三嗪类除草剂降解菌的分离及降解行为研究
对三嗪类除草剂扑灭津降解菌的分离和降解行为进行了研究。对长期施用除草剂扑灭津的土壤在无机盐培养基中进行为期4周的驯化，得到能够快速降解扑灭津的混合菌株A-1富集液。监测A-1富集液在扑灭津浓度为60 mg·L-1的无机盐培养基中的生长情况以及对扑灭津的降解情况。发现培养72h后，对扑灭津的降解率可达到94.4%。使用A-1作为菌种液，对包含扑灭津的不同土壤进行生物添加降解实验，研究环境因素对扑灭津降解的影响。实验结果表明，该A-1富集液在中性和酸性土壤以及低土壤湿度、淹水环境下都能快速降解扑灭津，土壤中可溶性有机质的含量会延缓其降解速率，添加不同浓度的尿素会明显缩短扑灭津降解的迟滞期，促进其快速降解，降解菌在土壤中的初始接种量仅会影响初始降解速率，不会影响最终降解效果，该混合菌株是一种广谱的三嗪类降解种群，具有很好的土壤修复能力，可为三嗪类除草剂的生物修复提供良好的微生物资源。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 2
引言 2
1 材料与方法 2
1.1 供试农药与土壤 2
1.2试剂与仪器 3
1.3 培养基 4
1.4 菌株的筛选、培养和降解动力学 4
1.4.1 降解菌富集液的制备 4
1.4.2 无机盐MSM培养基中扑灭津检测方法的建立 4
1.4.3 扑灭津微生物降解动力学 4
1.5 环境因素对菌株降解扑灭津的影响 4
1.5.1菌剂的制备 4
1.5.2 扑灭津污染土壤样品的制备 4
1.5.3 土壤样品中扑灭津残留浓度的检测 5
1.5.4 扑灭津供试土壤生物添加降解实验 5
1.5.5 不同环境因素对扑灭津降解的影响 5
1.6数据处理 6
2结果与讨论 6
2.1扑灭津标准浓度曲线 6
2.2 扑灭津土壤中的添加回收率 6
2.3 扑灭津培养基中的添加回收率 7
2.4 扑灭津降解菌株的分离 7
2.5 降解菌株的生长和扑灭津降解曲线 8
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/> 2.6 不同土壤中的扑灭津生物添加降解行为 9
2.7 不同环境因素对扑灭津降解的影响 10
2.7.1 降解菌接种量对扑灭津降解的影响 10
2.7.2 土壤湿度对扑灭津降解的影响 11
2.7.3 可溶性有机质对扑灭津降解的影响 12
2.7.4 尿素对扑灭津降解的影响 13
2.8 总结 13
致谢 14
参考文献 14
三嗪类除草剂降解菌的分离和降解行为研究
引言
引言
三嗪类除草剂为我国广泛的生产和使用的5大类除草剂之一，部分品种长期的使用对环境造成了严重的不良影响[1]。首先，三嗪类农药由于自身的化学稳定性，在土壤中残留时间可达到数月以上。另外，作为内吸传导型除草剂，容易被农作物吸收、富集。它们作为一种内分泌干扰物质在环境中的残留对土壤环境，水体环境的危害是很大的，使用不当对后茬作物也有毒害作用[2]，并且三嗪类化合物已经被研究证明是一种致癌物质、对人类、动物和水生生物存在危害[3]。因此，寻找一种能够快速消除土壤中残留的三嗪类农药的方法非常值得我们研究。
扑灭津，英文名Propazine，化学名称：2氯4.6二异丙胺基1.3.5三氮苯，分子式：C9H16ClN5，结构式如下：
扑灭津是三嗪类内吸、选择性除草剂。纯品乳白色色结晶，熔点为212～214℃，20℃时蒸气压为386.6×108 Pa。几乎不溶于水，能溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿等有机溶剂。工业品纯度大于95%，在中性、弱酸或弱碱溶液中稳定，遇强酸、强碱易分解。可通过根系吸收，并传导到叶片，抑制光合作用的希尔反应，使叶片缺绿，植株饥饿死亡。可用于玉米、高粱、谷子、果园和苗圃，防除马唐、狗尾草、稗草、早熟禾、看麦娘、藜蓼、繁缕、荠菜等杂草。在土壤中可稳定存在1～3个月，随着在田间多年的施用，可累积残存12～18个月[4]留期长，对后茬敏感作物易发生药害，是重要的环境污染物。
生物降解是一种被广泛使用的三嗪类农药的降解手段，很多的报道发现，假单胞杆菌属和节细菌属都可以快速降解或者矿化三嗪类农药[17,18]，本研究就从长期施用扑灭津的土壤中分离出一系列高效降解菌，对菌株的生长、扑灭津培养基中降解以及扑灭津污染土壤生物添加修复进行了研究，以此为扑灭津污染环境的生物修复提供微生物资源和依据。
1 材料与方法
1.1 供试农药与土壤
扑灭津原药（Propazine，Pro，纯度﹥97.3 %）由江苏省农业科学院提供。实验土壤采集于：（1）江苏省南京下马坊公园内, 简称NJ，（2）江西省鹰潭市红壤研究所，简称JX，（3）江苏省盐城市滨海港滩边，简称YC。三种土壤的部分理化性质列于表1。
表1 供试土壤基本理化性质
Soil
Texture(%)
pH
