不同品种黄连中小檗碱的含量测定
摘 要黄连为毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch) 或云连( Coptis teeta Wall) 或者三角叶黄连（Coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）的干燥根茎，具有清热燥湿，泻火解毒之功效。其临床运用非常广泛。主要有效成分小檗碱的抗菌谱非常广，临床运用备受青睐。在现代临床运用中人们只是对经过不同炮制后的黄连进行分类使用，并没有对不同品种黄连进行比较使用。本课题通过测定不同品种黄连中小檗碱的含量，筛选出优质的黄连，为临床用药提供参考依据。本次研究中，对黄连的成分、产地分布、基源加工、品种分类进行概述，通过对比筛选出供试品和对照品的制备方法，并选取黄连的三个主要品种——云连、雅连、味连采用高效液相色谱法，进行小檗碱的含量。实验中依次考察线性关系、稳定性、重现性、精密度、回收率等方法学因素，并求出了线性回归方程，测定后得出味连的小檗碱含量最高。在实际临床运用中可以考虑优先选用味连。目 录
1 绪论
1.1黄连的简介 1
1.1.1 概述 1
1.1.2 品种分类 1
1.1.3 产地分布 1
1.1.4 采收与加工 2
1.2 有效成分及其功用 3
1.3小檗碱的结构、性质及作用 5
1.4 种植技术的发展 5
1.5国内外研究 6
2 实验部分
2.1 仪器及试剂 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 实验药材及试剂 7
2.2供试品与对照品的制备 7
2.2.1 供试品的制备 7
2.2.2 对照品溶液的制备 8
2.3含量测定 9
2.3.1 常用含量测定的方法 9
2.3.2 仪器设备、试剂及药材 10
2.3.3 色谱条件与系统适应性实验 10
2.3.4 实验操作 10
2.3.5 实验注意事项 15
结论 16
总结 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
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.3含量测定 9
2.3.1 常用含量测定的方法 9
2.3.2 仪器设备、试剂及药材 10
2.3.3 色谱条件与系统适应性实验 10
2.3.4 实验操作 10
2.3.5 实验注意事项 15
结论 16
总结 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1黄连的简介
1.1.1 概述
黄连，别名：味连、川连、鸡爪连，属毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch) 或云连( Coptis teeta Wall) 或者三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）的干燥根茎。黄连的用药始记于《神农本草经》[1]，被列为上等品具有清热燥湿，泻火解毒的功效。黄连主要用药部位为根茎，主要有效成分为小檗碱，其抗菌谱非常广泛，体外对多种革兰阳性及阴性菌均具有抑制作用，低浓度时抑菌，高浓度时杀菌。对流感病毒、钩端螺旋体、某些皮肤真菌也有一定抑制作用[2]。体外实验证实黄连素能增强白细胞的吞噬能力，小檗碱的盐酸盐（俗称盐酸黄连素）已广泛用于治疗肠胃炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效[3]。
1.1.2 品种分类
味连、云连、雅连为黄连的三个主要品种。味连分枝较多，聚集成簇状，外形酷似鸡爪，呈黄褐色，有不规则结节状隆起和须根。质感坚硬，折断后断面不整齐表皮呈暗棕色，木部金黄色，存在放射状纹理，气微，为极苦；雅连多单枝，略微呈圆柱形，顶端有少许残茎；云连多为单枝，根茎细小，表面呈棕黄色，将其折断后断面相对平坦，呈黄棕色。按产地划分品种，又可将味连分为南岸连和北岸连。南岸连与北岸连相比较栽培年限较短，而且其根茎较短，毛须较多色黄，体较松；北岸连产量比南岸连小，根条粗壮坚实。按形状特征区分，又可将雅连分为盖连王、子盖连、刁枝连、毛枝连等；云连则可分为光云连和毛云连。若按黄连等级划分又可分为味连一等、味连二等、雅连一等、雅连二等、云连一等、云连二等[4]。
