不同产地绞股蓝叶中多糖的含量比较(附件)
摘 要 绞股蓝是一种重要的药用植物，绞股蓝的叶子中含有丰富的多糖，通过抗细胞氧化和增强巨噬细胞吞噬能力来提高机体的免疫力。其全草中可以提取出大量黄酮类成分，黄酮具有清热解读、降压降脂作用。绞股蓝在我国中医研究中，利用其味苦味甘，性凉特点，归属肺、脾经，可以生津养阴，安神养心等功效。尽管绞股蓝的作用较多，然而来自不同地区的绞股蓝其效果不同，为了对不同产地绞股蓝药物治疗效果的有效分析，许多研究开始对绞股蓝中作用成分进行提取。由于多糖的水溶性好，提取过程往往受到许多提取方法及提取试剂温度等因素影响导致提取困难，因此绞股蓝叶子中多糖成分的研究较少。然而绞股蓝中多糖成分的作用较大，提取后其生物利用度较高。因此本研究依据相关报道，利用超声辅助提取技术对其叶中总多糖进行提取，提取过程中通过不同的参数控制包括乙醇浓度、超声时间、超声功率及料液比，对各种参数实施单因素实验设计和响应面实验设计，通过实验分析对影响超声辅助提取技术中的主要参数给予优化。同时对不同因素之间的相互作用对超声提取工艺的影响进行改进，制定葡萄糖标准曲线以分析不同地区绞股蓝叶中多糖含量给予差异性分析。通过对不同地区绞股蓝叶中多糖含量的提取和对比析结果如下：通过上述结果证实，；同时因素对超声辅助提取过程中多糖纯化影响因素较大，正交试验有效证实了不同提取因素对绞股蓝多糖影响的重要性：超声功率>超声时间> 料液比=酒精浓度。同时本研究对不同地区的绞股蓝多糖含量提取结果显示，湖北神农架地区种植的绞股蓝的叶子中提取的绞股蓝多糖含量最高，因此此地区值得大面积推广种植绞股蓝和绞股蓝相关药品的开发，作为中草药疾病和保健治疗中的药物采集首选地。目 录
第一章绪言
1.1绞股蓝多糖开发的研究背景4
1.2绞股蓝在国内外开发研究进展6
1.3绞股蓝多糖提取技术及其开发的研究 7
1.4本研究的目的及意义7
第二章 实验设计
2.1 实验材料及实验仪器8
2.1.1 实验材料8
2.1.2 实验仪器8
2.2 实验方法 8
2.2.1 原料的实验前处理 8
2.2.2超声提取及样品溶液配制9
2.2.3 葡萄糖标准曲线的制作 9
2.2.
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r /> 1.4本研究的目的及意义7
第二章 实验设计
2.1 实验材料及实验仪器8
2.1.1 实验材料8
2.1.2 实验仪器8
2.2 实验方法 8
2.2.1 原料的实验前处理 8
2.2.2超声提取及样品溶液配制9
2.2.3 葡萄糖标准曲线的制作 9
2.2.4 原料中总糖含量测定 9
2.2.5 不同单因素对绞股蓝多糖的得率实验设计10
2.2.6 不同地区多绞股蓝多糖的含量检测 10
2.4 结果分析10
2.4.1 乙醇浓度对绞股蓝多糖的得率影响分析10
2.4.2 超声时间对绞股蓝多糖的得率影响分析11
2.4.3 超声功率对绞股蓝多糖的得率影响分析12
2.4.4 料液比对绞股蓝多糖的得率影响分析12
2.4.5不同地区绞股蓝叶中多糖分离提取结果分析13
2.4.7 同一地区不同因素相互作用对绞股蓝多糖提取率实验设计13
2.4.8 有关超声提取过程参数组合的优化13
2.5 结论 13
第三章 结论
参考文献 19
