黄芪不同器官的多糖含量测定研究
摘 要黄芪来源于豆科植物蒙古黄芪和膜荚黄芪的干燥根入药，是常用的补益中药之一，其性微温，味甘，具有补气固表、益气活血、升阳止汗、利水消肿、托毒排脓等功效。黄芪在临床上的需求量较大，但由于连年对野生黄芪的采挖和人工种植资源的有限，致使黄芪药材资源越发紧张。而黄芪的茎、叶等器官产量大，易采收，是很有潜力的黄芪药源。本实验以黄芪的重要成分多糖为检测指标，采用水提取法、紫外分光光度法对蒙古黄芪的根、茎、叶、花等器官的多糖含量进行测定分析，旨在寻找除了根之外也有一定药效的器官，实验结果得出蒙古黄芪根的含量最高，茎和叶次之，花的最少。为扩大黄芪药用资源提供参考。目 录
1 绪论
1.1 概述 1
1.2 研究目的意义 1
1.3 黄芪多糖的概述 2
1.3.1 黄芪多糖 2
1.3.2 黄芪多糖的药理作用 2
1.4 黄芪多糖的提取方法 5
1.4.1 醇除水提法 5
1.4.2 碱醇提取法 5
1.4.3 碱水提取法 5
1.4.4 酶提取法 6
1.4.5 超声波提取法 6
1.4.6 温水提取法 6
1.4.7 微波提取法 6
1.4.8 水提取法 7
1.4.9 传统水煎煮法 7
1.5 黄芪多糖的提取及分离纯化研究 7
1.5.1 分级沉淀法 7
1.5.2 盐析法 7
1.5.3 金属络合法 8
1.5.4 纤维素柱层析法 8
1.5.5 季胺盐沉淀法 8
2 实验部分
2.1 实验材料与仪器 9
2.1.1 仪器与试剂 9
2.1.2 药品 9
2.1.3 黄芪多糖的提取 9
2.2 黄芪多糖的含量测定 9
2.2.1 回归方程的建立 9
2.2.2 萄葡糖回归率试验 10
2.2.3 黄芪多糖的含量测定 ..11
3 结论与讨论 16
参考文献 ...18
致谢 .....20
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
br /> 2.1.2 药品 9
2.1.3 黄芪多糖的提取 9
2.2 黄芪多糖的含量测定 9
2.2.1 回归方程的建立 9
2.2.2 萄葡糖回归率试验 10
2.2.3 黄芪多糖的含量测定 ..11
3 结论与讨论 16
参考文献 ...18
致谢 .....20
1 绪论
1.1 概述
在我国华北、东北和西北等地区有很多黄芪。其性微温、味甘，具有补气同表、托疮生肌的功效，主要是治体虚多汗、久泻、慢性肾炎、体虚浮肿、慢性溃疡、疮口久不愈合等。黄芪提取物是黄色粉末状物质，主要含有黄芪多糖、黄酮、胆碱、甜菜碱、氨基酸、蔗糖、葡萄糖醛酸、微量的叶酸、微量元素（其中铁、锰、锌、硒含量较高）、叶酸、亚麻酸等多种成分[1]。黄芪多糖在中药黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，是黄芪发挥其免疫增强作用的主要成分。大量研究表明黄芪多糖（APS）能够诱导机体产生干扰素，并干扰病毒在机体内的复制，提高机体的免疫功能、抗氧化以及降血糖等多种药理功效[2]。黄芪多糖已经开始应用在兽医行业，本文用黄芪多糖的药理作用、分离提取和含量测定研究。但是，由于连年对野生黄芪的采挖，野生资源已无法满足人们的需要。目前，黄芪已被大面积人工种植，但大量茎、叶及花部分被遗弃，没有得到充分的利用。近年来，报道了多种提取黄芪多糖的方法，主要包括水提取法[3、4、5]、微波提取法[6]、超声波提取法[7]、超滤法[8] 、醇除水提法、碱醇提取法、碱水提取法、酶提取法、温水提取法、传统水煎煮法等，一般采用水提取法，因为该法工艺简单操作方便。用这种方法提取的黄芪多糖外观是白色的，说明黄酮以及其类似物没有被提取出来，此法既达到了提取多糖的目的，同时也实现了多糖与黄酮和其类似物的分离。黄芪多糖含量测定方法的研究比较少，为了保证临床应用制剂质量，研究其含量测定的方法也显得更为重要，目前报道的有李孝栋等[9]、杨莉等[10]和张洪波等[11]的研究。经反复试验，用紫外分光光度法来测定黄芪多糖的含量测定方法，方法验证的结果表明，本法的结果线性关系、重复性、回收率和稳定性的结果令人满意，故本实验采用紫外分光光度法来测定黄芪多糖。
1.2 研究目的意义
本实验拟以黄芪多糖为指标，测定黄芪根、茎、叶、花等不同器官中黄芪多糖的含量，比较各器官中黄芪多糖的含量大小。
研究目的是为黄芪药材寻找其他可药用的器官提供依据，对黄芪药材资源的开发利用有一定的参考意义。
