容
3.1 实验仪器与试剂 9
3.1.1 实验仪器 9
3.1.2 药物与试剂 9
3.2 实验方法的选择 9
3.2.1 水煎煮法 9
3.2.2 水煮醇沉提取法 9
3.2.3 渗漉法 9
3.2.4 色谱条件 9
3.2.5 对照品溶液的制备 9
3.2.6 供试品溶液的制备 10
3.2.7 标准曲线的绘制 10
3.2.8 比较三种方法的提取率 10
3.3 最佳提取方法的工艺研究 11
3.3.1 连翘的预处理 11
3.3.2 连翘苷含量的测定 11
3.4 讨论 13
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 绪论
1.1 选题意义
连翘不仅是我国传统常用的中药材，也是现代中成药和植物药的重要原料之一，还是预防和治疗非典、禽流感、甲型H1N1流感等流行性疾病的主要成分之一，也是水土保持和生态造林的优良树种。连翘具有清热解毒、抗菌、抗炎、抗病毒、强心利尿、抑制弹性蛋白酶活性、降血压、肝功能、抗糖尿病、抗流感病毒等作用[1]。最近几年来的研究发现连翘中的生物活性含有多种成分，主要含有连翘苷、连翘酯苷等有效成分的含量显著高于果实，连翘苷是双环氧木脂素苷类化合物，是连翘药材的主要有效成分之一。有关研究显示，连翘苷具备较好的抗菌、降血脂及减肥效用。连翘苷的制备工艺也有一些报道，如醋酸铅法，氧化镁法和乙醇提取法等多种方法，但这些方法成本高，对生态环境污染大，尚未设计出更好的连翘苷的提取法。据此，本文探究建立了一种从连翘中提取连翘苷的方法，生产成本低，对环境污染少，产品得率高，适合工业化生产连翘的资源开发提供依据。目前水煎煮法已广泛应用于连翘中连翘苷提取的研究，尤其水煎煮法应用最多，具有操作简单、快速、重复性好等优点。为开发利用其药用价值提供可靠而简易的方法和依据。
1.2 国内外的研究发展状况
1.2.1 国内的研究现状
连翘在我国资源丰富，随着越来越多的文献报道连翘对多种疾病具有医疗作用，当前对连翘的研究主要集中在药理作用、化学成分方面、开发利用前景、提取工艺等。明确连翘延缓衰老及抗肿瘤作用机理研究表明，连翘提取物能延长果蝇平均寿命，增强小鼠体内抗氧化能力，降低脂质过氧化水平，但其延缓衰老的活性成分及其作用机制还有待进一步钻研。当前临床上治疗抑郁症化学药物虽然说治疗效果显著,但随之其反作用也日趋凸显出。很多人都转向了植物提取物和中成药，为了更好地开发和利用连翘，近年来王娅丽等[2]对于连翘的主要药理作用、化学成分、提取工艺等范围的探究近况也进行了一些报道。
1.2.2 国外的研究现状
有关于对连翘中连翘苷的提取方法研究，国外许多研究人员已经把目光转移到连翘植物的提取物及中成药，其中应用较多的为连翘抗抑郁症最早始于德国发现连翘可以治疗情绪性疾病[3]。从此以后连翘在美国长期被用为治疗皮肤表面创伤和抗抑郁药物。其中最具说服力的是治疗轻度和中度抑郁症患者时含有金丝桃素类成分的连翘提取物，治疗效果明显优于安慰剂与标准抗抑郁药物，三环类相比疗效副作用小。探究连翘治疗偏头痛的活性成分及作用机理在生活中常被用于偏头痛等，治疗效果显著。但这方面尚未见文献报道寻找到连翘治疗偏头痛的活性成分，并对其作用机制进行进一步的研究，可有利于连翘资源的开发利用。
2 连翘的概述
2.1 连翘的植物学研究
2.1.2 连翘的简介
