绞股蓝总皂苷体内抗肿瘤作用的研究(附件)
摘 要绞股蓝系葫芦科植物,又名七叶胆，为葫芦科植物绞股蓝的全草。目前已从绞股蓝中分离鉴定出80余种皂苷，其中皂苷Ⅲ、Ⅳ、Ⅷ、Ⅻ分别为人参皂苷、Rb2、Rd、F2，另外皂苷还含有糖类、黄酮、甾醇、各种氨基酸和微量元素。其主要成份为绞股蓝皂苷，与人参皂苷一样，可使血小板聚集，防止动脉粥样硬化，提供细胞充足养份。绞股蓝皂苷有多方面的药理作用,能治疗皮质激索的副作用、抗溃疡、降血脂等。保证血流通畅，降低心脑血管发病率。 通过设计实验研究绞股蓝总皂苷对移植性小鼠S180肉瘤的作用，分别设定了高150mg/kg、中100mg/kg、低50mg/kg3个剂量组以及模型组、正常对照组和阳性对照组，根据剂量组与模型组实验结果和不同剂量组间的实验结果。 本课题旨在探究绞股蓝总皂苷是否对移植性小鼠S180肉瘤有抑瘤作用，作用程度与剂量多少是否有相关性来考察绞股蓝总皂苷对移植性小鼠S180肉瘤的抑瘤作用情况。研究结果为取物对移植性小鼠S180肉瘤的生长有较好的抑制作用，3个剂量组的瘤重均小于模型组，并且抑瘤效果随着剂量的增加而增强。 绞股蓝具有抑制肿瘤细胞增值和灭货用，并且还可以防止正常细胞癌化，增强机体免疫能力，促使细胞发挥自我治愈能力，随着对绞股蓝分离提纯技术的进一步发展，对其作用机理分析的不断进步，其必然会对人类健康有着很大的贡献。
Key words: Gynostemma pentaphyllum Makino; Gypenosides; Pharmacological action; Clinical study 目 录
1.引 言 1
1.1 绞股蓝的主要成分 1
1.2 绞股蓝的药理作用的研究发展 2
1.2.1 抗肿瘤作用 2
1.2.2 抗衰老及抗氧化作用 2
1.2.3 对中枢神经系统的作用 2
1.2.4 对心脑血管的作用 3
1.2.5 对免疫功能的影响 3
1.3 绞股蓝抗肿瘤作用的临床研究 4
1.4 研究的目的及意义 5
1.5研究的主要内容 5
2.绞股蓝总皂苷不同组分体内抗肿瘤作用的实验 7
2.1 实验材料 7
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
2.1.1 药品 7
2.1.3实验动物 7
2.2 实验方法 8
2.2.1绞股蓝标准提取物的制备 8
2.2.2 S180腹水瘤模型的制备 8
2.2.3 实验分组与给药 8
2.2.4 计算抑瘤率，免疫器官指数 9
2.2.5SOD和MDA含量的测定 9
2.2.6 检测S180实体瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子的含量 10
2.3 实验结果 10
2.3.1绞股蓝标准提取物对S180实体瘤的抑制作用 10
2.3.2 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠脏器指数的影响 13
2.3.3 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠 SOD、MDA的影响 13
2.3.4 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠免疫功能的影响 14
2.3.5 绞股蓝标准提取物对S180腹水瘤小鼠体重的影响结果分析 15
3.总结 17
参考文献 18
致谢 20
1.引 言
绞股蓝，又称：超人参、天堂草、公罗锅底、福音草、七叶胆、遍地生根、七叶参和五叶参等，绞股蓝属、葫芦科草质攀援植物；茎细弱，具分枝，具槽及纵棱，无毛或疏被短柔毛。在中国主要分布在甘肃康县、陕西平利、湖北，湖南、广西、云南等省，号称“南方人参”，因为生长在南方的绞股蓝药用含量比较高，所以民间称其为神奇的“不老长寿药草”。绞股蓝皂苷为葫芦科植物绞股蓝的干燥地上部分，乌足状复叶对生，花单性异株，花小，淡绿白色。全草可作药用，具有止咳祛痰，清热解毒的功效[1、2]。
