银杏叶中黄酮类化合物的提取与分离技术研究(附件)
摘 要黄酮类化合物是银杏叶中的主要药效成分，具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂的功效。主要用于瘀血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症等症状的治疗。因此，如何实现高效的提取和分离银杏叶中黄酮类化合物对其广泛应用具有重要意义。本论文主要选用溶剂提取法对银杏叶黄酮类化合物进行了提取，并系统考察了乙醇浓度、提取温度、提取时间、提取次数、液料比、粉碎粒度以及干燥温度对银杏叶黄酮化合物的提取率的影响，获得了各种因素对银杏叶黄酮类化合物提取率的影响大小顺序。此外，选用大孔吸附树脂AB8为吸附质，40%的乙醇为洗脱剂，对其纯化分离工艺进行了优化，为银杏叶的开发及利用提供重要理论依据。Key words: Ginkgo biloba; Flavonoids; Extraction and separation 目 录
1 绪论
1.1 银杏叶概述 1
1.2 银杏叶的化学成分 1
1.2.1 黄酮类化合物 1
1.2.2 萜类内酯 1
1.2.3 酚酸类 2
1.2.4 其他成分 2
1.3 黄酮类化合物的药理作用 2
1.3.1 降糖、降脂、降压作用 2
1.3.2 降血糖作用 2
1.3.3 降血脂作用 3
1.3.4 降血压作用 3
1.3.5 调节心、脑血管系统 3
1.3.6 抗氧化作用 4
1.4 银杏叶中黄酮类化合物的提取方法 4
1.4.1 溶剂提取法 4
1.4.2 水提取树脂分离法 5
1.4.3 有机溶剂浸提法 5
1.4.4 超临界流体(SFE)萃取法 6
1.4.5 超声波辅助提取法 6
1.4.6 微波法 7
1.5 银杏叶中黄酮类化合物的分离方法 7
1.5.1 树脂分离法 7
1.5.2 膜分离法 7
1.5.3 其它分离方法 7
1.6 课题提出的意义 8
2 溶剂提取法提取银杏叶中黄酮类化合物
2.1 试剂及仪器 9
2.1.1
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
声波辅助提取法 6
1.4.6 微波法 7
1.5 银杏叶中黄酮类化合物的分离方法 7
1.5.1 树脂分离法 7
1.5.2 膜分离法 7
1.5.3 其它分离方法 7
1.6 课题提出的意义 8
2 溶剂提取法提取银杏叶中黄酮类化合物
2.1 试剂及仪器 9
2.1.1 主要试剂 9
2.1.2 主要仪器及设备 9
2.2 实验部分 9
2.2.1 样品处理 9
2.2.2 黄酮类化合物检测方法 9
2.2.3 标准溶液的制备以及标准曲线的绘制 10
2.2.4 实验设计 10
2.2.5 银杏叶黄酮提取工艺优化 11
3 银杏叶黄酮类化合物的分离
3.1 试剂及仪器 13
3.2 实验部分 13
3.2.1 最佳洗脱剂用量的确定 13
3.2.2 最佳洗脱剂时间的确定 13
3.3 结果与分析 14
3.3.1 最佳洗脱剂用量的确定 14
3.3.2 最佳洗脱剂时间的确定 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 银杏叶概述
银杏树又称白果树或公孙树，属银杏科植物，主要产于中国，是当今地球上最古老的树种之一。银杏叶，银杏的新鲜叶子经干燥处理后的干叶。我国银杏叶资源占世界资源的3/4以上，栽培地区非常广泛，北至辽宁，南达广东，东起浙江，西达陕西、甘肃、西南到四川、贵州、云南等地。黄酮类化合物是银杏叶中的主要药效成分，具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂的功效。目前，黄酮类化合物主要用于瘀血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症等症状[1]。
1.2 银杏叶的化学成分
目前，从银杏中已成功提取出160多种有效的药用成份，其主要的化学活性成分为黄酮类化合物和二萜内酯[2]。黄酮类化合物和二萜内酯在防治心血管病、抗老防衰、保护肌肤、抗癌、抗菌、抗过敏和提高自身免疫力等方面具有非常神奇的功效，对治疗高血压、冠心病和脑血管病具有显著的功效。