1.1.3 产地分布
黄连的地域分布较为宽广，湖南、贵州、甘肃、陕西、湖北、四川、云南等都是主要分布区。主产于四川石柱、峨眉、巫溪、南川、洪雅、丰都、彭州、城口、武隆、沙湾、北川；陕西镇坪、宁强、洋县、平利县；湖北恩施、巴东、竹溪、神农架、利川、来凤、宣恩、房县、建始、咸丰；湖南桑植、龙山；贵州黔西、正安、遵义、施秉等。四川石柱及湖北利川素有“黄连之乡”的称谓。四川西南部主要分布三角叶黄连，主产于洪雅、雅安、雷波、马边、金口河。峨眉和洪雅素有“雅连之乡”的美称，而云南西北部及西藏南部则是云连的产区。主产于云南德钦、福贡、碧江、贡山、泸水、腾冲及西藏察隅等地[4]。
1.1.4 采收与加工
1.1.4.1 采收
药材进入采收期之后就要对药材采用合理的方法进行采收了。味连一般在种植5年后采收，秋末冬初雪前采挖，采挖后不能用手洗，轻轻抖落泥土，烘干至一折就断，趁温度没有褪去时将其置于专用工具中碰撞除去泥沙、须根及残余其他外物。雅连相对于味连而言，可提前至四年栽培期满就进行采收，一般在冬至之前，抖除泥沙，烘至表皮干燥而内质湿润用簸筛除去杂质后烘之全干。而后在器皿中来回撞击，除去残留泥沙、根须并剪去残余连秆。云连需要种植4年以上才可采收，抽挖出粗壮根茎和植株轻轻抖动除去泥土，晒干或烘干后置于器皿中撞击除去泥沙和根须。
1.1.4.2 加工
中药材经过加工之后在运用到临床中，才能够更好的发挥疗效。黄连的炮制种类繁多，历代文献记载已经达24种之多，所以炮制工艺极其讲究。其中酒黄连、姜黄连、吴萸连一只沿用至今，亦为药典收录。在唐代时期有炒法；宋代有酒炒、姜炒、蜜制、米泔制、麸炒、制炭、吴茱萸制、巴豆制等炮制方法。元代增加了土炒、童便制等法。明、清以后又增加了醋制、盐制、乳制、黄土姜酒蜜制、胆汁制，酒萸制等方法。并对炮制过后的临床运用有较多叙述，例如：黄连入手少阴心经，为治火之主药，治本脏之火，则生用之，治肝胆之实火，则以猪胆汁浸炒，治肝胆之虚火，则以醋浸炒，治上焦之火，则以酒炒，治中焦之火，则以姜汁炒，治下焦之火，则以盐水或朴硝研细调水和炒，治气分湿热之火，则以茱萸汤浸炒，治血分块中伏火，则以干漆末调水炒，治食积之火，则以黄土研细调水和炒。现行，有酒洗、酒拌、姜汁拌、吴茱萸拌、酒炒、醋炒、盐水炒等炮制方法。炮制方法为：净制除去杂质。润透后切薄片，晾干，或用时捣碎[5]。
1.2 有效成分及其功用
(1)黄连碱
本品为浅黄色针状结晶，是黄连的特征性成分，有抗微生物活性，就抗卡尔酵母菌来说，明显强于小檗碱、非洲防己碱和巴马汀；具有杀虫作用可诱导神经细胞分化，能够保护胃黏膜，在抗癌、提高免疫力、松弛平滑肌和
1 绪论
1.1黄连的简介 1
1.1.1 概述 1
1.1.2 品种分类 1
1.1.3 产地分布 1
1.1.4 采收与加工 2
1.2 有效成分及其功用 3
1.3小檗碱的结构、性质及作用 5
1.4 种植技术的发展 5
1.5国内外研究 6
2 实验部分
2.1 仪器及试剂 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 实验药材及试剂 7
2.2供试品与对照品的制备 7
2.2.1 供试品的制备 7
2.2.2 对照品溶液的制备 8
2.3含量测定 9
2.3.1 常用含量测定的方法 9
2.3.2 仪器设备、试剂及药材 10
2.3.3 色谱条件与系统适应性实验 10
2.3.4 实验操作 10
2.3.5 实验注意事项 15
结论 16
总结 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
.3含量测定 9
2.3.1 常用含量测定的方法 9
2.3.2 仪器设备、试剂及药材 10
2.3.3 色谱条件与系统适应性实验 10
2.3.4 实验操作 10
2.3.5 实验注意事项 15
结论 16
总结 17
参考文献 18
致谢 20
1 绪论
1.1黄连的简介
1.1.1 概述