绞股蓝的功效：
1.绞股蓝皂苷用于降血脂，降血压，安神养性提高免疫力和治便秘，增强体力，使疲劳，衰弱症状减轻或消除，改善脑力活动，延缓衰老，提高大脑机能[3]。
2.绞股蓝皂苷有镇静，抗紧张、催眠，治疗偏头疼，治白发，消除胸闷，消除激素类药物的毒副作用。
3.绞股蓝皂苷用于维护心脑血管的健康，抗动脉硬化抑制血栓的形成[4]。
在本文中主要是在探究绞股蓝总皂苷是否对移植性小鼠S180肉瘤有抑瘤作用，作用程度与剂量多少是否有相关性来考察绞股蓝总皂苷对移植性小鼠S180肉瘤的抑瘤作用情况[5、6]。为绞股蓝总皂苷药理活性的广泛开发提供了理论依据。
1.1 绞股蓝的主要成分
20世纪70年代以来,国内外学者采用现代分离技术和分析方法对绞股蓝主要成分进行了广泛深 入的研究。研究结果表明绞股蓝含有绞股蓝皂甙、氨基酸、蛋白质、脂肪、黄酮类、糖类、无机元素、纤维素和维生素。
在绞股蓝中现已检出18种氨基酸,总氨基酸含量为6.5824μg/g,其中8种为机体必需氨基酸。
绞股蓝中微量元素含量因产地而异,但各地生产的绞股蓝测定结果表明,不同产地的绞股蓝药材中均含有机体所需、抗肿瘤及抗病的锌、钼、铁、铜、铬、硒等微量元素、增强免疫机能[7]。
绞股蓝还含有多糖、黄酮、萜类、维生素、生物碱、有机酸、蛋白质等。黄酮为商陆素和芦丁,糖类为葡萄糖、果糖、低聚糖和半乳糖,维生素为维生素C和胡萝卜素[8]。
1.2 绞股蓝的药理活性
1.2.1 抗肿瘤作用
经药理试验证明，绞股蓝是一种高效抗癌药物，对肝癌、肺癌、乳腺癌等20多种癌症，均具有明显的抑制效果，其抑癌率可达20%—80%。绞股蓝能防止正常细胞癌化，绞股蓝主要作用于肿瘤细胞的DNA合成过程，对胃、直肠、子宫、食道、肝、胆、胰、肾、肺、皮肤癌及黑色素瘤等癌细胞的增殖有明显的抑制作用。抗癌药理实验证明，患癌症的小白鼠服用绞股蓝组与不服用绞股蓝组相比，癌瘤减轻44.8%，存活期延长53.3%,说明绞股蓝既有防止正常细胞癌变，又有促使癌细胞逐渐恢复正常的功效，健康人如果长期服用绞股蓝，也可减少患癌的危险[9]。
由于人体的微量元素硒的缺少，造成中老年人在得前列腺癌的几率增大，绞股蓝含有人体必需的18种氨基酸和丰富的铁、锶、锌、硒等多种微量元素。食用富含硒元素的绞股蓝，有助于预防男性晚年时患前列腺癌，体内含微量元素硒越多，患前列腺癌的危险性就越小[10]。
1.2.2 抗衰老及抗氧化作用
绞股蓝总皂苷15.6～500mg/L,可以降低大鼠微粒体丙二醛(MDA)的形成,对VitCNADPH或四氯化碳诱发的大鼠肝微粒体脂质过氧化和自发性的及Fe2+半胱氨酸均有抑制作用，2.5～160mg/L对线粒体膜流动性损伤及Fe2+半胱氨酸诱发的大鼠肝微粒体膜有保护作用。绞股蓝能使D半乳糖所致的亚急性衰老大鼠下丘脑匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性明显增高,同时丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)活性明显降低,而SOD的活性反应了机体清除氧自由基的能力,MDA反应体内自由基产生和老化程度,NO则加速细胞死亡从而使脑老化,证实绞股蓝能够延缓D半乳糖所致的大鼠衰老[11]。
1.2.3 对中枢神经系统的作用
