dl蛋氨酸对iugr哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响
本试验旨在研究DL-蛋氨酸对宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation, IUGR）哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响。试验在新生仔猪中选择日龄相同的5头正常出生重（normal birth weight, NBW）仔猪和10头IUGR仔猪，分为3个处理组（n = 5/组）NBW-CON组（正常仔猪+基础人工乳），IUGR-CON组（IUGR仔猪+基础人工乳）和IUGR-MET组（IUGR仔猪+基础人工乳+0.12% DL-蛋氨酸），21日龄时屠宰取样。结果显示（1）与NBW-CON组相比，IUGR-CON组磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶和葡萄糖-6-磷酸酶活力明显升高（P < 0.05）；（2）与NBW-CON组相比，IUGR-CON组糖原合成酶明显降低（P < 0.05）；（3）与NBW-CON组相比，IUGR-CON组磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1和葡萄糖-6-磷酸酶mRNA表达明显升高（P < 0.05），且糖原合成酶mRNA表达显著降低（P < 0.05）；与IUGR-CON组相比，IUGR-MET组磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶和葡萄糖-6-磷酸酶有下降的趋势（0.05 ≤ P < 0.1），但显著降低了二者mRNA表达水平（P < 0.05）。试验结果表明，添加DL-蛋氨酸可在一定程度缓解IUGR引起的肝脏糖异生酶活水平升高，显著降低IUGR哺乳仔猪肝脏糖异生酶mRNA表达水平。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Keywords 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验设计 2
1.2 样品采集 2
1.3 测定指标及方法 2
1.3.1 肝脏糖代谢评估 2
1.3.2 mRNA表达量 3
1.4 数据统计与分析 3
2 结果与分析 4
2.2 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖原代谢的影响 4
2.3 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖酵解酶活力的影响 5
2.4 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏mRNA水平的影响 5
3 讨论 6
3.1 D *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
L蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖异生酶活力及mRNA水平的影响 6
3.2 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖原代谢的影响 7
4 小结 7
致谢 8
参考文献 9
DL蛋氨酸对IUGR哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响
（大学动物科技学院，江苏 南京 210095）
引言
引言
宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation, IUGR），是指妊娠期间由于母体、胎儿或胎盘因素异常引起的胎儿及其器官在子宫内的生长受阻[1]。临床症状表现为新生儿出生重低、器官不同程度缩小、免疫能力下降、代谢紊乱以及神经系统发育滞后等[1, 2]。定义IUGR的标准通常为：新生儿的出生体重低于同孕龄正常体重的10%，或低于同孕龄正常体重的2个标准差[3, 4]。在人类上IUGR的发生概率约为5%10%[5]，在猪上则高达15%20%[6]。研究表明，IUGR不仅会导致胎儿生长发育受阻、增加新生动物发病率和死亡率，其潜在的长期影响还可能增加个体出生后患二型糖尿病的风险[7]。二型糖尿病是一种慢性代谢疾病，其主要特征为餐后和空腹高血糖。肝脏糖代谢异常是二型糖尿病的主要病理因素，主要体现为糖异生增多和糖原储存能力下降，其中糖异生的作用尤为显著。同样地，肝脏糖异生增加也是IUGR动物二型糖尿病风险的主要原因[8]。磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和葡萄糖6磷酸酶是肝脏糖异生过程中的两个限速酶，在控制肝脏糖异生速度中发挥着重要作用。研究表明，IUGR引起了新生动物肝脏磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和葡萄糖6磷酸酶基因甲基化程度下降，从而增加了二者在肝脏中的表达，这可能是IUGR动物肝脏糖异生增多的原因[9, 10]。因此，通过对动物日粮补充甲基供体或许能改善IUGR动物肝脏糖异生代谢。
蛋氨酸（methionine, MET），又名甲硫氨酸，γ位碳原子上连有一个甲硫基，易溶于水、稀酸和稀碱，难溶于醇，不溶于醚。蛋氨酸在机体生命活动中发挥着重要的作用，除了参与机体蛋白质代谢和氧化还原反应，它也是动物机体最重要的甲基供体之一[11]。Tremolizzo等对小鼠进行皮下注射蛋氨酸，结果显示蛋氨酸处理增加了小鼠大脑reelin基因CpG岛甲基化并降低了该基因表达表达水平[12]。因此，日粮补充蛋氨酸或可以调节IUGR动物肝脏糖异生状态。猪与人类的机体结构和生理代谢极为相似，且已被证明是一种适合用于研究人类糖尿病的动物模型。此外，由于糖异生、糖酵解和糖原代谢三者密切相关。因此，本研究以IUGR哺乳仔猪为动物模型，研究DL蛋氨酸对IUGR哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响，为研究人类IUGR个体糖代谢紊乱的预防措施提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
