柿叶中黄酮的提取工艺研究(附件)
目的：研究柿叶中黄酮的醇法提取工艺，为柿叶中黄酮类化合物的开发利用提供理论依据。方法：以柿叶黄酮的提取率为指标，在单因素试验基础上设计正交试验，对柿叶黄酮的醇法提取工艺条件进行优化。结果：柿叶黄酮醇法提取的最佳工艺为：柿叶过40目，浸提温度90 ℃，乙醇浓度60%，浸提时间4h，固液比为1:20，再此最优工艺条件下柿叶黄酮的提取率6.8%。 目 录
1柿叶概况研究 1
1.1柿叶简介 1
1.2柿叶的化学成分 1
1.2.1黄酮类 1
1.2.2有机酸和无机阴离子 1
1.2.3香豆素类 2
1.2.4植物甾醇类 2
1.2.5挥发成分 2
1.2.6脂肪酸 2
1.2.7三萜类化合物 2
1.2.8其他类成分 2
1.3柿叶的研究现状 3
1.4柿叶黄酮类化合物药理作用 4
1.4.1抗氧化作用 4
1.4.2对血生化影响作用 4
1.4.3止血作用 4
1.4.4对心血管及神经组织保护作用 4
1.4.5对肝脏保护作用 5
1.4.6对色素沉着性疾病的治疗作用 5
1.4.7抗菌作用 5
1.4.8抗癌作用 5
1.5柿叶黄酮类化合物开发前景 5
1.6柿叶黄酮的提取工艺 6
1.6.1超声波水提法 6
1.6.2微波溶剂提取法 6
1.6.3水提法 6
1.6.4醇提法 6
1.7研究的目的及意义 6
2柿叶中黄酮的提取工艺研究 8
2.1仪器及材料 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2实验方法 8
2.2.1原料预处理 8
2.2.2柿叶黄酮提取的一般流程 8
2.2.3试剂和溶液 8
2.2.4测定方法 8
2.2.5黄酮得率的计算 9
2.3实验内容 10
2.3.1柿叶的预处理
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及材料 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2实验方法 8
2.2.1原料预处理 8
2.2.2柿叶黄酮提取的一般流程 8
2.2.3试剂和溶液 8
2.2.4测定方法 8
2.2.5黄酮得率的计算 9
2.3实验内容 10
2.3.1柿叶的预处理对提取率的影响 10
2.3.2乙醇浓度对提取率的影响 10
2.3.3回流提取时间对提取率的影响 11
2.3.4固液比对提取率的影响 12
2.3.5提取温度对提取率的影响 13
2.3.6正交试验设计 14
2.4结果讨论分析 15
2.5最优提取工艺验证 16
总结 17
参考文献 18
致 谢 21
1柿叶概况研究
1.1柿叶简介
柿属植物在我国大约有40种, 有柿(DiospyrosK aki Linn)、君迁子(Dlotus Lion)、油柿(DoleiferaCherg)等等。但以柿(Diospyros kaki L .f)为最常见, 是我国南北各地普遍栽培的食用品种,其分布十分广泛。柿果、柿蒂、柿霜、柿漆、柿饼、柿花、柿叶、柿皮、柿木皮及柿根均可作为药用[1]。 特别值得一提的是柿叶资源丰富,使用方便,疗效确切,正日益受到人们的重视。柿叶为柿树科(Ebenaceae)柿树属(Diospy ros)植物柿(Diospy ros kaki L .f )的新鲜或干燥叶。其味苦、性寒 ,具有抗菌消炎、生津止渴、清热解毒、润肺强心、镇咳止血、抗癌防癌等多种医疗保健功能。作为药用始载于明《滇南本草》 , 曰:“经霜叶敷臁疮”。以后诸家本草及医(药)书也多有记载[2]。现代研究表明,柿叶含有黄酮类、鞣质、酚类、香豆素、有机酸、胡萝卜素、维生素C等多种化学成分并具有广泛[3]。
1.2柿叶的化学成分
1.2.1黄酮类
