H5、H7和H9亚型禽流感病毒多重RTPCR检测方法的建立
H5、H7和H9亚型禽流感病毒多重RTPCR检测方法的建立[20200507190857]
摘要：根据GenBank中H5、H7和H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)编码基因，使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段，设计三对引物H5-P51与H5-P52、H7-F与H7-R以及H9-P1 与H9-P2。在此基础上，建立了H5、H7、H9亚型禽流感的多重RT-PCR检测方法，本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒。随后，进行了退火温度、Mg2+浓度、引物浓度等反应条件的优化。此外，特异性试验结果表明该方法检测其他相关病毒时均为阴性，具有很高的特异性。此诊断方法检出时间早，而且特异、敏感、经济、简单、快速，可普遍推广，在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
关键字:多重RT-PCR；禽流感病毒H5亚型；禽流感病毒H7亚型；禽流感病毒H9亚型；快速检测
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1病毒株 2
1.2主要试剂与仪器3
1.2.1主要试剂3
1.2.2主要仪器3
1.3引物设计与合成3
1.4病毒RNA的提取3
1.5病毒RNA的反转录反应3
1.6 PCR检测病毒核酸3
1.7血凝试验测定病毒血凝效价3
1.8多重PCR方法的建立与优化3
1.9多重RT-PCR的特异性检验4
2结果与分析4
2.1提取病毒RNA的检测4
2.2血凝试验测定病毒血凝效价4
2.3多重PCR反应体系优化结果4
2.3.1多重RT-PCR的Mg2+浓度的确定5
2.3.2多重RT-PCR反应退火温度的确定5
2.3.3多重RT-PCR反应模板量及引物浓度的确定6
2.4多重RT-PCR反应特异性结果8
3讨论 8
致谢9
参考文献9
H5、H7和H9亚型禽流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立
摘要：根据GenBank中H5、H7和H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)编码基因，使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段，设计三对引物H5-P51与H5-P52、H7-F与H7-R以及H9-P1 与H9-P2。在此基础上，建立了H5、H7、H9亚型禽流感的多重RT-PCR检测方法，本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒。随后，进行了退火温度、Mg2+浓度、引物浓度等反应条件的优化。此外，特异性试验结果表明该方法检测其他相关病毒时均为阴性，具有很高的特异性。此诊断方法检出时间早，而且特异、敏感、经济、简单、快速，可普遍推广，在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
关键字:多重RT-PCR；禽流感病毒H5亚型；禽流感病毒H7亚型；禽流感病毒H9亚型；快速检测
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1病毒株 2
1.2主要试剂与仪器3
1.2.1主要试剂3
1.2.2主要仪器3
1.3引物设计与合成3
1.4病毒RNA的提取3
1.5病毒RNA的反转录反应3
1.6 PCR检测病毒核酸3
1.7血凝试验测定病毒血凝效价3
1.8多重PCR方法的建立与优化3
1.9多重RT-PCR的特异性检验4
2结果与分析4
2.1提取病毒RNA的检测4
2.2血凝试验测定病毒血凝效价4
2.3多重PCR反应体系优化结果4
2.3.1多重RT-PCR的Mg2+浓度的确定5
2.3.2多重RT-PCR反应退火温度的确定5
2.3.3多重RT-PCR反应模板量及引物浓度的确定6
2.4多重RT-PCR反应特异性结果8
3讨论 8
致谢9
参考文献9
H5、H7和H9亚型禽流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/964.html
