不同品系野生型果蝇的成蛹及耐饿比较
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是被人类研究得最彻底的生物之一。在20世纪生命科学发展的历史长河中,果蝇扮演了十分重要的角色,是十分活跃的模式生物。本文在相同饲养条件下,对不同品系野生型黑腹果蝇进行成蛹百分比和饥饿状态下寿命长短的比较实验。成蛹百分比平均值与差异程度结果显示,野生型黑腹果蝇OregonR比W1118的生长速度慢。在饥饿状态下根据生存百分比平均值与差异程度得出,OregonR雄果蝇的寿命短于W1118雄果蝇。这些研究表明影响黑腹果蝇生长速度与生存长短的原因是实验中的遗传背景因素,为后续遗传学鉴定实验提供良好的实验材料。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Keywords 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料、试剂与工具 2
1.1.1 材料 2
1.1.2 试剂 2
1.1.3 工具 2
1.2 果蝇的培养 2
1.2.1 苹果汁培养基的制备(500ml) 2
1.2.2 1L普通食物配方 2
1.2.3 麻醉 3
1.3 方法 3
1.3.1 果蝇性别的鉴定 3
1.3.2 实验步骤 3
2 结果与分析 3
2.1 不同品系野生型果蝇成蛹百分比 3
2.1.1 W1118果蝇的成蛹百分比 4
2.1.2 OregonR果蝇的成蛹百分比 6
2.2 W1118和OregonR雄性果蝇的饥饿处理 8
3 讨论 10
致谢 11
参考文献 11
不同品系野生型果蝇的成蛹及耐饿比较
引言
引言
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中最重要的模式生物。果蝇饲养简单、生活周期短、繁殖率高、染色体少、突变性状多。20世纪初,Morgan选择黑腹果蝇作为研究对象,通过简单的杂交及子代表型计数的方法,建立了遗传的染色体理论,尊定经典遗传学的基础并开创利用果蝇作为模式生物的先 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
河[1]。1972年,Morgan的学生Mullcr发现放射线可以导致遗传损伤和突变,从而可以进行人工诱变。20世纪30年代,Painter和Bridges发表了果蝇的多线染色体图,为基因组的物理图谱尊定基础。Lcwis, NusslcinVolhard与Wicsschaus由于在胚胎早期发育遗传机制的重大发现而获得了1995年的诺贝尔医学和生理学奖[2]。这些成就反映了模式生物果蝇在生命科学中的重要地位。
黑腹果蝇雌性体长2.5毫米,雄性较之还要小,雄性有深色后肢,可以此来与雌性作区别。黑腹果蝇的生活周期十分短暂,完成一个世代的交替平均只需要2周左右。黑腹果蝇由卵发育为成虫大体经过卵、幼虫、蛹和成虫4个阶段,1只雌雄果蝇一生能产下300400个卵,卵经1天即可孵化成幼虫。此实验由两部分内容构成,一是在普通食物饲养环境下比较不同品系野生型果蝇W1118和OregonR的生长速度,二是不同品系野生型雄果蝇W1118和OregonR在饥饿状态下寿命长短。通过实验,为以后进行的遗传学试验做好准备。
1 材料与方法
1.1材料、试剂与工具
果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫(图1)。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃饲养时,从卵至成蝇需10天左右。
1.1.1材料 卵、幼虫、成蝇。
卵:白色,椭圆形,长约 0.5 mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。
幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长45 mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。
蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。
成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化[3]。
1.1.2试剂
二氧化碳、酒精(10009257,国药集团化学试剂有限公司)、丙酸(81011918,国药集团化学试剂有限公司)、酵母粉(GB/T20886,安琪酵母股份有限公司)、琼脂(10000561,国药集团化学试剂有限公司)、玉米粉、白糖、红糖、苹果汁、尼泊金甲酯(K1727034, Aladdin)。
1.1.3工具
培养箱(PRX350A,宁波赛福实验仪器有限公司)、高压灭菌锅(GI54DS, ZEALWAY)、电饭煲(WYJ301,广东美的生活电器制造有限公司)、显微镜(SZ51/61,奥林巴斯)、烧杯、混匀仪(MTV1,杭州奥盛仪器有限公司)、移液器、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、棉球、毛笔、麻醉板(YHDAC02, YHKJ)。
1.2果蝇的培养
1.2.1 苹果汁培养基的制备(500 ml)
在烧杯中加入340 ml的水、琼脂9 g、白糖10 g、彻底混匀,加热沸腾使琼脂溶解,缓慢加入160 ml的苹果汁,混匀,待温度降至55度左右,加入15 ml,10%的尼泊金甲酯,混匀,加入培养皿,每个平板10 ml左右。
1.2.2 1 L普通食物配方:
电饭煲锅底加0.5 L水,加入8 g琼脂粉,加热煮沸,称量表1中的试剂分别融于水中,水的量为0.5 L(注意:并非溶解于锅底的0.5 L水中,需另取0.5 L水用于溶解,即食物用水总量为1 L),搅拌,待其彻底混匀后倒入煮沸的锅中。混匀,沸腾,35 min后加入丙酸4 ml,冷却后30 min后,加入抗生素(10% Nipagin)17.5 ml。分装,冷却后,塞上一次性棉花球,4度存放。
表 1试剂量(1 L食物配方)
红糖
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Keywords 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料、试剂与工具 2
1.1.1 材料 2
1.1.2 试剂 2
1.1.3 工具 2
1.2 果蝇的培养 2
1.2.1 苹果汁培养基的制备(500ml) 2
1.2.2 1L普通食物配方 2
1.2.3 麻醉 3
1.3 方法 3
1.3.1 果蝇性别的鉴定 3
1.3.2 实验步骤 3
2 结果与分析 3
2.1 不同品系野生型果蝇成蛹百分比 3
2.1.1 W1118果蝇的成蛹百分比 4
2.1.2 OregonR果蝇的成蛹百分比 6
2.2 W1118和OregonR雄性果蝇的饥饿处理 8
3 讨论 10
致谢 11
参考文献 11
不同品系野生型果蝇的成蛹及耐饿比较
引言
引言
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中最重要的模式生物。果蝇饲养简单、生活周期短、繁殖率高、染色体少、突变性状多。20世纪初,Morgan选择黑腹果蝇作为研究对象,通过简单的杂交及子代表型计数的方法,建立了遗传的染色体理论,尊定经典遗传学的基础并开创利用果蝇作为模式生物的先 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
河[1]。1972年,Morgan的学生Mullcr发现放射线可以导致遗传损伤和突变,从而可以进行人工诱变。20世纪30年代,Painter和Bridges发表了果蝇的多线染色体图,为基因组的物理图谱尊定基础。Lcwis, NusslcinVolhard与Wicsschaus由于在胚胎早期发育遗传机制的重大发现而获得了1995年的诺贝尔医学和生理学奖[2]。这些成就反映了模式生物果蝇在生命科学中的重要地位。
黑腹果蝇雌性体长2.5毫米,雄性较之还要小,雄性有深色后肢,可以此来与雌性作区别。黑腹果蝇的生活周期十分短暂,完成一个世代的交替平均只需要2周左右。黑腹果蝇由卵发育为成虫大体经过卵、幼虫、蛹和成虫4个阶段,1只雌雄果蝇一生能产下300400个卵,卵经1天即可孵化成幼虫。此实验由两部分内容构成,一是在普通食物饲养环境下比较不同品系野生型果蝇W1118和OregonR的生长速度,二是不同品系野生型雄果蝇W1118和OregonR在饥饿状态下寿命长短。通过实验,为以后进行的遗传学试验做好准备。
1 材料与方法
1.1材料、试剂与工具
果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫(图1)。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃饲养时,从卵至成蝇需10天左右。
1.1.1材料 卵、幼虫、成蝇。
卵:白色,椭圆形,长约 0.5 mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。
幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长45 mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。
蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。
成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化[3]。
1.1.2试剂
二氧化碳、酒精(10009257,国药集团化学试剂有限公司)、丙酸(81011918,国药集团化学试剂有限公司)、酵母粉(GB/T20886,安琪酵母股份有限公司)、琼脂(10000561,国药集团化学试剂有限公司)、玉米粉、白糖、红糖、苹果汁、尼泊金甲酯(K1727034, Aladdin)。
1.1.3工具
培养箱(PRX350A,宁波赛福实验仪器有限公司)、高压灭菌锅(GI54DS, ZEALWAY)、电饭煲(WYJ301,广东美的生活电器制造有限公司)、显微镜(SZ51/61,奥林巴斯)、烧杯、混匀仪(MTV1,杭州奥盛仪器有限公司)、移液器、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、棉球、毛笔、麻醉板(YHDAC02, YHKJ)。
1.2果蝇的培养
1.2.1 苹果汁培养基的制备(500 ml)
在烧杯中加入340 ml的水、琼脂9 g、白糖10 g、彻底混匀,加热沸腾使琼脂溶解,缓慢加入160 ml的苹果汁,混匀,待温度降至55度左右,加入15 ml,10%的尼泊金甲酯,混匀,加入培养皿,每个平板10 ml左右。
1.2.2 1 L普通食物配方:
电饭煲锅底加0.5 L水,加入8 g琼脂粉,加热煮沸,称量表1中的试剂分别融于水中,水的量为0.5 L(注意:并非溶解于锅底的0.5 L水中,需另取0.5 L水用于溶解,即食物用水总量为1 L),搅拌,待其彻底混匀后倒入煮沸的锅中。混匀,沸腾,35 min后加入丙酸4 ml,冷却后30 min后,加入抗生素(10% Nipagin)17.5 ml。分装,冷却后,塞上一次性棉花球,4度存放。
表 1试剂量(1 L食物配方)
红糖
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