石榴籽中原花青素提取工艺优化(附件)
摘 要石榴籽所含的主要活性成分为原花青素。原花青素属于多酚类成分，具有调节血液微循环、修复过敏症状、缓解视疲劳、补水保湿、去除有害胆固醇、改善静脉曲张、增强大脑记忆功能、改善缺氧等作用。然而利用传统工艺从石榴籽中提取原花青素，存在着提取杂质多、提取时间长、提取产物毒性大等缺点，不利于人体吸收。本实验主要弥补传统工艺不足，以超声波提取法来提取石榴籽中原花青素。选择提取的温度、时间、酸的种类、酸的浓度这四个因素，在确定这四个单因素范围的情况下结合正交试验，以紫外-可见分光光度法测定原花青素的含量，筛选出最佳提取工艺，为石榴籽的深度开发研究提供依据，为其工业应用提供一定的参考，从而发挥原花青素的最大功效。结果表明超声提取石榴籽中原花青素的最终优化工艺为提取时间40min、提取温度60℃、乙醇浓度70%、柠檬酸浓度5%，该工艺适合石榴籽中原花青素的提取，为实现原花青素工业生产提供理论依据。
目 录
1文献综述 1
1.1 石榴的概况 1
1.2 石榴籽的概况 1
1.2.1石榴籽利用现状 1
1.2.2 石榴籽中的化学成分 1
1.2.3 原花青素的研究现状 2
1.2.4 原花青素的化学结构 3
1.2.5 原花青素在植物中的分布 3
1.2.6 原花青素的药理作用 3
1.2.7 原花青素的应用 4
1.2.8 原花青素提取工艺概况 4
2实验部分 6
2.1试药及仪器 6
2.1.1 试药 6
2.1.2 仪器 6
2.2 实验方法 7
2.2.1显色剂的配制及原花青素含量的测定 7
2.2.2 标准曲线的建立 7
2.2.3石榴籽原花青素的提取与浓缩 7
2.2.4 单因素试验 7
2.2.5正交试验 8
2.3实验结果及分析 8
2.3.1原花青素标准曲线 8
2.3.2 精密度试验 9
2.3.3 稳定性试验 9
2.3.4 重复性试验 10
2.3.5单因素试验结 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
果 10
2.3.6正交实验结果 13
结论 15
参考文献 16
致谢 19
1 文献综述
1.1 石榴的概况
石榴(Punica granatum L)又名海榴、若榴等，为石榴科(Punicaceae)石榴属(Punica L)落叶灌木或小乔木。石榴皮酸、涩，性温；气微，味微苦。具有收敛止血等功效，可治疗痢疾、妇科崩漏、虫积腹痛等病症。
现代药理研究发现，石榴具有降低血糖、降低血脂、降低血压、抵抗病原微生物侵袭和抵抗病毒侵袭的作用[1]，石榴中含有多种活性成分，包括多酚类化合物、甾体类化合物、多糖、三萜类化合物、微量元素等[2]。
1.2 石榴籽的概况
1.2.1 石榴籽利用现状
石榴籽对人体益处颇多，在医药行业、化妆品及保健品方面应用广泛。在医药行业用于消化药，石榴籽可以改善人体肠胃功能，帮助人体正常消化；用于抑菌药，石榴籽可以有效对抗绿脓杆菌等外来病菌；用于心脑血管药，石榴籽可以保护血管，强化大脑功能，预防各种心脑血管疾病。在化妆品行业中用于皮肤护理品，石榴籽可以帮助肌肤形成保护屏障，防止水分流失并补充胶原蛋白；还可以抵抗胶原蛋白的降解从而预防皱纹的生成。在保健品行业，石榴籽富含丰富的维生素、抗氧化物质以及各种微量元素，可以有效延缓衰老；石榴籽同时有很强的视网膜修复作用，可以用于保护视力，修复视觉损伤。
1.2.2 石榴籽中的化学成分
(1) 多酚类成分
多酚类物质（GPS）广泛存在与植物中，是多羟基酚类化合物。为植物次生代谢产物，具治疗痢疾、抵抗癌细胞、治疗妇科崩漏、降低血糖、抵抗病原微生物侵袭和抵抗病毒侵袭等作用。因此在治疗皮肤、心脏、血管、糖尿病、妇科病等方面石榴籽皆可发挥其强大功能[3]。
(2) 甾体类成分
具有调节人体胆固醇代谢紊乱的作用。若人体摄入大量胆固醇而无法正常代谢时，甾体类化合物便会帮助肠道消化脂质并促进其吸收，防止胆固醇析出到血 液或残留于肝脏。因此甾体类化合物可以有效治疗血管硬化或胆结石等病症。
(3) 多糖类成分
