丹参中迷迭香酸提取工艺研究(附件)
本人签名 日期 摘 要本论文利用单因素试验结合正交试验法优选丹参中迷迭香酸的最佳提取工艺。通过高效液相色谱法来分析单因素，研究料液比，提取时间以及提取温度对丹参中迷迭香酸的提取率的影响。通过高效液相色谱法测定确定提取温度为80 ℃，每次提取1.5小时、共提取三次、提取时间为4.5小时，料液比为112，在高效液相色谱法的分析下，找到了丹参中迷迭香酸的最佳提取工艺。该法不仅降低了试验时间，其高压，高效，灵敏度高，分析速度快的特点为丹参中迷迭香酸提取工艺的研究做了参考。
Key words: Danshen；Rosmarinic acid,；Extractin 目 录
1绪论 1
1.1研究背景和意义 1
1.2研究现状及前景展望 2
1.3化学成分和药理作用 4
1.3.1化学成分 4
1.3.2药理作用 4
1.3.2.1抑菌作用 4
1.3.2.2抗氧化作用 5
1.3.2.3抗炎及免疫抑制作用 5
1.3.2.4抗抑郁作用 5
1.3.2.5神经保护作用 6
1.3.2.6免疫调节作用 6
1.3.2.7抗肿瘤机制 6
2丹参中迷迭香酸提取工艺研究 7
2.1实验材料和试剂 7
2.1.1实验材料 7
2.1.2试剂和药材 7
2.2实验部分 7
2.2.1色谱条件与系统适用性实验 9
2.2.1.1对照品溶液的制备 9
2.2.1.2供试品溶液的制备 9
2.2.1.3测定方法 9
2.2.2标准曲线的绘制 9
2.2.3精密度实验 10
2.2.4稳定性试验 10
2.2.5重复性实验 11
2.2.6 加样回收率 11
2.2.7样品测定 12
2.3单因素考察 12
2.4正交试验 13
结论 16
参考文献 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
17
致谢 19
1绪论
1.1研究背景和意义
丹参(Salvia Miltiorhiza Bge)为唇形科植物，以根入药，性苦，微寒。具有活血祛瘀，养血安神之功用，临床上主要用于治疗月经不调，闭经，腹痛，积聚，胸痹，疮疡，痹症，心悸，失眠等。对冠心病，心血管病常服疗效较好。对慢性肝炎，早期肝硬化也有良好效果。丹参又有紫丹参，赤参，红丹参，血参根，血参，山参，山红萝卜，活血根，大红袍，奔马草，滇丹参，川丹参之称。丹参产地主要有山西，湖北，陕西，山东，河南，安徽，云南等地。本文所选的丹参为陕西商洛所产。
丹参，源于植物鼠尾草。鼠尾草属植物隶属于唇形科，全世界约有1000多种，占全科植物的20％，生长于温热带地区。鼠尾草是欧洲十分古老的药用植物，其学名为Salvia,源于拉丁文，意为“医治，拯救”，其意即是说鼠尾草可以解救世人免于疾病之苦。所以，在很早的时候人们就已经开始研究丹参，并将其作为活血化瘀，治疗妇科疾病的要药。根据现有文献，丹参首载于《神农本草经》，其次见于《吴普本草》《明医别录》等古本草专辑。《神农本草经》记载：丹参“主心腹邪气，肠鸣幽幽如走水，寒热积聚；破症除瘕，止烦荡，益气”可见，古人对丹参的活血作用就已经有了认识。在此基础上，后世诸家本草对丹参多有阐述。到明代李时珍《本草纲目》，对丹参的功效论述已涉及诸多方面，不仅用于“主心腹邪气”，补心定志，宁心安神， 且有“安生胎，落死胎；止血崩为丹参带下，调妇女经脉不匀”活血通心包络，益气养血等。在妇人闭经，产后恶露不下不外乎“淤”和“虚”，虚则补之，淤则活血化之。丹参作为君药，配小剂量的檀香、砂仁，即《时方歌括》里面的丹参饮。功效活血化瘀、行气止痛、主治血淤气滞之心胃诸痛，方中丹参重在活血，血行则淤祛，痛自然也就止住了。而丹参作为活血药，一味即可成方。如《妇人良方》中的“丹参散”。此后，经过长期的医疗实践，对丹参的应用又有了新的发现。《中华人民共和国药典》则归纳丹参的功用为：“祛瘀止痛，活血通经清心除烦”说明丹参具有多方面的功效。