致谢 21
第一章 绪 言
绞股蓝，属于葫芦科草本植物，又称七叶丹、公罗锅底等。葫芦科草本植物属性较多，其中以绞股蓝属的药用价值最高，该属植物品种多、分布广，在我国主要集中生长在云南、安徽、福建、陕西、广西等地。绞股蓝，没有毒性，其清热解毒的功效不仅可以作为药物，同时可以作为当地人夏季采摘用的凉菜材料，早在《本草纲目》中就有记载绞股蓝{1}。随着现代医学的渗入研究，绞股蓝的作用进一步延伸，2002年国家卫生部通过对历年来绞股蓝化学成分提取的科研报道，及古史记载综合调查分析，最终确定绞股蓝具有增强免疫力、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗氧化及保护心脑血管等作用【24】，允许作为药物开发和使用。除了药物开发外，绞股蓝中的皂苷、多糖、黄酮类、氨基酸及复合维生素等【5】成分，被比喻为人参替代物，绞股蓝作用研究中目前对黄酮类及皂苷类研究较多，且提取技术较为成熟，而对绞股蓝多糖的提取研究较少，绞股蓝多糖属于多糖类的一种。多糖的来源包括动物多糖、植物多糖及微生物细胞壁多糖等，其中植物多糖的研究最多，植物多糖作为可溶性多糖其提取期间受到多种因素影响，因此多糖的提取和纯化会受到温度及料液比例等多种因素影响，本研究利用超声提取技术，绞股蓝多糖提取过程中单因素和多单因素作用综合分析，以研究不同产地绞股蓝中多糖含量的分析。
1.1绞股蓝多糖开发的研究背景
近年来随着经济的快速发展，人们生活水平不断提高，人们的保健意识也在
不断加强，目前市场上保健产品种类较多，其中国以多糖类保健产品的效果较好，且信誉度较高，如黄芪多糖、人参多糖、益生菌合生元等【6】。多糖的开发中其种类较多，来源广泛，因此多糖的定义就被研究者所重视。目前多糖的定义，是由10个以上的单糖通过糖苷键将不同单糖分子有效连接构建而成，由于多糖的空间结构不同，因此多糖又分为均多糖和杂多糖【7】。杂多糖在自然界中分布占比较低，如目前在医疗和美容保健领域研究最多的透明质酸属于杂多糖。相比纯多糖，杂多糖较难提取，但是其作用广泛，且效果突出如目前降血压、抗衰老及降血脂的药物均以杂多糖为主导开发方向【8】。以往的多糖开发主要围绕妊娠、黄芪、虫草等名贵药物开发，而对一些大宗草药开发甚少，自上世纪70年代日本学者从绞股蓝中提取到与人参皂苷相同结构和作用的皂苷成分依赖【9】，绞股蓝才真正的被研究者所重视，并且研究者的研究范围开始从名贵草药转入到大宗草药中。1980年，我国研究者依据古代医学记载对我国不同地区绞股蓝分布给予了确认，同时对其毒力性给予实验研究【10】，随着绞股蓝的安全性和药效较好的特性被陆续证实，许多国家开始将绞股蓝作为国家的重点保护植物，目前我国已经将绞股蓝列为国家重点保护野生植物的名录中。根据研究资料证实，绞股蓝主要分布于我国的秦岭和长江流域及南方各省，被成为名副其实的“南人参”【11】。