根据初生体重作为标准，在体型相似、胎次接近、品种相同的母猪所产的新生仔猪中，选择日龄相同的5头正常出生重（normal birth weight, NBW）雌性新生仔猪和10头IUGR雌性新生仔猪。出生重低于群体平均出生重2个标准差为IUGR仔猪，NBW猪以在群体出生重0.5个标准差范围内为标准进行选择。出生后12小时内分别寄养于胎次相同、体重相似的3头母猪哺乳，母猪日粮满足NRC（2012）饲养标准。于7日龄对仔猪断奶，并将所有仔猪分别分成三个处理组（n=5），分别是NBWCON组、IUGRCON组和IUGRMET组。其中NBWCON组和IUGRCON组饲喂基础人工乳，IUGRMET组饲喂基础人工乳+0.12% DL蛋氨酸，于21日龄屠宰取样。
仔猪的免疫按照猪场常规的免疫措施进行，饲养管理严格执行卫生防疫制度。试验日粮的配制参照NRC（2012）猪的营养需要，具体试验日粮配方和营养水平见表1。
表1 基础人工乳配方和营养成分
Table 1 Basic artificial milk formula and nutrients
指标
含量
成分（g/kg）
乳清蛋白浓缩物（含34%粗蛋白）
300
乳脂粉（含11%粗蛋白）
350
全脂奶粉
200
α酪蛋白
50.0
葡萄糖
60.0
预混料1
40.0
营养水平（计算值）
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Keywords 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验设计 2
1.2 样品采集 2
1.3 测定指标及方法 2
1.3.1 肝脏糖代谢评估 2
1.3.2 mRNA表达量 3
1.4 数据统计与分析 3
2 结果与分析 4
2.2 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖原代谢的影响 4
2.3 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖酵解酶活力的影响 5
2.4 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏mRNA水平的影响 5
3 讨论 6
3.1 D *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
L蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖异生酶活力及mRNA水平的影响 6
3.2 DL蛋氨酸对21日龄IUGR哺乳仔猪肝脏糖原代谢的影响 7
4 小结 7
致谢 8
参考文献 9
DL蛋氨酸对IUGR哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响
（大学动物科技学院，江苏 南京 210095）
引言
引言
宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation, IUGR），是指妊娠期间由于母体、胎儿或胎盘因素异常引起的胎儿及其器官在子宫内的生长受阻[1]。临床症状表现为新生儿出生重低、器官不同程度缩小、免疫能力下降、代谢紊乱以及神经系统发育滞后等[1, 2]。定义IUGR的标准通常为：新生儿的出生体重低于同孕龄正常体重的10%，或低于同孕龄正常体重的2个标准差[3, 4]。在人类上IUGR的发生概率约为5%10%[5]，在猪上则高达15%20%[6]。研究表明，IUGR不仅会导致胎儿生长发育受阻、增加新生动物发病率和死亡率，其潜在的长期影响还可能增加个体出生后患二型糖尿病的风险[7]。二型糖尿病是一种慢性代谢疾病，其主要特征为餐后和空腹高血糖。肝脏糖代谢异常是二型糖尿病的主要病理因素，主要体现为糖异生增多和糖原储存能力下降，其中糖异生的作用尤为显著。同样地，肝脏糖异生增加也是IUGR动物二型糖尿病风险的主要原因[8]。磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和葡萄糖6磷酸酶是肝脏糖异生过程中的两个限速酶，在控制肝脏糖异生速度中发挥着重要作用。研究表明，IUGR引起了新生动物肝脏磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和葡萄糖6磷酸酶基因甲基化程度下降，从而增加了二者在肝脏中的表达，这可能是IUGR动物肝脏糖异生增多的原因[9, 10]。因此，通过对动物日粮补充甲基供体或许能改善IUGR动物肝脏糖异生代谢。
蛋氨酸（methionine, MET），又名甲硫氨酸，γ位碳原子上连有一个甲硫基，易溶于水、稀酸和稀碱，难溶于醇，不溶于醚。蛋氨酸在机体生命活动中发挥着重要的作用，除了参与机体蛋白质代谢和氧化还原反应，它也是动物机体最重要的甲基供体之一[11]。Tremolizzo等对小鼠进行皮下注射蛋氨酸，结果显示蛋氨酸处理增加了小鼠大脑reelin基因CpG岛甲基化并降低了该基因表达表达水平[12]。因此，日粮补充蛋氨酸或可以调节IUGR动物肝脏糖异生状态。猪与人类的机体结构和生理代谢极为相似，且已被证明是一种适合用于研究人类糖尿病的动物模型。此外，由于糖异生、糖酵解和糖原代谢三者密切相关。因此，本研究以IUGR哺乳仔猪为动物模型，研究DL蛋氨酸对IUGR哺乳仔猪肝脏糖代谢的影响，为研究人类IUGR个体糖代谢紊乱的预防措施提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
根据初生体重作为标准，在体型相似、胎次接近、品种相同的母猪所产的新生仔猪中，选择日龄相同的5头正常出生重（normal birth weight, NBW）雌性新生仔猪和10头IUGR雌性新生仔猪。出生重低于群体平均出生重2个标准差为IUGR仔猪，NBW猪以在群体出生重0.5个标准差范围内为标准进行选择。出生后12小时内分别寄养于胎次相同、体重相似的3头母猪哺乳，母猪日粮满足NRC（2012）饲养标准。于7日龄对仔猪断奶，并将所有仔猪分别分成三个处理组（n=5），分别是NBWCON组、IUGRCON组和IUGRMET组。其中NBWCON组和IUGRCON组饲喂基础人工乳，IUGRMET组饲喂基础人工乳+0.12% DL蛋氨酸，于21日龄屠宰取样。
仔猪的免疫按照猪场常规的免疫措施进行，饲养管理严格执行卫生防疫制度。试验日粮的配制参照NRC（2012）猪的营养需要，具体试验日粮配方和营养水平见表1。
表1 基础人工乳配方和营养成分
Table 1 Basic artificial milk formula and nutrients
指标
含量
成分（g/kg）
乳清蛋白浓缩物（含34%粗蛋白）
300
乳脂粉（含11%粗蛋白）
350
全脂奶粉
200
α酪蛋白
50.0
葡萄糖
60.0
预混料1
40.0
营养水平（计算值）
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