连翘为木犀科植物连翘[Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl]的干燥果实，连翘别名黄花条、连壳、青翘、落翘、黄奇丹、连苔、连翘壳等。主要分布于我国中西部地区的河南、河北、山西、陕西等省份，其中河南省卢氏县是主要的连翘种植基地，也是连翘的主要来源之一。连翘味苦、性微寒，经归肺、小肠，具有清热解毒、消肿散结、疏散风热、抗糖尿病、抗流感病毒之功效，主要用于治疗乳痈、丹毒、风热感冒、温病初起温热入营、高热烦渴、神昏发斑、热淋涩痛等病症的治疗。
2.1.2 连翘的形态特征
连翘属落叶灌木，枝细长展开呈拱形或下垂，小枝土黄色或灰褐色，略呈四棱形，节间中空，节部有斑，皮孔显著。
叶一般为单叶，三出复叶，对生，叶片宽卵形或椭圆状、卵形至椭圆形，长310厘米，宽1.55厘米，基部圆形、宽楔形至楔形，叶缘除基部外具锐锯齿或粗锯齿，上面深绿色，下面淡黄绿色，两面无毛，34月叶前凋谢。
花通常单生或数朵生于叶腋，开在叶子梗56毫米；花萼呈绿色，裂片长圆状、椭圆形，长67毫米，先端钝或锐尖，边沿具睫毛，与花冠管近等长；花冠黄色，裂片倒卵状长圆形或长圆形，雄蕊2，雄蕊长于雌蕊。
果实呈卵球形、卵状椭圆形，外表黄棕色有
1 绪论
1.1 选题意义 1
1.2 国内外的研究发展状况 1
1.2.1 国外的研究现状 1
1.2.2 国内的研究现状 2
2 连翘的概述
2.1 连翘的植物学研究 3
2.1.1 连翘的简介 3
2.1.2 连翘的形态特征 3
2.1.3 连翘分布环境的特点 3
2.2 连翘化学成分的研究 4
2.2.1 苯乙醇苷类 4
2.2.2 木脂素及其苷类 4
2.2.3 黄酮类 5
2.2.4 挥发性成分 5
2.2.5 三萜类 5
2.3 连翘药理活性的研究 5
2.3.1 抗菌作用? 5
2.3.2 抗病毒、抗炎作用 5
2.3.3 解热、抗内毒素作用? 6
2.3.4 抑制弹性蛋白酶活力的作用 6
2.3.5 镇痛、镇吐作用? 6
2.3.6
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
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2.2.4 挥发性成分 5
2.2.5 三萜类 5
2.3 连翘药理活性的研究 5
2.3.1 抗菌作用? 5
2.3.2 抗病毒、抗炎作用 5
2.3.3 解热、抗内毒素作用? 6
2.3.4 抑制弹性蛋白酶活力的作用 6
2.3.5 镇痛、镇吐作用? 6
2.3.6 对心血管的作用? 7
2.3.7 其他作用? 7
2.4 连翘前景展望的研究 7
3 实验内容
3.1 实验仪器与试剂 9
3.1.1 实验仪器 9
3.1.2 药物与试剂 9
3.2 实验方法的选择 9
3.2.1 水煎煮法 9
3.2.2 水煮醇沉提取法 9
3.2.3 渗漉法 9
3.2.4 色谱条件 9
3.2.5 对照品溶液的制备 9
3.2.6 供试品溶液的制备 10
3.2.7 标准曲线的绘制 10
3.2.8 比较三种方法的提取率 10
3.3 最佳提取方法的工艺研究 11
3.3.1 连翘的预处理 11
3.3.2 连翘苷含量的测定 11
3.4 讨论 13
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 绪论
1.1 选题意义