绞股蓝皂苷作为绞股蓝中被提取的第一种有效成分，其含量占干物质的2%以上，皂苷是在维持细胞新陈代谢过程中起重要作用，经大量研究证实皂苷的低毒高效性可以作为许多药物的辅佐剂。皂苷的提取方法较多，目前主要以乙醇沉淀法、水提醇法和打孔树脂吸附【12】法进行，而这些提取过程中往往容易难以达到较纯的目的，随着现代科学技术的应用，超声波提取技术在许多研究中被得意推广。皂苷提取后的鉴定是提取工作的主要目的，经红外光谱、核磁共振和质谱等技术【13】对绞股蓝皂苷进行提取发现绞股蓝皂苷结构与人参皂苷相同。尽管绞股蓝皂苷具有类似人参皂苷的作用，但是绞股蓝皂苷因产地不同，其皂苷含量及组成不同，因此药用效果产生了很大差异。绞股蓝皂苷主要集中分布于茎、叶组织，生长在不同阶段绞股蓝皂苷的含量不同，秋季作为绞股蓝收货季节，此时皂苷含量相比夏冬季节含量偏高，其差异主要集中于绞股蓝的叶子中【14】。除了皂苷外，绞股蓝目前应用效果中起到重要作用的为绞股蓝多糖。大量研究证实绞股蓝多糖无毒副作用，可以作为细胞免疫辅佐剂和抗氧化剂使用。除此之外，绞股蓝多糖在抗肿瘤、抗衰老具有重要作用。绞股蓝多糖同样包括均多糖和杂多糖，其中植株不同部位多糖含量不同，绞股蓝叶子中多
第一章绪言
1.1绞股蓝多糖开发的研究背景4
1.2绞股蓝在国内外开发研究进展6
1.3绞股蓝多糖提取技术及其开发的研究 7
1.4本研究的目的及意义7
第二章 实验设计
2.1 实验材料及实验仪器8
2.1.1 实验材料8
2.1.2 实验仪器8
2.2 实验方法 8
2.2.1 原料的实验前处理 8
2.2.2超声提取及样品溶液配制9
2.2.3 葡萄糖标准曲线的制作 9
2.2.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
r /> 1.4本研究的目的及意义7
第二章 实验设计
2.1 实验材料及实验仪器8
2.1.1 实验材料8
2.1.2 实验仪器8
2.2 实验方法 8
2.2.1 原料的实验前处理 8
2.2.2超声提取及样品溶液配制9
2.2.3 葡萄糖标准曲线的制作 9
2.2.4 原料中总糖含量测定 9
2.2.5 不同单因素对绞股蓝多糖的得率实验设计10
2.2.6 不同地区多绞股蓝多糖的含量检测 10
2.4 结果分析10
2.4.1 乙醇浓度对绞股蓝多糖的得率影响分析10
2.4.2 超声时间对绞股蓝多糖的得率影响分析11
2.4.3 超声功率对绞股蓝多糖的得率影响分析12
2.4.4 料液比对绞股蓝多糖的得率影响分析12
2.4.5不同地区绞股蓝叶中多糖分离提取结果分析13
2.4.7 同一地区不同因素相互作用对绞股蓝多糖提取率实验设计13
2.4.8 有关超声提取过程参数组合的优化13
2.5 结论 13
第三章 结论
参考文献 19
致谢 21
第一章 绪 言
绞股蓝，属于葫芦科草本植物，又称七叶丹、公罗锅底等。葫芦科草本植物属性较多，其中以绞股蓝属的药用价值最高，该属植物品种多、分布广，在我国主要集中生长在云南、安徽、福建、陕西、广西等地。绞股蓝，没有毒性，其清热解毒的功效不仅可以作为药物，同时可以作为当地人夏季采摘用的凉菜材料，早在《本草纲目》中就有记载绞股蓝{1}。随着现代医学的渗入研究，绞股蓝的作用进一步延伸，2002年国家卫生部通过对历年来绞股蓝化学成分提取的科研报道，及古史记载综合调查分析，最终确定绞股蓝具有增强免疫力、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗氧化及保护心脑血管等作用【24】，允许作为药物开发和使用。除了药物开发外，绞股蓝中的皂苷、多糖、黄酮类、氨基酸及复合维生素等【5】成分，被比喻为人参替代物，绞股蓝作用研究中目前对黄酮类及皂苷类研究较多，且提取技术较为成熟，而对绞股蓝多糖的提取研究较少，绞股蓝多糖属于多糖类的一种。多糖的来源包括动物多糖、植物多糖及微生物细胞壁多糖等，其中植物多糖的研究最多，植物多糖作为可溶性多糖其提取期间受到多种因素影响，因此多糖的提取和纯化会受到温度及料液比例等多种因素影响，本研究利用超声提取技术，绞股蓝多糖提取过程中单因素和多单因素作用综合分析，以研究不同产地绞股蓝中多糖含量的分析。