有实验表明,模型组大鼠海马区存在大量神经细胞凋亡,而复方绞股蓝总苷胶囊高、低剂量组神经细胞凋亡与模型组比较明显减少,说明复方绞股蓝总苷胶囊均具有抑制神经细胞凋亡、保护神经细胞的作用[12]。绞股蓝浸膏450mg/kg灌胃,用小鼠热板法实验表明有镇痛作用，并且对小鼠的自发活动有抑制作用。绞股蓝95%醇提物、20%醇提物、水提物3g/kg皮下注射,连续4～5天,可改善樟柳碱引起的小鼠记忆获得障碍，单体Rb150mg/kg、 20%醇提物0.75g/kg,腹腔注射,连续3d,可部分对抗乙醇引起的小鼠记忆获得障碍，Tb125mg/kg腹腔注射1次,可拮抗戊巴比妥钠造成的小鼠记忆获得障碍，20%醇提物0.75,1.5 g/kg皮下注射,连续5～6天,或1次性给药,可对抗乙醇引起的记忆再现障碍和氯霉素、环己酰亚胺所致小鼠记忆巩固障碍,表明本产品有改善记忆的作用。
Key words: Gynostemma pentaphyllum Makino; Gypenosides; Pharmacological action; Clinical study 目 录
1.引 言 1
1.1 绞股蓝的主要成分 1
1.2 绞股蓝的药理作用的研究发展 2
1.2.1 抗肿瘤作用 2
1.2.2 抗衰老及抗氧化作用 2
1.2.3 对中枢神经系统的作用 2
1.2.4 对心脑血管的作用 3
1.2.5 对免疫功能的影响 3
1.3 绞股蓝抗肿瘤作用的临床研究 4
1.4 研究的目的及意义 5
1.5研究的主要内容 5
2.绞股蓝总皂苷不同组分体内抗肿瘤作用的实验 7
2.1 实验材料 7
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2.1.1 药品 7
2.1.3实验动物 7
2.2 实验方法 8
2.2.1绞股蓝标准提取物的制备 8
2.2.2 S180腹水瘤模型的制备 8
2.2.3 实验分组与给药 8
2.2.4 计算抑瘤率，免疫器官指数 9
2.2.5SOD和MDA含量的测定 9
2.2.6 检测S180实体瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子的含量 10
2.3 实验结果 10
2.3.1绞股蓝标准提取物对S180实体瘤的抑制作用 10
2.3.2 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠脏器指数的影响 13
2.3.3 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠 SOD、MDA的影响 13
2.3.4 绞股蓝标准提取物对S180实体瘤小鼠免疫功能的影响 14
2.3.5 绞股蓝标准提取物对S180腹水瘤小鼠体重的影响结果分析 15
3.总结 17
参考文献 18
致谢 20
1.引 言
绞股蓝，又称：超人参、天堂草、公罗锅底、福音草、七叶胆、遍地生根、七叶参和五叶参等，绞股蓝属、葫芦科草质攀援植物；茎细弱，具分枝，具槽及纵棱，无毛或疏被短柔毛。在中国主要分布在甘肃康县、陕西平利、湖北，湖南、广西、云南等省，号称“南方人参”，因为生长在南方的绞股蓝药用含量比较高，所以民间称其为神奇的“不老长寿药草”。绞股蓝皂苷为葫芦科植物绞股蓝的干燥地上部分，乌足状复叶对生，花单性异株，花小，淡绿白色。全草可作药用，具有止咳祛痰，清热解毒的功效[1、2]。
绞股蓝的功效：
1.绞股蓝皂苷用于降血脂，降血压，安神养性提高免疫力和治便秘，增强体力，使疲劳，衰弱症状减轻或消除，改善脑力活动，延缓衰老，提高大脑机能[3]。
2.绞股蓝皂苷有镇静，抗紧张、催眠，治疗偏头疼，治白发，消除胸闷，消除激素类药物的毒副作用。
3.绞股蓝皂苷用于维护心脑血管的健康，抗动脉硬化抑制血栓的形成[4]。
在本文中主要是在探究绞股蓝总皂苷是否对移植性小鼠S180肉瘤有抑瘤作用，作用程度与剂量多少是否有相关性来考察绞股蓝总皂苷对移植性小鼠S180肉瘤的抑瘤作用情况[5、6]。为绞股蓝总皂苷药理活性的广泛开发提供了理论依据。