柿叶(Dkaki L .)中的主要有效成分是黄酮。目前已发现的黄酮化合物有黄芪甙(astraglin)、异槲皮素(isoquercitrin)、山萘氛3oβD葡萄糖甙(kaempfetol3oβDglucopyranoside)、山萘酚(Kaempferol)、槲皮素(quercetin)、山萘酚 3 o αL 鼠李糖甙(kaempfetol3oLrhamnopyranoside)、山萘酚3βD 木糖甙(kaempferol3βDXylopyramoside)、山萘酚3oαL阿拉伯糖甙(kaempferol 3oαLarabinopyranoside)、槲皮素3o[2o(3 .4. 5三羟基苯甲酰)]葡萄糖甙(quercetin3o(2ogalloyl)βDglucopyranoside)[4]、芦丁、金丝桃甙(槲皮素3半乳糖甙)[5]、杨梅树皮甙等。 柿叶中的黄酮成分主要以甙类形式存在, 提取时多采用水、甲醇、70 %乙醇作溶剂。另外, 用紫外光谱扫描法测定柿叶中粗黄酮含量时发现, 鲜叶中黄酮含量与放置3年的陈叶中含量基本一致,表明柿叶可以较长时间的贮存[6]。
1.2.2有机酸和无机阴离子
柿叶中的有机酸包括琥珀酸、苯甲酸、水杨酸、糠酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酚酸、吲哚醋酸和苹果酸[79]。 张吉祥[10]等人用离子色谱法测定柿叶中的有机酸和无机阴离子,发现琥珀酸和苹果酸是柿叶中的主要有机酸,阴离子有 H2PO4、Cl、NO3、SO42 。
1.2.3香豆素类
柿叶中的香豆素类主要有莨菪亭(scopolerin)、6 羟基7甲氧基香豆素等。
1.2.4植物甾醇类
主要是菜子甾醇(campesterol)、豆甾醇(stigmasterol)、β谷甾醇(β sitosterol)[11]等。
1.2.5挥发成分
安秋荣等人[12]用程序升温毛细管气相色谱质谱联用(GCMS)方法分离鉴定出柿叶80个挥发成分的组分;用谱图检索方法确认出的75个化合物,占总挥发成分的98.13%,其中55个为含氧化合物,占总挥发成分的95.22%,以(E)2己烯醛(42.22%)、(Z)2己烯醛(8.14%)和3,7,11,15四甲基2十六烯1醇( 17.82%)为主,这些醛和醇无毒,可作为食品的香料, 一些组分还具有药效。
1.2.6脂肪酸
安秋荣等人[12]用 GCMS法从柿叶中分离出21种脂肪酸,其中鉴定出19种,占总含量的98.72%。在鉴定出的脂肪酸中,饱和脂肪酸11种,占柿叶脂肪酸总含量的70.78
1柿叶概况研究 1
1.1柿叶简介 1
1.2柿叶的化学成分 1
1.2.1黄酮类 1
1.2.2有机酸和无机阴离子 1
1.2.3香豆素类 2
1.2.4植物甾醇类 2
1.2.5挥发成分 2
1.2.6脂肪酸 2
1.2.7三萜类化合物 2
1.2.8其他类成分 2
1.3柿叶的研究现状 3
1.4柿叶黄酮类化合物药理作用 4
1.4.1抗氧化作用 4
1.4.2对血生化影响作用 4
1.4.3止血作用 4
1.4.4对心血管及神经组织保护作用 4
1.4.5对肝脏保护作用 5
1.4.6对色素沉着性疾病的治疗作用 5
1.4.7抗菌作用 5
1.4.8抗癌作用 5
1.5柿叶黄酮类化合物开发前景 5
1.6柿叶黄酮的提取工艺 6
1.6.1超声波水提法 6
1.6.2微波溶剂提取法 6
1.6.3水提法 6
1.6.4醇提法 6
1.7研究的目的及意义 6
2柿叶中黄酮的提取工艺研究 8
2.1仪器及材料 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2实验方法 8
2.2.1原料预处理 8
2.2.2柿叶黄酮提取的一般流程 8
2.2.3试剂和溶液 8
2.2.4测定方法 8
2.2.5黄酮得率的计算 9
2.3实验内容 10
2.3.1柿叶的预处理
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及材料 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2实验方法 8
2.2.1原料预处理 8
2.2.2柿叶黄酮提取的一般流程 8
2.2.3试剂和溶液 8
2.2.4测定方法 8
2.2.5黄酮得率的计算 9
2.3实验内容 10
2.3.1柿叶的预处理对提取率的影响 10
2.3.2乙醇浓度对提取率的影响 10
