gtpase激活蛋白mogyp1在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析

摘要：由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的引起的到稻瘟病是水稻上的毁灭性真菌病害之一。GYPs作为Rab型蛋白的特异性GAPs，参与Rab型蛋白膜泡运输的过程。Gyp蛋白家族都含有一个具有GTPase活性的TBC结构域，通过对GTP的水解和GDP磷酸化对Rab在膜泡运输过程中的功能进行调节。为了深入研究稻瘟病菌与水稻的互作机制，本课题选取MoGYP1进行生物学功能分析。通过构建载体及原生质体转化获得了MoGYP1敲除突变体。对突变体进行表型分析发现，MoGYP1敲除突变体生长减慢，产孢量下降，菌丝几丁质分布不均，侵染菌丝扩展减慢及致病能力显著下降。综上所述，MoGYP1参与调控稻瘟病菌的生长、产孢、几丁质分布及致病过程。
目录
摘要4
关键词4
Abstract4
Key words4
引言4
1 材料与方法5
材料5
1.1.1供试菌株5
1.1.1实验用培养基5
1.2 方法5
1.2.1 敲除载体的构建5
1.2.2 突变体的筛选及验证6
1.2.3突变体的基因互补实验6
1.2.4不同培养基条件下生长速率测定7
1.2.5菌丝CFW，FM464染色7
1.2.6 突变体产孢及孢子形态观察7
1.2.7突变体致病性测定7
1.2.8突变体侵入分析7
2 结果与分析8
2.1敲除载体的构建和验证8
2.2 MoGYP1基因参与稻瘟病菌的营养生长8
2.3 MoGYP1基因参与菌丝形态建成和几丁质分布9
2.4 MoGYP1基因参与产孢，但不参与附着胞形成9
2.5 突变体致病性降低10
2.6 突变体侵染能力下降10
3 讨论11
致谢11
参考文献11
图1敲除突变体的构建方法及敲除突变体转化子PCR验证8
图2 MoGYP1敲除突变体菌丝分枝观察9
图3 MoGYP1敲除突变体菌丝几丁质分布9

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图4MoGYP1敲除突变体产孢量9
图5MoGYP1敲除突变体致病性测定10
图6MoGYP1敲除突变体洋葱表皮侵入及扩展能力分析11
表1不同菌株在不同培养基上生长速率8
表 2不同菌株分生孢子和附着胞形成10
GTPase激活蛋白MoGyp1在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析

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