近年来通过研究发现：丹参不仅在治疗妇科疾病上有很大优势，在治疗心脑血管类疾病也有明显效果。随着20世纪70年代，“冠心Ⅱ号”实验的成功也活血化瘀的研究拉开了帷幕，之后关于丹参的临床药理研究也如雨后春笋般。丹参在心脑血管方面的临床发现：丹参具有对心肌细胞的保护作用，影响血液流动作用，抗血栓形成和防止左心室肥厚作用。临床上广泛应用于治疗冠心病，心绞痛，急性心肌梗死以及高血压脑出血等。丹参的各种制剂（丹参注射液、复方丹参注射液、复方丹参片、丹参舒心片、冠宁注射液、丹参素等）对心脑血管、冠心病都较为有效，其中尤以丹参注射液效果最为显著。其原理与丹参可增加冠心病患者的血流速度有关，“冠心病、心绞痛以及心肌梗死”中医称之为“胸痹心痛”，根本原因就是胸阳不振，心失所养，心血不畅导致淤，所以丹参可以用于治疗胸痹心痛之淤血症[1]。迷迭香酸是丹参的主要生物有效成分之一，1958年首次从迷迭香中分离提取而得名。迷迭香有着多方面的生物活性，国内外在食品，化妆品医药等方面已有着广阔的应用[2]。为了能够合理使用药材，在服用剂量不变的情况下增强联系，为丹参制剂提供理论依据，以及实现企业生产利润最大化。此次实验主要用水来提取丹参中的迷迭香酸，用高效液相色谱法进行含量测定，从而优选丹参中迷迭香酸的最佳提取工艺。
1.2研究现状及前景展望
迷迭香酸在植物中的分布比较广泛，主要存在于唇形科，紫草科，葫芦科，椴树科，伞形科等多种植物中。最早在1958年由Ellis等人首次提取分离得到迷迭香酸,并推测鉴定出其分子式。此后，在多种植物中得到。迷迭香酸可通过提取分离，化学合成，等方法获得，是丹参，紫苏，夏枯草等中草药的有效成分。具有抗氧化，抗炎，抗菌，抗病毒等多种生物活性[3]。此次实验是从丹参中提取迷迭香酸，而对于迷迭香酸，以往都是采用醇提的方式来获得迷迭香酸，那样不仅成本高，消费大，还浪费药材。所以，此次实验采用的是水提法，通过高效液相来检测丹参提取物中迷迭香酸的含量。从而为丹参制剂提供理论依据。随着研究者对迷迭香酸的化学性质及药理机制研究的不断深入，该药逐渐成为过内外食品，化妆品，医药以及化工生产行业的研究热点，对其作用机制的相关报道也层出不穷。就作用机理而言，目前已证实迷迭香酸具有一定的抗菌，抗氧化，抗肿瘤等作用[4]。具有良好的医用前景。对于食品而言，美国，欧盟等国家和地区都禁止用化工合成的抗氧化剂和食品添加剂，而迷迭香酸具有极强的抗氧化兼防腐的功效，并且能够耐受100℃以上的高温，是纯天然无毒的抗氧化剂和防腐剂，可以用来做食品添加剂。除此之外，迷迭香酸还有延缓衰老，减肥降脂的功效，以它优越的抗氧化性以及纯天然，无毒无毒副作用等优势，在崇尚绿色的今天赢得了人们的高度重视[5]。传统中医认为丹参性苦，微寒具有活血化瘀等功效，常用于妇女调经之用。而二十世纪九十年代一些欧洲国家已用丹参提取物开发出治疗静脉曲张，痔疮，湿疹，牛皮癣和皮肤感染的药物[6]。曹树稳等人对丹参提取物的抗乳腺癌活性进行了研究，发现丹参主要抗氧化组分迷迭香酸对乳腺癌细胞增殖具有较强的抑制活性且具有良好的选择性，是一个及有希望的乳腺癌增殖抑制剂[7]。国际上迷迭香酸已有多项化妆品专利，它早已被人们广泛应用于护肤品，洗发水，香水等之中。迷迭香酸具有收敛性，可紧实肌肤。用于化妆品中可促进皮肤血液循环，强化血管收缩及扩张。还能清除人体自由基及抑制蛋白的降解，从而能够保持肌肤的弹性和光泽。因其具有修复强力保湿功能及易被吸收的优势，还可改善皮肤干燥，粗糙，脱皮等问题。此外，迷迭香酸能够抑制透明质酸酶的活性，保持透明质酸在表皮细胞中长时间存在，因此有助于阻止入侵的微生物及毒性物质在表皮内扩散。迷迭香酸的这种特性可起到抗感染，增强皮肤对外界阳光、温湿度等变化的刺激的抵抗力等作用[8]。故也可用于防晒霜隔离等产品。保护敏感，纤弱皮肤免受紫外线，电脑辐射等伤害。综上所述，迷迭香酸是化妆品中的优良添加剂，在化妆品中可起到去色斑，抗氧化，增加皮肤弹性，延缓衰老等作用。功效可与风靡一时的SOD（超氧化物崎化酶）相媲美，且克服了SOD等酶类物质化学性质不稳定的弱点。迷迭香酸具有的刺激功能，还可促进头皮血液循环，改善掉发现象，降低头皮屑的发生及刺激毛发生长，润泽发丝，因此也被用在洗发及护法用品之中[9]。