1.1 绞股蓝的主要成分
20世纪70年代以来,国内外学者采用现代分离技术和分析方法对绞股蓝主要成分进行了广泛深 入的研究。研究结果表明绞股蓝含有绞股蓝皂甙、氨基酸、蛋白质、脂肪、黄酮类、糖类、无机元素、纤维素和维生素。
在绞股蓝中现已检出18种氨基酸,总氨基酸含量为6.5824μg/g,其中8种为机体必需氨基酸。
绞股蓝中微量元素含量因产地而异,但各地生产的绞股蓝测定结果表明,不同产地的绞股蓝药材中均含有机体所需、抗肿瘤及抗病的锌、钼、铁、铜、铬、硒等微量元素、增强免疫机能[7]。
绞股蓝还含有多糖、黄酮、萜类、维生素、生物碱、有机酸、蛋白质等。黄酮为商陆素和芦丁,糖类为葡萄糖、果糖、低聚糖和半乳糖,维生素为维生素C和胡萝卜素[8]。
1.2 绞股蓝的药理活性
1.2.1 抗肿瘤作用
经药理试验证明，绞股蓝是一种高效抗癌药物，对肝癌、肺癌、乳腺癌等20多种癌症，均具有明显的抑制效果，其抑癌率可达20%—80%。绞股蓝能防止正常细胞癌化，绞股蓝主要作用于肿瘤细胞的DNA合成过程，对胃、直肠、子宫、食道、肝、胆、胰、肾、肺、皮肤癌及黑色素瘤等癌细胞的增殖有明显的抑制作用。抗癌药理实验证明，患癌症的小白鼠服用绞股蓝组与不服用绞股蓝组相比，癌瘤减轻44.8%，存活期延长53.3%,说明绞股蓝既有防止正常细胞癌变，又有促使癌细胞逐渐恢复正常的功效，健康人如果长期服用绞股蓝，也可减少患癌的危险[9]。
由于人体的微量元素硒的缺少，造成中老年人在得前列腺癌的几率增大，绞股蓝含有人体必需的18种氨基酸和丰富的铁、锶、锌、硒等多种微量元素。食用富含硒元素的绞股蓝，有助于预防男性晚年时患前列腺癌，体内含微量元素硒越多，患前列腺癌的危险性就越小[10]。
1.2.2 抗衰老及抗氧化作用
绞股蓝总皂苷15.6～500mg/L,可以降低大鼠微粒体丙二醛(MDA)的形成,对VitCNADPH或四氯化碳诱发的大鼠肝微粒体脂质过氧化和自发性的及Fe2+半胱氨酸均有抑制作用，2.5～160mg/L对线粒体膜流动性损伤及Fe2+半胱氨酸诱发的大鼠肝微粒体膜有保护作用。绞股蓝能使D半乳糖所致的亚急性衰老大鼠下丘脑匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性明显增高,同时丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)活性明显降低,而SOD的活性反应了机体清除氧自由基的能力,MDA反应体内自由基产生和老化程度,NO则加速细胞死亡从而使脑老化,证实绞股蓝能够延缓D半乳糖所致的大鼠衰老[11]。
1.2.3 对中枢神经系统的作用
有实验表明,模型组大鼠海马区存在大量神经细胞凋亡,而复方绞股蓝总苷胶囊高、低剂量组神经细胞凋亡与模型组比较明显减少,说明复方绞股蓝总苷胶囊均具有抑制神经细胞凋亡、保护神经细胞的作用[12]。绞股蓝浸膏450mg/kg灌胃,用小鼠热板法实验表明有镇痛作用，并且对小鼠的自发活动有抑制作用。绞股蓝95%醇提物、20%醇提物、水提物3g/kg皮下注射,连续4～5天,可改善樟柳碱引起的小鼠记忆获得障碍，单体Rb150mg/kg、 20%醇提物0.75g/kg,腹腔注射,连续3d,可部分对抗乙醇引起的小鼠记忆获得障碍，Tb125mg/kg腹腔注射1次,可拮抗戊巴比妥钠造成的小鼠记忆获得障碍，20%醇提物0.75,1.5 g/kg皮下注射,连续5～6天,或1次性给药,可对抗乙醇引起的记忆再现障碍和氯霉素、环己酰亚胺所致小鼠记忆巩固障碍,表明本产品有改善记忆的作用。
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