1.3 黄芪多糖的概述
目前，研究发现了黄芪中含的多种有效成分分别是多糖、皂甙、黄酮、氨基酸等，这些活性成分都有促进抗体生成和免疫反应的作用，其中对黄芪多糖的研究报道为多。黄芪多糖是豆科植物，蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经过提取、浓缩、纯化从而形成的水溶性杂多糖。淡黄色，粉末细腻，均匀无杂质，具有引湿性。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有的作用有：抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化、增强免疫力、抗干扰素、促进机体代谢、保护肝脏、双向调节血压。
1.3.1 黄芪多糖
黄芪的多糖成分主要是葡萄糖的杂多糖。其中葡萄糖又有水溶性与水不溶性的葡萄糖。黄芪杂多糖是水溶性酸性杂多糖，水溶性酸主要是由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖，并含有少量的糖醛酸，而有些杂多糖仅是由葡萄糖和阿拉伯糖组成[12]。方圣鼎等[13]报道国产蒙古黄芪根的水提取液分离得到三种多糖成分。黄乔书[14]从蒙古黄芪的水提取液中分离得到两种葡萄糖（分别为AG1和AG2）及两种杂多糖（分别为AH1和AH2）。目前对黄芪多糖的种类、含量测定及其中间多糖含量的比较等工作已较深入。其中，黄芪多糖是中药黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，并且是黄芪发挥免疫增强作用的主要成分。大量研究表明黄芪多糖（APS）能在诱导机体中产生干扰素，干扰病毒在机体内复制，并且提高机体的免疫功能以及抗氧化、降血糖等多种药理功效。有动物试验表明，黄芪多糖还具有多种药理活性。
1.3.2 黄芪多糖的药理作用
1.3.2.1 增强免疫力和抗病毒作用
黄芪多糖对正常机体的抗体生成功能，具有明显的促进作用，可使抗体形成细胞数即溶血空斑数与溶血素测定值显著高于对照组，可使免疫后早期抗原结合细胞数明显升高，黄芪多糖有促进病毒诱生和自身诱生干扰素的能力，且黄芪多糖能使脾脏内浆细胞增生，促进抗体合成。
1.3.2.2 对干扰素的作用
黄芪多糖具有增强病毒诱生干扰素的能力。容易感冒的人把黄芪服用在感冒流行的季节，可使感冒症状较轻，次数减少。
1 绪论
1.1 概述 1
1.2 研究目的意义 1
1.3 黄芪多糖的概述 2
1.3.1 黄芪多糖 2
1.3.2 黄芪多糖的药理作用 2
1.4 黄芪多糖的提取方法 5
1.4.1 醇除水提法 5
1.4.2 碱醇提取法 5
1.4.3 碱水提取法 5
1.4.4 酶提取法 6
1.4.5 超声波提取法 6
1.4.6 温水提取法 6
1.4.7 微波提取法 6
1.4.8 水提取法 7
1.4.9 传统水煎煮法 7
1.5 黄芪多糖的提取及分离纯化研究 7
1.5.1 分级沉淀法 7
1.5.2 盐析法 7
1.5.3 金属络合法 8
1.5.4 纤维素柱层析法 8
1.5.5 季胺盐沉淀法 8
2 实验部分
2.1 实验材料与仪器 9
2.1.1 仪器与试剂 9
2.1.2 药品 9
2.1.3 黄芪多糖的提取 9
2.2 黄芪多糖的含量测定 9
2.2.1 回归方程的建立 9
2.2.2 萄葡糖回归率试验 10
2.2.3 黄芪多糖的含量测定 ..11
3 结论与讨论 16
参考文献 ...18
致谢 .....20
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
br /> 2.1.2 药品 9
2.1.3 黄芪多糖的提取 9
2.2 黄芪多糖的含量测定 9
2.2.1 回归方程的建立 9
2.2.2 萄葡糖回归率试验 10
2.2.3 黄芪多糖的含量测定 ..11
3 结论与讨论 16
参考文献 ...18
致谢 .....20
1 绪论
1.1 概述