Key words: Danshen；Rosmarinic acid,；Extractin 目 录
1绪论 1
1.1研究背景和意义 1
1.2研究现状及前景展望 2
1.3化学成分和药理作用 4
1.3.1化学成分 4
1.3.2药理作用 4
1.3.2.1抑菌作用 4
1.3.2.2抗氧化作用 5
1.3.2.3抗炎及免疫抑制作用 5
1.3.2.4抗抑郁作用 5
1.3.2.5神经保护作用 6
1.3.2.6免疫调节作用 6
1.3.2.7抗肿瘤机制 6
2丹参中迷迭香酸提取工艺研究 7
2.1实验材料和试剂 7
2.1.1实验材料 7
2.1.2试剂和药材 7
2.2实验部分 7
2.2.1色谱条件与系统适用性实验 9
2.2.1.1对照品溶液的制备 9
2.2.1.2供试品溶液的制备 9
2.2.1.3测定方法 9
2.2.2标准曲线的绘制 9
2.2.3精密度实验 10
2.2.4稳定性试验 10
2.2.5重复性实验 11
2.2.6 加样回收率 11
2.2.7样品测定 12
2.3单因素考察 12
2.4正交试验 13
结论 16
参考文献 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
17
致谢 19
1绪论
1.1研究背景和意义
丹参(Salvia Miltiorhiza Bge)为唇形科植物，以根入药，性苦，微寒。具有活血祛瘀，养血安神之功用，临床上主要用于治疗月经不调，闭经，腹痛，积聚，胸痹，疮疡，痹症，心悸，失眠等。对冠心病，心血管病常服疗效较好。对慢性肝炎，早期肝硬化也有良好效果。丹参又有紫丹参，赤参，红丹参，血参根，血参，山参，山红萝卜，活血根，大红袍，奔马草，滇丹参，川丹参之称。丹参产地主要有山西，湖北，陕西，山东，河南，安徽，云南等地。本文所选的丹参为陕西商洛所产。
丹参，源于植物鼠尾草。鼠尾草属植物隶属于唇形科，全世界约有1000多种，占全科植物的20％，生长于温热带地区。鼠尾草是欧洲十分古老的药用植物，其学名为Salvia,源于拉丁文，意为“医治，拯救”，其意即是说鼠尾草可以解救世人免于疾病之苦。所以，在很早的时候人们就已经开始研究丹参，并将其作为活血化瘀，治疗妇科疾病的要药。根据现有文献，丹参首载于《神农本草经》，其次见于《吴普本草》《明医别录》等古本草专辑。《神农本草经》记载：丹参“主心腹邪气，肠鸣幽幽如走水，寒热积聚；破症除瘕，止烦荡，益气”可见，古人对丹参的活血作用就已经有了认识。在此基础上，后世诸家本草对丹参多有阐述。到明代李时珍《本草纲目》，对丹参的功效论述已涉及诸多方面，不仅用于“主心腹邪气”，补心定志，宁心安神， 且有“安生胎，落死胎；止血崩为丹参带下，调妇女经脉不匀”活血通心包络，益气养血等。在妇人闭经，产后恶露不下不外乎“淤”和“虚”，虚则补之，淤则活血化之。丹参作为君药，配小剂量的檀香、砂仁，即《时方歌括》里面的丹参饮。功效活血化瘀、行气止痛、主治血淤气滞之心胃诸痛，方中丹参重在活血，血行则淤祛，痛自然也就止住了。而丹参作为活血药，一味即可成方。如《妇人良方》中的“丹参散”。此后，经过长期的医疗实践，对丹参的应用又有了新的发现。《中华人民共和国药典》则归纳丹参的功用为：“祛瘀止痛，活血通经清心除烦”说明丹参具有多方面的功效。近年来通过研究发现：丹参不仅在治疗妇科疾病上有很大优势，在治疗心脑血管类疾病也有明显效果。随着20世纪70年代，“冠心Ⅱ号”实验的成功也活血化瘀的研究拉开了帷幕，之后关于丹参的临床药理研究也如雨后春笋般。丹参在心脑血管方面的临床发现：丹参具有对心肌细胞的保护作用，影响血液流动作用，抗血栓形成和防止左心室肥厚作用。