具有抑制肿瘤的生长、调节免疫系统、降低血糖、抵抗衰老及降低血脂的作用，临床用于肿瘤的放射治疗及化学治疗。
(4) 三萜类成分
可以有效对抗血制品中的病毒，具有溶血作用；可以有效降低毛细血管通透性、抑制炎症、治疗发热，因此具有抗炎、镇痛、解热的作用；可以有效抑制病毒的活化作用，具有抗病毒、抗菌活性[4]。
1.2.3 原花青素的研究现状
植物界中存在着各种各样的化合物，其中GPS类物质广泛存在，它们大都对人体有益。研究发现，GPS类物质广泛存在于石榴籽中，而GPS中富含的原花青素类物质是对人体非常有益的成分。
石榴籽中有较高含量的原花青素，对人体有益。“原花青素”并不是最强的抗氧化剂，例如最强的抗氧化剂—虾青素的抗氧化能力是原花青素的20倍，虽然虾青素的抗氧化及清除自由基的能力远远强于原花青素，但由于虾青素是脂溶性物质，只溶于有机相，因此,人体能够吸收的虾青素量极少。而原花青素的优势在于，原花青素是水溶性物质，进入人体后可以被人体充分吸收。
由于原花青素可以清除人体自由基而且效用较高，因此被广泛应用于抗氧化方面。人体内脂类成分易被氧化，而当人体吸收了原花青素后，会参与蛋白质的磷酸化，保护脂质不被过氧化。原花青素与金属离子的结合能力非常强，结合后不易分解，因此服用原花青素物质后，金属物质会与其结合而形成惰性物质，减少对人体的伤害；另外，有了原花青素的存在，维生素C在人体内会变得更加稳定不易分解，原花青素促进了细胞对维生素C的吸收。
1961年德国的Karl F等第一次研究了山碴，将其溶于乙醇后处理得到两中不同类型的原花青素[5]。1967年美国Joslyn M.A等深入研究了葡萄，经处理后得到新类型的四种原花青素[6]。1985年，法国科学家Masquelier[7]最早从松树中用沸水提取得到原花青素。1986，随着对原花青素的深入了解，我国开始关注于
研究原花青素，且与英国联合开发了落叶松树皮中的原花青素，发现其抗自由基氧化的能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍。原花青素具有保护心脏及改善血液循环，抵抗肌肤衰老、修复皮肤、抵抗癌细胞突变、抵抗紫外线照射等多种生理活性[8]，并且对人体没有任何伤害。近年来，人们开始注重保养，保健食品在市场越来越受到欢迎，而原花青素是非常受欢迎的保健品原材料。随着原花青素被人们熟知，它也越来越被人们重视，如今，很大一部分国内外学者都投入到对原花青素的开发研究当中去了。
目 录
1文献综述 1
1.1 石榴的概况 1
1.2 石榴籽的概况 1
1.2.1石榴籽利用现状 1
1.2.2 石榴籽中的化学成分 1
1.2.3 原花青素的研究现状 2
1.2.4 原花青素的化学结构 3
1.2.5 原花青素在植物中的分布 3
1.2.6 原花青素的药理作用 3
1.2.7 原花青素的应用 4
1.2.8 原花青素提取工艺概况 4
2实验部分 6
2.1试药及仪器 6
2.1.1 试药 6
2.1.2 仪器 6
2.2 实验方法 7
2.2.1显色剂的配制及原花青素含量的测定 7
2.2.2 标准曲线的建立 7
2.2.3石榴籽原花青素的提取与浓缩 7
2.2.4 单因素试验 7
2.2.5正交试验 8
2.3实验结果及分析 8
2.3.1原花青素标准曲线 8
2.3.2 精密度试验 9
2.3.3 稳定性试验 9
2.3.4 重复性试验 10
2.3.5单因素试验结 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
果 10
2.3.6正交实验结果 13
结论 15
参考文献 16
致谢 19
1 文献综述
1.1 石榴的概况
石榴(Punica granatum L)又名海榴、若榴等，为石榴科(Punicaceae)石榴属(Punica L)落叶灌木或小乔木。石榴皮酸、涩，性温；气微，味微苦。具有收敛止血等功效，可治疗痢疾、妇科崩漏、虫积腹痛等病症。
现代药理研究发现，石榴具有降低血糖、降低血脂、降低血压、抵抗病原微生物侵袭和抵抗病毒侵袭的作用[1]，石榴中含有多种活性成分，包括多酚类化合物、甾体类化合物、多糖、三萜类化合物、微量元素等[2]。