黄连，别名：味连、川连、鸡爪连，属毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch) 或云连( Coptis teeta Wall) 或者三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）的干燥根茎。黄连的用药始记于《神农本草经》[1]，被列为上等品具有清热燥湿，泻火解毒的功效。黄连主要用药部位为根茎，主要有效成分为小檗碱，其抗菌谱非常广泛，体外对多种革兰阳性及阴性菌均具有抑制作用，低浓度时抑菌，高浓度时杀菌。对流感病毒、钩端螺旋体、某些皮肤真菌也有一定抑制作用[2]。体外实验证实黄连素能增强白细胞的吞噬能力，小檗碱的盐酸盐（俗称盐酸黄连素）已广泛用于治疗肠胃炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效[3]。
1.1.2 品种分类
味连、云连、雅连为黄连的三个主要品种。味连分枝较多，聚集成簇状，外形酷似鸡爪，呈黄褐色，有不规则结节状隆起和须根。质感坚硬，折断后断面不整齐表皮呈暗棕色，木部金黄色，存在放射状纹理，气微，为极苦；雅连多单枝，略微呈圆柱形，顶端有少许残茎；云连多为单枝，根茎细小，表面呈棕黄色，将其折断后断面相对平坦，呈黄棕色。按产地划分品种，又可将味连分为南岸连和北岸连。南岸连与北岸连相比较栽培年限较短，而且其根茎较短，毛须较多色黄，体较松；北岸连产量比南岸连小，根条粗壮坚实。按形状特征区分，又可将雅连分为盖连王、子盖连、刁枝连、毛枝连等；云连则可分为光云连和毛云连。若按黄连等级划分又可分为味连一等、味连二等、雅连一等、雅连二等、云连一等、云连二等[4]。
1.1.3 产地分布
黄连的地域分布较为宽广，湖南、贵州、甘肃、陕西、湖北、四川、云南等都是主要分布区。主产于四川石柱、峨眉、巫溪、南川、洪雅、丰都、彭州、城口、武隆、沙湾、北川；陕西镇坪、宁强、洋县、平利县；湖北恩施、巴东、竹溪、神农架、利川、来凤、宣恩、房县、建始、咸丰；湖南桑植、龙山；贵州黔西、正安、遵义、施秉等。四川石柱及湖北利川素有“黄连之乡”的称谓。四川西南部主要分布三角叶黄连，主产于洪雅、雅安、雷波、马边、金口河。峨眉和洪雅素有“雅连之乡”的美称，而云南西北部及西藏南部则是云连的产区。主产于云南德钦、福贡、碧江、贡山、泸水、腾冲及西藏察隅等地[4]。
1.1.4 采收与加工
1.1.4.1 采收
药材进入采收期之后就要对药材采用合理的方法进行采收了。味连一般在种植5年后采收，秋末冬初雪前采挖，采挖后不能用手洗，轻轻抖落泥土，烘干至一折就断，趁温度没有褪去时将其置于专用工具中碰撞除去泥沙、须根及残余其他外物。雅连相对于味连而言，可提前至四年栽培期满就进行采收，一般在冬至之前，抖除泥沙，烘至表皮干燥而内质湿润用簸筛除去杂质后烘之全干。而后在器皿中来回撞击，除去残留泥沙、根须并剪去残余连秆。云连需要种植4年以上才可采收，抽挖出粗壮根茎和植株轻轻抖动除去泥土，晒干或烘干后置于器皿中撞击除去泥沙和根须。
1.1.4.2 加工
中药材经过加工之后在运用到临床中，才能够更好的发挥疗效。黄连的炮制种类繁多，历代文献记载已经达24种之多，所以炮制工艺极其讲究。其中酒黄连、姜黄连、吴萸连一只沿用至今，亦为药典收录。在唐代时期有炒法；宋代有酒炒、姜炒、蜜制、米泔制、麸炒、制炭、吴茱萸制、巴豆制等炮制方法。元代增加了土炒、童便制等法。明、清以后又增加了醋制、盐制、乳制、黄土姜酒蜜制、胆汁制，酒萸制等方法。并对炮制过后的临床运用有较多叙述，例如：黄连入手少阴心经，为治火之主药，治本脏之火，则生用之，治肝胆之实火，则以猪胆汁浸炒，治肝胆之虚火，则以醋浸炒，治上焦之火，则以酒炒，治中焦之火，则以姜汁炒，治下焦之火，则以盐水或朴硝研细调水和炒，治气分湿热之火，则以茱萸汤浸炒，治血分块中伏火，则以干漆末调水炒，治食积之火，则以黄土研细调水和炒。现行，有酒洗、酒拌、姜汁拌、吴茱萸拌、酒炒、醋炒、盐水炒等炮制方法。炮制方法为：净制除去杂质。润透后切薄片，晾干，或用时捣碎[5]。
1.2 有效成分及其功用
(1)黄连碱
本品为浅黄色针状结晶，是黄连的特征性成分，有抗微生物活性，就抗卡尔酵母菌来说，明显强于小檗碱、非洲防己碱和巴马汀；具有杀虫作用可诱导神经细胞分化，能够保护胃黏膜，在抗癌、提高免疫力、松弛平滑肌和
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