因此，关于银杏叶的研究风靡全世界，例如银杏叶片提取物被法国、德国列为降血压特效药、天然药品。同时，银杏叶提取物也被日本列为抗衰老、治老年痴呆症特效药品。甚至就连国家科委也将银杏叶的研究开发列入国家重点攻关项目。
1.2.1 黄酮类化合物
银杏叶获取物中含有类黄酮C15核内容约占6%，现已从银杏叶中获取黄酮类化合物别离有40种。根据不同的分子结构，可以分为四类：单黄酮，双黄酮，黄酮苷和儿茶素类等。
1.2.2 萜类内酯
银杏叶中有银杏内酯A，银杏内酯B，银杏内酯C以及银杏内酯J。这些内酯化合物都属于萜类化合物。银杏内酯A溶于乙酸乙醇，甲醇二甲亚砜等溶剂，银杏内酯A还有预防压力溃疡胆碱能损害康复的主要影响回忆功用,能够防止动力减少谈天,减轻和改进心肌缺血,能够阻止DAD的发作,有对抗焦虑作用；银杏内酯B不同于其他内置化合物的特性是特异性和活动性最高。至今为止发现的最强烈的血小板调度因子的拮抗剂,痰血瘀阻络用于医治缺血性中风。银杏内酯C医治心、脑血管疾病有极好的辅佐效果。
1.2.3 酚酸类
酚酸类化合物是一类含有酚环的有机酸，具有灭菌的功效。此外，酚酸类化合物还具有以下特点：（1）特殊的芳香味，能使人醒来大脑，精神焕发，耳目一新，使人重新振作；（2）滋阴养颜，削减疲劳的成效。自然界的很多植物中均含有大量的酚酸，其中以干果类的含量最高。虽然酚酸类化合物具有以上诸多优点，但是这些物质具有一定的毒性，能引起人体过敏、麻痹、突变性以及阵发性痉挛等症状。
1.2.4 其他成分
银杏叶中除了还有上述几种化学物质外，还含有较多的蛋白质，氨基酸，脂肪，维生素以及糖类等[24]。
1.3 黄酮类化合物的药理作用
目前，已发现的天然黄酮类化合物约有6000余种。由于其具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎免疫、抗衰老等，已引起了人们广泛的研究。
1.3.1 降糖、降脂、降压作用
“三高症”分别指的高血糖（糖尿病）、高血压、和高脂血症，被现代社会称为“富贵病”。他们既可以单独存在，也可以相互关联，例如糖尿病人很容易同时患上高血压或高血脂症，而高血脂又是动脉硬化形成和发展的主要因素，动脉硬化患者血管弹性差加剧血压升高。所以，出现这三种疾患中的任何一种，后期都易形成了“三高症”。目前，“三高症”是已成为老年人发生心脑血管疾病的非常重要的危险因素。研究表明，黄酮类化合物对“三高症”有很好的疗效，且无毒副作用。这主要是因为黄酮类化合物具有促进葡萄糖合成
1 绪论
1.1 银杏叶概述 1
1.2 银杏叶的化学成分 1
1.2.1 黄酮类化合物 1
1.2.2 萜类内酯 1
1.2.3 酚酸类 2
1.2.4 其他成分 2
1.3 黄酮类化合物的药理作用 2
1.3.1 降糖、降脂、降压作用 2
1.3.2 降血糖作用 2
1.3.3 降血脂作用 3
1.3.4 降血压作用 3
1.3.5 调节心、脑血管系统 3
1.3.6 抗氧化作用 4
1.4 银杏叶中黄酮类化合物的提取方法 4
1.4.1 溶剂提取法 4
1.4.2 水提取树脂分离法 5
1.4.3 有机溶剂浸提法 5
1.4.4 超临界流体(SFE)萃取法 6
1.4.5 超声波辅助提取法 6
1.4.6 微波法 7
1.5 银杏叶中黄酮类化合物的分离方法 7
1.5.1 树脂分离法 7
1.5.2 膜分离法 7
1.5.3 其它分离方法 7
1.6 课题提出的意义 8
2 溶剂提取法提取银杏叶中黄酮类化合物
2.1 试剂及仪器 9
2.1.1
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
声波辅助提取法 6
1.4.6 微波法 7
1.5 银杏叶中黄酮类化合物的分离方法 7
1.5.1 树脂分离法 7
1.5.2 膜分离法 7
1.5.3 其它分离方法 7
1.6 课题提出的意义 8
2 溶剂提取法提取银杏叶中黄酮类化合物
2.1 试剂及仪器 9
2.1.1 主要试剂 9
2.1.2 主要仪器及设备 9
2.2 实验部分 9
2.2.1 样品处理 9
2.2.2 黄酮类化合物检测方法 9