2.3.3回流提取时间对提取率的影响 11
2.3.4固液比对提取率的影响 12
2.3.5提取温度对提取率的影响 13
2.3.6正交试验设计 14
2.4结果讨论分析 15
2.5最优提取工艺验证 16
总结 17
参考文献 18
致 谢 21
1柿叶概况研究
1.1柿叶简介
柿属植物在我国大约有40种, 有柿(DiospyrosK aki Linn)、君迁子(Dlotus Lion)、油柿(DoleiferaCherg)等等。但以柿(Diospyros kaki L .f)为最常见, 是我国南北各地普遍栽培的食用品种,其分布十分广泛。柿果、柿蒂、柿霜、柿漆、柿饼、柿花、柿叶、柿皮、柿木皮及柿根均可作为药用[1]。 特别值得一提的是柿叶资源丰富,使用方便,疗效确切,正日益受到人们的重视。柿叶为柿树科(Ebenaceae)柿树属(Diospy ros)植物柿(Diospy ros kaki L .f )的新鲜或干燥叶。其味苦、性寒 ,具有抗菌消炎、生津止渴、清热解毒、润肺强心、镇咳止血、抗癌防癌等多种医疗保健功能。作为药用始载于明《滇南本草》 , 曰:“经霜叶敷臁疮”。以后诸家本草及医(药)书也多有记载[2]。现代研究表明,柿叶含有黄酮类、鞣质、酚类、香豆素、有机酸、胡萝卜素、维生素C等多种化学成分并具有广泛[3]。
1.2柿叶的化学成分
1.2.1黄酮类
柿叶(Dkaki L .)中的主要有效成分是黄酮。目前已发现的黄酮化合物有黄芪甙(astraglin)、异槲皮素(isoquercitrin)、山萘氛3oβD葡萄糖甙(kaempfetol3oβDglucopyranoside)、山萘酚(Kaempferol)、槲皮素(quercetin)、山萘酚 3 o αL 鼠李糖甙(kaempfetol3oLrhamnopyranoside)、山萘酚3βD 木糖甙(kaempferol3βDXylopyramoside)、山萘酚3oαL阿拉伯糖甙(kaempferol 3oαLarabinopyranoside)、槲皮素3o[2o(3 .4. 5三羟基苯甲酰)]葡萄糖甙(quercetin3o(2ogalloyl)βDglucopyranoside)[4]、芦丁、金丝桃甙(槲皮素3半乳糖甙)[5]、杨梅树皮甙等。 柿叶中的黄酮成分主要以甙类形式存在, 提取时多采用水、甲醇、70 %乙醇作溶剂。另外, 用紫外光谱扫描法测定柿叶中粗黄酮含量时发现, 鲜叶中黄酮含量与放置3年的陈叶中含量基本一致,表明柿叶可以较长时间的贮存[6]。
1.2.2有机酸和无机阴离子
柿叶中的有机酸包括琥珀酸、苯甲酸、水杨酸、糠酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酚酸、吲哚醋酸和苹果酸[79]。 张吉祥[10]等人用离子色谱法测定柿叶中的有机酸和无机阴离子,发现琥珀酸和苹果酸是柿叶中的主要有机酸,阴离子有 H2PO4、Cl、NO3、SO42 。
1.2.3香豆素类
柿叶中的香豆素类主要有莨菪亭(scopolerin)、6 羟基7甲氧基香豆素等。
1.2.4植物甾醇类
主要是菜子甾醇(campesterol)、豆甾醇(stigmasterol)、β谷甾醇(β sitosterol)[11]等。
1.2.5挥发成分
安秋荣等人[12]用程序升温毛细管气相色谱质谱联用(GCMS)方法分离鉴定出柿叶80个挥发成分的组分;用谱图检索方法确认出的75个化合物,占总挥发成分的98.13%,其中55个为含氧化合物,占总挥发成分的95.22%,以(E)2己烯醛(42.22%)、(Z)2己烯醛(8.14%)和3,7,11,15四甲基2十六烯1醇( 17.82%)为主,这些醛和醇无毒,可作为食品的香料, 一些组分还具有药效。
1.2.6脂肪酸
安秋荣等人[12]用 GCMS法从柿叶中分离出21种脂肪酸,其中鉴定出19种,占总含量的98.72%。在鉴定出的脂肪酸中,饱和脂肪酸11种,占柿叶脂肪酸总含量的70.78
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