TOC(%)
Total N(%)
Total P(mg/kg)
Sand
Silt
Clay
NJ
59.20
17.30
23.50
7.15
2.13
0.205
1585
JX
39.80
27.20
33.00
5.45
0.54
0.053
217
YC
68.80
18.20
13.00
8.60
0.58
0.101
755
1.2试剂与仪器
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 2
引言 2
1 材料与方法 2
1.1 供试农药与土壤 2
1.2试剂与仪器 3
1.3 培养基 4
1.4 菌株的筛选、培养和降解动力学 4
1.4.1 降解菌富集液的制备 4
1.4.2 无机盐MSM培养基中扑灭津检测方法的建立 4
1.4.3 扑灭津微生物降解动力学 4
1.5 环境因素对菌株降解扑灭津的影响 4
1.5.1菌剂的制备 4
1.5.2 扑灭津污染土壤样品的制备 4
1.5.3 土壤样品中扑灭津残留浓度的检测 5
1.5.4 扑灭津供试土壤生物添加降解实验 5
1.5.5 不同环境因素对扑灭津降解的影响 5
1.6数据处理 6
2结果与讨论 6
2.1扑灭津标准浓度曲线 6
2.2 扑灭津土壤中的添加回收率 6
2.3 扑灭津培养基中的添加回收率 7
2.4 扑灭津降解菌株的分离 7
2.5 降解菌株的生长和扑灭津降解曲线 8
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/> 2.6 不同土壤中的扑灭津生物添加降解行为 9
2.7 不同环境因素对扑灭津降解的影响 10
2.7.1 降解菌接种量对扑灭津降解的影响 10
2.7.2 土壤湿度对扑灭津降解的影响 11
2.7.3 可溶性有机质对扑灭津降解的影响 12
2.7.4 尿素对扑灭津降解的影响 13
2.8 总结 13
致谢 14
参考文献 14
三嗪类除草剂降解菌的分离和降解行为研究
引言
引言
三嗪类除草剂为我国广泛的生产和使用的5大类除草剂之一，部分品种长期的使用对环境造成了严重的不良影响[1]。首先，三嗪类农药由于自身的化学稳定性，在土壤中残留时间可达到数月以上。另外，作为内吸传导型除草剂，容易被农作物吸收、富集。它们作为一种内分泌干扰物质在环境中的残留对土壤环境，水体环境的危害是很大的，使用不当对后茬作物也有毒害作用[2]，并且三嗪类化合物已经被研究证明是一种致癌物质、对人类、动物和水生生物存在危害[3]。因此，寻找一种能够快速消除土壤中残留的三嗪类农药的方法非常值得我们研究。
扑灭津，英文名Propazine，化学名称：2氯4.6二异丙胺基1.3.5三氮苯，分子式：C9H16ClN5，结构式如下：
扑灭津是三嗪类内吸、选择性除草剂。纯品乳白色色结晶，熔点为212～214℃，20℃时蒸气压为386.6×108 Pa。几乎不溶于水，能溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿等有机溶剂。工业品纯度大于95%，在中性、弱酸或弱碱溶液中稳定，遇强酸、强碱易分解。可通过根系吸收，并传导到叶片，抑制光合作用的希尔反应，使叶片缺绿，植株饥饿死亡。可用于玉米、高粱、谷子、果园和苗圃，防除马唐、狗尾草、稗草、早熟禾、看麦娘、藜蓼、繁缕、荠菜等杂草。在土壤中可稳定存在1～3个月，随着在田间多年的施用，可累积残存12～18个月[4]留期长，对后茬敏感作物易发生药害，是重要的环境污染物。
生物降解是一种被广泛使用的三嗪类农药的降解手段，很多的报道发现，假单胞杆菌属和节细菌属都可以快速降解或者矿化三嗪类农药[17,18]，本研究就从长期施用扑灭津的土壤中分离出一系列高效降解菌，对菌株的生长、扑灭津培养基中降解以及扑灭津污染土壤生物添加修复进行了研究，以此为扑灭津污染环境的生物修复提供微生物资源和依据。
1 材料与方法
1.1 供试农药与土壤
扑灭津原药（Propazine，Pro，纯度﹥97.3 %）由江苏省农业科学院提供。实验土壤采集于：（1）江苏省南京下马坊公园内, 简称NJ，（2）江西省鹰潭市红壤研究所，简称JX，（3）江苏省盐城市滨海港滩边，简称YC。三种土壤的部分理化性质列于表1。
表1 供试土壤基本理化性质
Soil
Texture(%)
pH
TOC(%)
Total N(%)
Total P(mg/kg)
Sand
Silt
Clay
NJ
59.20
17.30
23.50
7.15
2.13
0.205
1585
JX
39.80
27.20
33.00
5.45
0.54
0.053
217
YC
68.80
18.20
13.00
8.60
0.58
0.101
755
1.2试剂与仪器
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