1.2 石榴籽的概况
1.2.1 石榴籽利用现状
石榴籽对人体益处颇多，在医药行业、化妆品及保健品方面应用广泛。在医药行业用于消化药，石榴籽可以改善人体肠胃功能，帮助人体正常消化；用于抑菌药，石榴籽可以有效对抗绿脓杆菌等外来病菌；用于心脑血管药，石榴籽可以保护血管，强化大脑功能，预防各种心脑血管疾病。在化妆品行业中用于皮肤护理品，石榴籽可以帮助肌肤形成保护屏障，防止水分流失并补充胶原蛋白；还可以抵抗胶原蛋白的降解从而预防皱纹的生成。在保健品行业，石榴籽富含丰富的维生素、抗氧化物质以及各种微量元素，可以有效延缓衰老；石榴籽同时有很强的视网膜修复作用，可以用于保护视力，修复视觉损伤。
1.2.2 石榴籽中的化学成分
(1) 多酚类成分
多酚类物质（GPS）广泛存在与植物中，是多羟基酚类化合物。为植物次生代谢产物，具治疗痢疾、抵抗癌细胞、治疗妇科崩漏、降低血糖、抵抗病原微生物侵袭和抵抗病毒侵袭等作用。因此在治疗皮肤、心脏、血管、糖尿病、妇科病等方面石榴籽皆可发挥其强大功能[3]。
(2) 甾体类成分
具有调节人体胆固醇代谢紊乱的作用。若人体摄入大量胆固醇而无法正常代谢时，甾体类化合物便会帮助肠道消化脂质并促进其吸收，防止胆固醇析出到血 液或残留于肝脏。因此甾体类化合物可以有效治疗血管硬化或胆结石等病症。
(3) 多糖类成分
具有抑制肿瘤的生长、调节免疫系统、降低血糖、抵抗衰老及降低血脂的作用，临床用于肿瘤的放射治疗及化学治疗。
(4) 三萜类成分
可以有效对抗血制品中的病毒，具有溶血作用；可以有效降低毛细血管通透性、抑制炎症、治疗发热，因此具有抗炎、镇痛、解热的作用；可以有效抑制病毒的活化作用，具有抗病毒、抗菌活性[4]。
1.2.3 原花青素的研究现状
植物界中存在着各种各样的化合物，其中GPS类物质广泛存在，它们大都对人体有益。研究发现，GPS类物质广泛存在于石榴籽中，而GPS中富含的原花青素类物质是对人体非常有益的成分。
石榴籽中有较高含量的原花青素，对人体有益。“原花青素”并不是最强的抗氧化剂，例如最强的抗氧化剂—虾青素的抗氧化能力是原花青素的20倍，虽然虾青素的抗氧化及清除自由基的能力远远强于原花青素，但由于虾青素是脂溶性物质，只溶于有机相，因此,人体能够吸收的虾青素量极少。而原花青素的优势在于，原花青素是水溶性物质，进入人体后可以被人体充分吸收。
由于原花青素可以清除人体自由基而且效用较高，因此被广泛应用于抗氧化方面。人体内脂类成分易被氧化，而当人体吸收了原花青素后，会参与蛋白质的磷酸化，保护脂质不被过氧化。原花青素与金属离子的结合能力非常强，结合后不易分解，因此服用原花青素物质后，金属物质会与其结合而形成惰性物质，减少对人体的伤害；另外，有了原花青素的存在，维生素C在人体内会变得更加稳定不易分解，原花青素促进了细胞对维生素C的吸收。
1961年德国的Karl F等第一次研究了山碴，将其溶于乙醇后处理得到两中不同类型的原花青素[5]。1967年美国Joslyn M.A等深入研究了葡萄，经处理后得到新类型的四种原花青素[6]。1985年，法国科学家Masquelier[7]最早从松树中用沸水提取得到原花青素。1986，随着对原花青素的深入了解，我国开始关注于
研究原花青素，且与英国联合开发了落叶松树皮中的原花青素，发现其抗自由基氧化的能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍。原花青素具有保护心脏及改善血液循环，抵抗肌肤衰老、修复皮肤、抵抗癌细胞突变、抵抗紫外线照射等多种生理活性[8]，并且对人体没有任何伤害。近年来，人们开始注重保养，保健食品在市场越来越受到欢迎，而原花青素是非常受欢迎的保健品原材料。随着原花青素被人们熟知，它也越来越被人们重视，如今，很大一部分国内外学者都投入到对原花青素的开发研究当中去了。
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