连翘不仅是我国传统常用的中药材，也是现代中成药和植物药的重要原料之一，还是预防和治疗非典、禽流感、甲型H1N1流感等流行性疾病的主要成分之一，也是水土保持和生态造林的优良树种。连翘具有清热解毒、抗菌、抗炎、抗病毒、强心利尿、抑制弹性蛋白酶活性、降血压、肝功能、抗糖尿病、抗流感病毒等作用[1]。最近几年来的研究发现连翘中的生物活性含有多种成分，主要含有连翘苷、连翘酯苷等有效成分的含量显著高于果实，连翘苷是双环氧木脂素苷类化合物，是连翘药材的主要有效成分之一。有关研究显示，连翘苷具备较好的抗菌、降血脂及减肥效用。连翘苷的制备工艺也有一些报道，如醋酸铅法，氧化镁法和乙醇提取法等多种方法，但这些方法成本高，对生态环境污染大，尚未设计出更好的连翘苷的提取法。据此，本文探究建立了一种从连翘中提取连翘苷的方法，生产成本低，对环境污染少，产品得率高，适合工业化生产连翘的资源开发提供依据。目前水煎煮法已广泛应用于连翘中连翘苷提取的研究，尤其水煎煮法应用最多，具有操作简单、快速、重复性好等优点。为开发利用其药用价值提供可靠而简易的方法和依据。
1.2 国内外的研究发展状况
1.2.1 国内的研究现状
连翘在我国资源丰富，随着越来越多的文献报道连翘对多种疾病具有医疗作用，当前对连翘的研究主要集中在药理作用、化学成分方面、开发利用前景、提取工艺等。明确连翘延缓衰老及抗肿瘤作用机理研究表明，连翘提取物能延长果蝇平均寿命，增强小鼠体内抗氧化能力，降低脂质过氧化水平，但其延缓衰老的活性成分及其作用机制还有待进一步钻研。当前临床上治疗抑郁症化学药物虽然说治疗效果显著,但随之其反作用也日趋凸显出。很多人都转向了植物提取物和中成药，为了更好地开发和利用连翘，近年来王娅丽等[2]对于连翘的主要药理作用、化学成分、提取工艺等范围的探究近况也进行了一些报道。
1.2.2 国外的研究现状
有关于对连翘中连翘苷的提取方法研究，国外许多研究人员已经把目光转移到连翘植物的提取物及中成药，其中应用较多的为连翘抗抑郁症最早始于德国发现连翘可以治疗情绪性疾病[3]。从此以后连翘在美国长期被用为治疗皮肤表面创伤和抗抑郁药物。其中最具说服力的是治疗轻度和中度抑郁症患者时含有金丝桃素类成分的连翘提取物，治疗效果明显优于安慰剂与标准抗抑郁药物，三环类相比疗效副作用小。探究连翘治疗偏头痛的活性成分及作用机理在生活中常被用于偏头痛等，治疗效果显著。但这方面尚未见文献报道寻找到连翘治疗偏头痛的活性成分，并对其作用机制进行进一步的研究，可有利于连翘资源的开发利用。
2 连翘的概述
2.1 连翘的植物学研究
2.1.2 连翘的简介
连翘为木犀科植物连翘[Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl]的干燥果实，连翘别名黄花条、连壳、青翘、落翘、黄奇丹、连苔、连翘壳等。主要分布于我国中西部地区的河南、河北、山西、陕西等省份，其中河南省卢氏县是主要的连翘种植基地，也是连翘的主要来源之一。连翘味苦、性微寒，经归肺、小肠，具有清热解毒、消肿散结、疏散风热、抗糖尿病、抗流感病毒之功效，主要用于治疗乳痈、丹毒、风热感冒、温病初起温热入营、高热烦渴、神昏发斑、热淋涩痛等病症的治疗。
2.1.2 连翘的形态特征
连翘属落叶灌木，枝细长展开呈拱形或下垂，小枝土黄色或灰褐色，略呈四棱形，节间中空，节部有斑，皮孔显著。
叶一般为单叶，三出复叶，对生，叶片宽卵形或椭圆状、卵形至椭圆形，长310厘米，宽1.55厘米，基部圆形、宽楔形至楔形，叶缘除基部外具锐锯齿或粗锯齿，上面深绿色，下面淡黄绿色，两面无毛，34月叶前凋谢。
花通常单生或数朵生于叶腋，开在叶子梗56毫米；花萼呈绿色，裂片长圆状、椭圆形，长67毫米，先端钝或锐尖，边沿具睫毛，与花冠管近等长；花冠黄色，裂片倒卵状长圆形或长圆形，雄蕊2，雄蕊长于雌蕊。
果实呈卵球形、卵状椭圆形，外表黄棕色有
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