健康猪猪圆环病毒2型的分子流行病学调查

为了解不同日龄健康猪的猪圆环病毒2型分子流行病学情况,我们采集了2个规模化猪场不同日龄健康猪鼻拭子160份,采用柱式病毒DNAout试剂盒提取样品中病毒DNA,对其进行了PCV2 PCR检测,并通过扩增、克隆和测序获得10个PCV2 ORF2全长基因。结果显示,160份样品中,有81份样品检测为PCV2阳性,感染率为50.63% 。2个猪场PCV2感染率分别为73.75%和27.50%。试验表明,120日龄猪鼻拭子PCV2阳性率最高。对10个PCV2 ORF2全长基因进行的序列比对分析表明,9株属于PCV2d型,1株属于PCV2a型。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 病料来源 2
1.2 引物 2
1.3主要试剂2
1.4主要仪器3
1.5方法3
1.5.1病料的处理3
1.5.2病毒DNA提取3
1.5.3 PCV2检测3
(1) PCR扩增 3
(2) PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 4
1.5.4 PCV2 ORF2全长基因的扩增、克隆与序列分析4
(1) PCR扩增 4
(2) 胶回收 4
(3) 连接 4
(4) 转化 4
(5) 转化TA克隆鉴定 5
(6) 测序 5
(7)序列分析比较 5
2 结果与分析5
2.1鼻拭子PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳5
2.2与T载体连接结果7
2.3 T载体连接成功的阳性样品基因测序7
2.4同源性分析8
3讨论 9
3.1 PCV的形态与分类9
3.2 PCV在我国的流行性9
致谢9
参考文献10
图1 金坛某猪场Ⅰ1Ⅰ22号样 5
图2 金坛某猪场Ⅰ23Ⅰ44号样 5
图3 金坛某猪场Ⅰ45Ⅰ60号样 6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072* 

图4 金坛某猪场Ⅰ61Ⅰ80号样 6
图5 常州某猪场Ⅰ1Ⅰ22号样 6
图6 常州某猪场Ⅰ23Ⅰ44号样 6
图7 常州某猪场Ⅰ45Ⅰ60号样 7
图8 常州某猪场Ⅰ61Ⅰ80号样 7
图9 单菌PCR鉴定结果 7
图10 样品序列进化树 8
图11 样品序列同源性分析表 9
表1 金坛某猪场采集样品 3
表2 常州某猪场采集样品 3
表3 金坛某猪场阳性样品检出结果 6
表4 常州某猪场阳性样品检出结果 7
表5 测序样品编号 8
健康猪猪圆环病毒2型的分子流行病学调查

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