1.1绞股蓝多糖开发的研究背景
近年来随着经济的快速发展，人们生活水平不断提高，人们的保健意识也在
不断加强，目前市场上保健产品种类较多，其中国以多糖类保健产品的效果较好，且信誉度较高，如黄芪多糖、人参多糖、益生菌合生元等【6】。多糖的开发中其种类较多，来源广泛，因此多糖的定义就被研究者所重视。目前多糖的定义，是由10个以上的单糖通过糖苷键将不同单糖分子有效连接构建而成，由于多糖的空间结构不同，因此多糖又分为均多糖和杂多糖【7】。杂多糖在自然界中分布占比较低，如目前在医疗和美容保健领域研究最多的透明质酸属于杂多糖。相比纯多糖，杂多糖较难提取，但是其作用广泛，且效果突出如目前降血压、抗衰老及降血脂的药物均以杂多糖为主导开发方向【8】。以往的多糖开发主要围绕妊娠、黄芪、虫草等名贵药物开发，而对一些大宗草药开发甚少，自上世纪70年代日本学者从绞股蓝中提取到与人参皂苷相同结构和作用的皂苷成分依赖【9】，绞股蓝才真正的被研究者所重视，并且研究者的研究范围开始从名贵草药转入到大宗草药中。1980年，我国研究者依据古代医学记载对我国不同地区绞股蓝分布给予了确认，同时对其毒力性给予实验研究【10】，随着绞股蓝的安全性和药效较好的特性被陆续证实，许多国家开始将绞股蓝作为国家的重点保护植物，目前我国已经将绞股蓝列为国家重点保护野生植物的名录中。根据研究资料证实，绞股蓝主要分布于我国的秦岭和长江流域及南方各省，被成为名副其实的“南人参”【11】。
绞股蓝皂苷作为绞股蓝中被提取的第一种有效成分，其含量占干物质的2%以上，皂苷是在维持细胞新陈代谢过程中起重要作用，经大量研究证实皂苷的低毒高效性可以作为许多药物的辅佐剂。皂苷的提取方法较多，目前主要以乙醇沉淀法、水提醇法和打孔树脂吸附【12】法进行，而这些提取过程中往往容易难以达到较纯的目的，随着现代科学技术的应用，超声波提取技术在许多研究中被得意推广。皂苷提取后的鉴定是提取工作的主要目的，经红外光谱、核磁共振和质谱等技术【13】对绞股蓝皂苷进行提取发现绞股蓝皂苷结构与人参皂苷相同。尽管绞股蓝皂苷具有类似人参皂苷的作用，但是绞股蓝皂苷因产地不同，其皂苷含量及组成不同，因此药用效果产生了很大差异。绞股蓝皂苷主要集中分布于茎、叶组织，生长在不同阶段绞股蓝皂苷的含量不同，秋季作为绞股蓝收货季节，此时皂苷含量相比夏冬季节含量偏高，其差异主要集中于绞股蓝的叶子中【14】。除了皂苷外，绞股蓝目前应用效果中起到重要作用的为绞股蓝多糖。大量研究证实绞股蓝多糖无毒副作用，可以作为细胞免疫辅佐剂和抗氧化剂使用。除此之外，绞股蓝多糖在抗肿瘤、抗衰老具有重要作用。绞股蓝多糖同样包括均多糖和杂多糖，其中植株不同部位多糖含量不同，绞股蓝叶子中多
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