TLR4在LFP20调节猪巨噬细胞功能中的作用及初步机制研究
TLR4在LFP20调节猪巨噬细胞功能中的作用及初步机制研究[20200507191530]
摘要：猪乳铁蛋白经胃蛋白酶水解形成猪乳铁蛋白肽（lactoferricin - 20，LFP-20），LFP-20由20个氨基酸残基组成，其安全性好，抗菌谱广，且在体内具有免疫调控功能，但LFP-20发挥免疫调控作用的机制尚不清楚，有研究表明，抗菌肽与TLRs的激活及其介导的信号转导机制有关。有些抗菌肽选择性调控先天免疫反应能够控制炎症反应的程度，并且可以通过激活或抑制TLRs信号转导通路引发机体的特异性免疫反应。因此本研究以猪为研究对象，以在宿主抵御微生物感染机制中起着重要作用的病原体识别受体之一——TLR4为研究靶点，通过基因沉默的方法研究TLR4是否在LFP-20调节猪巨噬细胞功能中发挥作用及其可能途径，探讨LFP-20调控猪巨噬细胞功能的可能机制，为利用营养调控仔猪肠道免疫功能，增强抗病力提供理论依据。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:LFP-20；TLR4；猪巨噬细胞；干扰载体
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 主要试剂和材料2
1.1.2 仪器设备3
1.2 方法 3
1.2.1猪巨噬细胞体外培养模型的建立3
1.2.2 MTT检测不同浓度乳源抗菌肽LFP-20对巨噬细胞增殖率的影响3
1.2.3 建立LPS刺激的猪巨噬细胞模型，检测LFP-20对TLR4及其相关信号通路下游细胞因子异常表达的影响4
1.2.4 设计并构建猪TLR4的siRNA干扰载体（共设计3个干扰载体和1个空白载体）并进行干扰载体的筛选5
1.2.5研究TLR4在LFP-20调节猪巨噬细胞免疫功能中的作用8
2 结果与分析9
2.1 MTT检测不同浓度乳源抗菌肽LFP-20对巨噬细胞增殖率的影响9
2.2 LFP-20对LPS刺激猪巨噬细胞模型的免疫调控功能研究9
2.3 LFP-20对猪巨噬细胞免疫调控功能的初步机制研究12
2.3.1干扰载体转染条件及干扰效率的筛选12
2.3.2研究LFP-20是否依赖TLR4相关信号通路发挥免疫调控功能17
3 讨论 21
致谢22
参考文献22
TLR4在LFP-20调节猪巨噬细胞功能中的作用及初步机制研究
摘要：猪乳铁蛋白经胃蛋白酶水解形成猪乳铁蛋白肽（lactoferricin - 20，LFP-20），LFP-20由20个氨基酸残基组成，其安全性好，抗菌谱广，且在体内具有免疫调控功能，但LFP-20发挥免疫调控作用的机制尚不清楚，有研究表明，抗菌肽与TLRs的激活及其介导的信号转导机制有关。有些抗菌肽选择性调控先天免疫反应能够控制炎症反应的程度，并且可以通过激活或抑制TLRs信号转导通路引发机体的特异性免疫反应。因此本研究以猪为研究对象，以在宿主抵御微生物感染机制中起着重要作用的病原体识别受体之一——TLR4为研究靶点，通过基因沉默的方法研究TLR4是否在LFP-20调节猪巨噬细胞功能中发挥作用及其可能途径，探讨LFP-20调控猪巨噬细胞功能的可能机制，为利用营养调控仔猪肠道免疫功能，增强抗病力提供理论依据。
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关键字:LFP-20；TLR4；猪巨噬细胞；干扰载体
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摘要1
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Abstract1
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引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 主要试剂和材料2
1.1.2 仪器设备3
1.2 方法 3
1.2.1猪巨噬细胞体外培养模型的建立3
1.2.2 MTT检测不同浓度乳源抗菌肽LFP-20对巨噬细胞增殖率的影响3
1.2.3 建立LPS刺激的猪巨噬细胞模型，检测LFP-20对TLR4及其相关信号通路下游细胞因子异常表达的影响4
1.2.4 设计并构建猪TLR4的siRNA干扰载体（共设计3个干扰载体和1个空白载体）并进行干扰载体的筛选5
1.2.5研究TLR4在LFP-20调节猪巨噬细胞免疫功能中的作用8
2 结果与分析9
2.1 MTT检测不同浓度乳源抗菌肽LFP-20对巨噬细胞增殖率的影响9
2.2 LFP-20对LPS刺激猪巨噬细胞模型的免疫调控功能研究9
2.3 LFP-20对猪巨噬细胞免疫调控功能的初步机制研究12
2.3.1干扰载体转染条件及干扰效率的筛选12
2.3.2研究LFP-20是否依赖TLR4相关信号通路发挥免疫调控功能17
3 讨论 21
致谢22
参考文献22
TLR4在LFP-20调节猪巨噬细胞功能中的作用及初步机制研究
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