在我国华北、东北和西北等地区有很多黄芪。其性微温、味甘，具有补气同表、托疮生肌的功效，主要是治体虚多汗、久泻、慢性肾炎、体虚浮肿、慢性溃疡、疮口久不愈合等。黄芪提取物是黄色粉末状物质，主要含有黄芪多糖、黄酮、胆碱、甜菜碱、氨基酸、蔗糖、葡萄糖醛酸、微量的叶酸、微量元素（其中铁、锰、锌、硒含量较高）、叶酸、亚麻酸等多种成分[1]。黄芪多糖在中药黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，是黄芪发挥其免疫增强作用的主要成分。大量研究表明黄芪多糖（APS）能够诱导机体产生干扰素，并干扰病毒在机体内的复制，提高机体的免疫功能、抗氧化以及降血糖等多种药理功效[2]。黄芪多糖已经开始应用在兽医行业，本文用黄芪多糖的药理作用、分离提取和含量测定研究。但是，由于连年对野生黄芪的采挖，野生资源已无法满足人们的需要。目前，黄芪已被大面积人工种植，但大量茎、叶及花部分被遗弃，没有得到充分的利用。近年来，报道了多种提取黄芪多糖的方法，主要包括水提取法[3、4、5]、微波提取法[6]、超声波提取法[7]、超滤法[8] 、醇除水提法、碱醇提取法、碱水提取法、酶提取法、温水提取法、传统水煎煮法等，一般采用水提取法，因为该法工艺简单操作方便。用这种方法提取的黄芪多糖外观是白色的，说明黄酮以及其类似物没有被提取出来，此法既达到了提取多糖的目的，同时也实现了多糖与黄酮和其类似物的分离。黄芪多糖含量测定方法的研究比较少，为了保证临床应用制剂质量，研究其含量测定的方法也显得更为重要，目前报道的有李孝栋等[9]、杨莉等[10]和张洪波等[11]的研究。经反复试验，用紫外分光光度法来测定黄芪多糖的含量测定方法，方法验证的结果表明，本法的结果线性关系、重复性、回收率和稳定性的结果令人满意，故本实验采用紫外分光光度法来测定黄芪多糖。
1.2 研究目的意义
本实验拟以黄芪多糖为指标，测定黄芪根、茎、叶、花等不同器官中黄芪多糖的含量，比较各器官中黄芪多糖的含量大小。
研究目的是为黄芪药材寻找其他可药用的器官提供依据，对黄芪药材资源的开发利用有一定的参考意义。
1.3 黄芪多糖的概述
目前，研究发现了黄芪中含的多种有效成分分别是多糖、皂甙、黄酮、氨基酸等，这些活性成分都有促进抗体生成和免疫反应的作用，其中对黄芪多糖的研究报道为多。黄芪多糖是豆科植物，蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经过提取、浓缩、纯化从而形成的水溶性杂多糖。淡黄色，粉末细腻，均匀无杂质，具有引湿性。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有的作用有：抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化、增强免疫力、抗干扰素、促进机体代谢、保护肝脏、双向调节血压。
1.3.1 黄芪多糖
黄芪的多糖成分主要是葡萄糖的杂多糖。其中葡萄糖又有水溶性与水不溶性的葡萄糖。黄芪杂多糖是水溶性酸性杂多糖，水溶性酸主要是由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖，并含有少量的糖醛酸，而有些杂多糖仅是由葡萄糖和阿拉伯糖组成[12]。方圣鼎等[13]报道国产蒙古黄芪根的水提取液分离得到三种多糖成分。黄乔书[14]从蒙古黄芪的水提取液中分离得到两种葡萄糖（分别为AG1和AG2）及两种杂多糖（分别为AH1和AH2）。目前对黄芪多糖的种类、含量测定及其中间多糖含量的比较等工作已较深入。其中，黄芪多糖是中药黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，并且是黄芪发挥免疫增强作用的主要成分。大量研究表明黄芪多糖（APS）能在诱导机体中产生干扰素，干扰病毒在机体内复制，并且提高机体的免疫功能以及抗氧化、降血糖等多种药理功效。有动物试验表明，黄芪多糖还具有多种药理活性。
1.3.2 黄芪多糖的药理作用
1.3.2.1 增强免疫力和抗病毒作用
黄芪多糖对正常机体的抗体生成功能，具有明显的促进作用，可使抗体形成细胞数即溶血空斑数与溶血素测定值显著高于对照组，可使免疫后早期抗原结合细胞数明显升高，黄芪多糖有促进病毒诱生和自身诱生干扰素的能力，且黄芪多糖能使脾脏内浆细胞增生，促进抗体合成。
1.3.2.2 对干扰素的作用
黄芪多糖具有增强病毒诱生干扰素的能力。容易感冒的人把黄芪服用在感冒流行的季节，可使感冒症状较轻，次数减少。
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