临床上广泛应用于治疗冠心病，心绞痛，急性心肌梗死以及高血压脑出血等。丹参的各种制剂（丹参注射液、复方丹参注射液、复方丹参片、丹参舒心片、冠宁注射液、丹参素等）对心脑血管、冠心病都较为有效，其中尤以丹参注射液效果最为显著。其原理与丹参可增加冠心病患者的血流速度有关，“冠心病、心绞痛以及心肌梗死”中医称之为“胸痹心痛”，根本原因就是胸阳不振，心失所养，心血不畅导致淤，所以丹参可以用于治疗胸痹心痛之淤血症[1]。迷迭香酸是丹参的主要生物有效成分之一，1958年首次从迷迭香中分离提取而得名。迷迭香有着多方面的生物活性，国内外在食品，化妆品医药等方面已有着广阔的应用[2]。为了能够合理使用药材，在服用剂量不变的情况下增强联系，为丹参制剂提供理论依据，以及实现企业生产利润最大化。此次实验主要用水来提取丹参中的迷迭香酸，用高效液相色谱法进行含量测定，从而优选丹参中迷迭香酸的最佳提取工艺。
1.2研究现状及前景展望
迷迭香酸在植物中的分布比较广泛，主要存在于唇形科，紫草科，葫芦科，椴树科，伞形科等多种植物中。最早在1958年由Ellis等人首次提取分离得到迷迭香酸,并推测鉴定出其分子式。此后，在多种植物中得到。迷迭香酸可通过提取分离，化学合成，等方法获得，是丹参，紫苏，夏枯草等中草药的有效成分。具有抗氧化，抗炎，抗菌，抗病毒等多种生物活性[3]。此次实验是从丹参中提取迷迭香酸，而对于迷迭香酸，以往都是采用醇提的方式来获得迷迭香酸，那样不仅成本高，消费大，还浪费药材。所以，此次实验采用的是水提法，通过高效液相来检测丹参提取物中迷迭香酸的含量。从而为丹参制剂提供理论依据。随着研究者对迷迭香酸的化学性质及药理机制研究的不断深入，该药逐渐成为过内外食品，化妆品，医药以及化工生产行业的研究热点，对其作用机制的相关报道也层出不穷。就作用机理而言，目前已证实迷迭香酸具有一定的抗菌，抗氧化，抗肿瘤等作用[4]。具有良好的医用前景。对于食品而言，美国，欧盟等国家和地区都禁止用化工合成的抗氧化剂和食品添加剂，而迷迭香酸具有极强的抗氧化兼防腐的功效，并且能够耐受100℃以上的高温，是纯天然无毒的抗氧化剂和防腐剂，可以用来做食品添加剂。除此之外，迷迭香酸还有延缓衰老，减肥降脂的功效，以它优越的抗氧化性以及纯天然，无毒无毒副作用等优势，在崇尚绿色的今天赢得了人们的高度重视[5]。传统中医认为丹参性苦，微寒具有活血化瘀等功效，常用于妇女调经之用。而二十世纪九十年代一些欧洲国家已用丹参提取物开发出治疗静脉曲张，痔疮，湿疹，牛皮癣和皮肤感染的药物[6]。曹树稳等人对丹参提取物的抗乳腺癌活性进行了研究，发现丹参主要抗氧化组分迷迭香酸对乳腺癌细胞增殖具有较强的抑制活性且具有良好的选择性，是一个及有希望的乳腺癌增殖抑制剂[7]。国际上迷迭香酸已有多项化妆品专利，它早已被人们广泛应用于护肤品，洗发水，香水等之中。迷迭香酸具有收敛性，可紧实肌肤。用于化妆品中可促进皮肤血液循环，强化血管收缩及扩张。还能清除人体自由基及抑制蛋白的降解，从而能够保持肌肤的弹性和光泽。因其具有修复强力保湿功能及易被吸收的优势，还可改善皮肤干燥，粗糙，脱皮等问题。此外，迷迭香酸能够抑制透明质酸酶的活性，保持透明质酸在表皮细胞中长时间存在，因此有助于阻止入侵的微生物及毒性物质在表皮内扩散。迷迭香酸的这种特性可起到抗感染，增强皮肤对外界阳光、温湿度等变化的刺激的抵抗力等作用[8]。故也可用于防晒霜隔离等产品。保护敏感，纤弱皮肤免受紫外线，电脑辐射等伤害。综上所述，迷迭香酸是化妆品中的优良添加剂，在化妆品中可起到去色斑，抗氧化，增加皮肤弹性，延缓衰老等作用。功效可与风靡一时的SOD（超氧化物崎化酶）相媲美，且克服了SOD等酶类物质化学性质不稳定的弱点。迷迭香酸具有的刺激功能，还可促进头皮血液循环，改善掉发现象，降低头皮屑的发生及刺激毛发生长，润泽发丝，因此也被用在洗发及护法用品之中[9]。
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