槲皮素对健康肉鸡P-糖蛋白mRNA表达的影响
槲皮素对健康肉鸡P-糖蛋白mRNA表达的影响[20200507192010]
摘要：P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）由Abcb1基因编码，是ABC转运家族中第一个被发现的与肿瘤细胞多药耐药相关的蛋白，近年来的研究结果显示P-gp不仅在肿瘤细胞中表达介导肿瘤细胞的耐药，在动物的正常屏障组织中也有表达，是介导临床药物间相互作用以及不同种属动物对药物口服生物利用度差异的重要原因，对机体内P-gp的研究已成为当今药理学家研究的热点。本文旨在研究饲料中常见黄酮类化合物槲皮素对健康鸡肝脏、肾脏及肠组织中Abcb1 mRNA表达，为临床合理用药提供参考。本实验选择25只4周龄健康肉鸡随机分成5组，分别为空白对照组、槲皮素处理组（处理1、3、5和10天）。在处理不同时间点采集每组鸡肝脏、肾脏、十二指肠、空肠和回肠组织，提取RNA后采用real time RT-PCR方法测定Abcb1在不同组织中的mRNA表达水平。结果显示槲皮素处理后可诱导肉鸡不同组织中Abcb1 mRNA的表达，表现出时间依赖性，但存在组织差异，其对肾脏Abcb1表达的影响最显著，其次为十二指肠、空肠和肝脏，对回肠Abcb1表达未呈现显著作用。该结果表明槲皮素对肉鸡肝脏、肾脏和肠组织中的P-gp在mRNA水平产生影响，推测会导致临床中P-gp底物药物间相互作用的产生，值得引起临床重视。
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关键字:槲皮素；P-糖蛋白；Abcb1mRNA；realtimeRT-PCR
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 4
1 材料与方法 5
1.1 实验材料 5
1.1.1 实验试剂 5
1.1.2 实验仪器 5
1.2 动物处理 5
1.3 样品采集 5
1.4 组织RNA的提取 6
1.4.1 RNA浓度和纯度的检测 6
1.4.2 RNA完整性鉴定 6
1.5 反转录（RT）合成cDNA 6
1.6 real time RT- PCR 7
1.7 统计学处理 7
2 结果 7
2.1 RNA完整性检测 7
2.2 real time RT-PCR动力扩增曲线、产物熔解曲线 7
2.3 槲皮素对肝脏中的Abcb1 mRNA表达的影响 8
2.4 槲皮素对肾脏中的Abcb1 mRNA表达的影响 9
2.5 槲皮素对肠组织中的Abcb1 mRNA表达的影响 9
2.5.1 槲皮素十二指肠组织中Abcb1 mRNA表达量的影响 9
2.5.2 槲皮素空肠中Abcb1 mRNA表达量的影响 10
2.5.3 槲皮素回肠中Abcb1 mRNA表达量的影响 10
3 讨论 11
致谢 11
参考文献： 12
槲皮素对健康肉鸡P-糖蛋白mRNA表达的影响
摘要：P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）由Abcb1基因编码，是ABC转运家族中第一个被发现的与肿瘤细胞多药耐药相关的蛋白，近年来的研究结果显示P-gp不仅在肿瘤细胞中表达介导肿瘤细胞的耐药，在动物的正常屏障组织中也有表达，是介导临床药物间相互作用以及不同种属动物对药物口服生物利用度差异的重要原因，对机体内P-gp的研究已成为当今药理学家研究的热点。本文旨在研究饲料中常见黄酮类化合物槲皮素对健康鸡肝脏、肾脏及肠组织中Abcb1 mRNA表达，为临床合理用药提供参考。本实验选择25只4周龄健康肉鸡随机分成5组，分别为空白对照组、槲皮素处理组（处理1、3、5和10天）。在处理不同时间点采集每组鸡肝脏、肾脏、十二指肠、空肠和回肠组织，提取RNA后采用real time RT-PCR方法测定Abcb1在不同组织中的mRNA表达水平。结果显示槲皮素处理后可诱导肉鸡不同组织中Abcb1 mRNA的表达，表现出时间依赖性，但存在组织差异，其对肾脏Abcb1表达的影响最显著，其次为十二指肠、空肠和肝脏，对回肠Abcb1表达未呈现显著作用。该结果表明槲皮素对肉鸡肝脏、肾脏和肠组织中的P-gp在mRNA水平产生影响，推测会导致临床中P-gp底物药物间相互作用的产生，值得引起临床重视。
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关键字:槲皮素；P-糖蛋白；Abcb1mRNA；realtimeRT-PCR
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摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 4
1 材料与方法 5
1.1 实验材料 5
1.1.1 实验试剂 5
1.1.2 实验仪器 5
1.2 动物处理 5
1.3 样品采集 5
1.4 组织RNA的提取 6
1.4.1 RNA浓度和纯度的检测 6
1.4.2 RNA完整性鉴定 6
1.5 反转录（RT）合成cDNA 6
1.6 real time RT- PCR 7
1.7 统计学处理 7
2 结果 7
2.1 RNA完整性检测 7
2.2 real time RT-PCR动力扩增曲线、产物熔解曲线 7
2.3 槲皮素对肝脏中的Abcb1 mRNA表达的影响 8
2.4 槲皮素对肾脏中的Abcb1 mRNA表达的影响 9
2.5 槲皮素对肠组织中的Abcb1 mRNA表达的影响 9
2.5.1 槲皮素十二指肠组织中Abcb1 mRNA表达量的影响 9
2.5.2 槲皮素空肠中Abcb1 mRNA表达量的影响 10
2.5.3 槲皮素回肠中Abcb1 mRNA表达量的影响 10
3 讨论 11
致谢 11
参考文献： 12
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