2.2.3 标准溶液的制备以及标准曲线的绘制 10
2.2.4 实验设计 10
2.2.5 银杏叶黄酮提取工艺优化 11
3 银杏叶黄酮类化合物的分离
3.1 试剂及仪器 13
3.2 实验部分 13
3.2.1 最佳洗脱剂用量的确定 13
3.2.2 最佳洗脱剂时间的确定 13
3.3 结果与分析 14
3.3.1 最佳洗脱剂用量的确定 14
3.3.2 最佳洗脱剂时间的确定 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 银杏叶概述
银杏树又称白果树或公孙树，属银杏科植物，主要产于中国，是当今地球上最古老的树种之一。银杏叶，银杏的新鲜叶子经干燥处理后的干叶。我国银杏叶资源占世界资源的3/4以上，栽培地区非常广泛，北至辽宁，南达广东，东起浙江，西达陕西、甘肃、西南到四川、贵州、云南等地。黄酮类化合物是银杏叶中的主要药效成分，具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂的功效。目前，黄酮类化合物主要用于瘀血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症等症状[1]。
1.2 银杏叶的化学成分
目前，从银杏中已成功提取出160多种有效的药用成份，其主要的化学活性成分为黄酮类化合物和二萜内酯[2]。黄酮类化合物和二萜内酯在防治心血管病、抗老防衰、保护肌肤、抗癌、抗菌、抗过敏和提高自身免疫力等方面具有非常神奇的功效，对治疗高血压、冠心病和脑血管病具有显著的功效。
因此，关于银杏叶的研究风靡全世界，例如银杏叶片提取物被法国、德国列为降血压特效药、天然药品。同时，银杏叶提取物也被日本列为抗衰老、治老年痴呆症特效药品。甚至就连国家科委也将银杏叶的研究开发列入国家重点攻关项目。
1.2.1 黄酮类化合物
银杏叶获取物中含有类黄酮C15核内容约占6%，现已从银杏叶中获取黄酮类化合物别离有40种。根据不同的分子结构，可以分为四类：单黄酮，双黄酮，黄酮苷和儿茶素类等。
1.2.2 萜类内酯
银杏叶中有银杏内酯A，银杏内酯B，银杏内酯C以及银杏内酯J。这些内酯化合物都属于萜类化合物。银杏内酯A溶于乙酸乙醇，甲醇二甲亚砜等溶剂，银杏内酯A还有预防压力溃疡胆碱能损害康复的主要影响回忆功用,能够防止动力减少谈天,减轻和改进心肌缺血,能够阻止DAD的发作,有对抗焦虑作用；银杏内酯B不同于其他内置化合物的特性是特异性和活动性最高。至今为止发现的最强烈的血小板调度因子的拮抗剂,痰血瘀阻络用于医治缺血性中风。银杏内酯C医治心、脑血管疾病有极好的辅佐效果。
1.2.3 酚酸类
酚酸类化合物是一类含有酚环的有机酸，具有灭菌的功效。此外，酚酸类化合物还具有以下特点：（1）特殊的芳香味，能使人醒来大脑，精神焕发，耳目一新，使人重新振作；（2）滋阴养颜，削减疲劳的成效。自然界的很多植物中均含有大量的酚酸，其中以干果类的含量最高。虽然酚酸类化合物具有以上诸多优点，但是这些物质具有一定的毒性，能引起人体过敏、麻痹、突变性以及阵发性痉挛等症状。
1.2.4 其他成分
银杏叶中除了还有上述几种化学物质外，还含有较多的蛋白质，氨基酸，脂肪，维生素以及糖类等[24]。
1.3 黄酮类化合物的药理作用
目前，已发现的天然黄酮类化合物约有6000余种。由于其具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎免疫、抗衰老等，已引起了人们广泛的研究。
1.3.1 降糖、降脂、降压作用
“三高症”分别指的高血糖（糖尿病）、高血压、和高脂血症，被现代社会称为“富贵病”。他们既可以单独存在，也可以相互关联，例如糖尿病人很容易同时患上高血压或高血脂症，而高血脂又是动脉硬化形成和发展的主要因素，动脉硬化患者血管弹性差加剧血压升高。所以，出现这三种疾患中的任何一种，后期都易形成了“三高症”。目前，“三高症”是已成为老年人发生心脑血管疾病的非常重要的危险因素。研究表明，黄酮类化合物对“三高症”有很好的疗效，且无毒副作用。这主要是因为黄酮类化合物具有促进葡萄糖合成
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