猪圆环病毒2型重组cap蛋白的表达及纯化
:将猪圆环病毒2型(PCV2)的核衣壳蛋白(Cap蛋白)基因克隆到pGEX-6p-1表达载体中,测序正确后,将重组表达质粒纯化转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导,重组的Cap蛋白得到表达,对该蛋白进行大量表达,然后利用镍柱进行纯化。通过SDS-PAGE Gel进行分析,该重组蛋白主要以可溶形式表达,分子量大小与预测的大小基本一致(48KD);进一步通过抗His标签的抗体验证,所表达的蛋白为重组的Cap蛋白。本研究为规模化生产猪圆环病毒2型Cap抗原和以重组Cap蛋白为抗原建立血清学诊断方法提供了基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料 2
1.1.1 主要试剂 2
1.1.1 主要仪器 2
1.2 试验方法2
1.2.1 重组菌种的活化2
1.2.2 IPTG诱导目的蛋白表达2
1.2.3 Cap蛋白的纯化2
1.2.4 纯化后蛋白的SDSPAGE分析3
1.2.5 Western Bloting分析 3
2 结果与分析4
2.1 IPTG诱导目的蛋白表达的结果4
2.2 纯化后蛋白的SDSPAGE分析4
2.3 纯化后蛋白的Western Bloting分析5
3 讨论6
3.1 PCV2的Cap蛋白6
3.2 组氨酸融合表达载体6
3.3 蛋白的表达形式6
3.4 WesternBlot技术6
4 小结6
致谢7
参考文献7
猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的表达及纯化
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Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料 2
1.1.1 主要试剂 2
1.1.1 主要仪器 2
1.2 试验方法2
1.2.1 重组菌种的活化2
1.2.2 IPTG诱导目的蛋白表达2
1.2.3 Cap蛋白的纯化2
1.2.4 纯化后蛋白的SDSPAGE分析3
1.2.5 Western Bloting分析 3
2 结果与分析4
2.1 IPTG诱导目的蛋白表达的结果4
2.2 纯化后蛋白的SDSPAGE分析4
2.3 纯化后蛋白的Western Bloting分析5
3 讨论6
3.1 PCV2的Cap蛋白6
3.2 组氨酸融合表达载体6
3.3 蛋白的表达形式6
3.4 WesternBlot技术6
4 小结6
致谢7
参考文献7
猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的表达及纯化
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