兔呼吸道致病菌的检测与分析兔呼吸道致病菌的检测与分析(附件)【字数：6192】
3本试验通过对兔场表现有呼吸道症状的家兔所采集的鼻腔分泌物进行细菌的分离鉴定。主要从巴氏杆菌入手，运用16s rRNA基因扩增技术和特异性PCR技术对致病菌进行鉴定。之后进行药敏试验，并用小鼠和家兔模型进行毒力实验，对分离菌群的特性进行研究，为兔呼吸道疾病的防控提供依据。主要分离的致病菌有巴氏杆菌、波氏杆菌、博代氏杆菌和溶血性大肠杆菌，对某几个兔场的混合感染的药敏试验统计出了抑菌圈直径并找出对应的敏感抗生素。分离菌株中，疑似多杀性巴氏杆菌的16S rRNA基因序列与多杀性巴氏杆菌相似度达到99%，培养特性及生化实验符合巴氏杆菌的特性，将巴氏杆菌进行动物实验后成功复制该病并分离出病菌。本研究将为兔呼吸道传染性疾病的临床防治提供试验参考。
目录
Abstract： 4
Key words 4
引言 4
1 材料与方法 5
1．1 培养基与主要试剂 5
1．2 实验动物 5
1．3 引物 5
1.3.1 兔巴氏杆菌特异性引物 5
1.3.2 细菌16S rRNA通用引物 6
1．4 细菌分离培养 6
1．5 分离菌株培养特性及生化实验 6
1．6 分离菌株 16S rRNA 基因的分析 6
1.6.1 分离菌株16S rRNA基因的PCR扩增 6
1.6.2 纯化产物基因测序 6
1．7 分离菌株的PCR鉴定 6
1．8 分离菌株药敏试验 7
1．9 动物实验 7
2 结果与分析 7
2．1 细菌分离培养及菌株特性 7
2.1.1 巴氏杆菌菌落 7
2.1.2 波氏败血杆菌与博代氏杆菌 8
2．2 巴氏杆菌生化实验 8
2．3 分离菌株16S RNA分析 8
2．4 分离菌株的PCR鉴定 9
2．5 分离菌株药敏试验 9
2．6 动物回归实验 10
3 讨论 12
致谢 13
兔呼吸道致病菌的检测与分析
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
动物医学专业学生 贺濛初
指导老师 剧世强
Detection and analysis of pathogenic bacteria from respiratory tract of rabbits
Student majoring in Veterinary Medicine HE Mengchu
Tutor JU Shiqiang
Abstract：In this experiment, the nasal secretions collected from rabbit rabbits with respiratory symptoms were identified and preliminary epidemiological investigation.Mainly from the Pasteurella start, the use of 16s rRNA gene amplification technology and specific PCR technology to identify pathogens.After the drug susceptibility test, and mice and rabbits model for virulent experiments, the characteristics of the isolated flora for rabbits to provide the basis for prevention and treatment of respiratory diseases. The main isolates were Pasteurella, Bordetella, Bordetella and hemolytic E. coli. The susceptibility test of mixed infection of several rabbits showed the diameter of the inhibition zone and corresponding sensitive antibiotics.The 16S rRNA gene sequence of Pseudomonas aeruginosa was 99% similar to that of Pasteurella multocida, and the culture characteristics and biochemical experiments were consistent with the characteristics of Pasteurella and the success of Pasteurella was carried out. Copy the disease and isolate the bacteria.
Key words: rabbit,16S rRNA gene amplification,Pasteurella,spcific PCR
引言：
兔多杀性巴氏杆菌病，又称兔出血性败血病，是由多杀性巴氏杆菌引起的一种在家兔生产中广泛存在而且危害性较大的呼吸道传染病[1]。该病病原血清型复杂，不同血清型之间交互免疫效果不理想，且在不同地区流行的血清型差异较大，给防治工作带来较大难度。支气管败血波氏杆菌病是由支气管败血波氏杆菌引起的一种多发性呼吸道疾病。这两种呼吸道传染病的发病率均较高，各年龄家兔均易感，临床上常出现混合感染，给养兔业造成严重的经济损失[2]。
多杀巴氏杆菌是一种两段纯圆，中央微突的短杆菌或球杆菌，长，宽，不形成芽胞，不运动，无鞭毛，革兰氏染色阴性的兼性厌氧菌。本菌在添加血清或血液的培养基上生长良好。在血琼脂上生成灰白色，湿润而粘稠的菌落，不溶血；在普通琼脂上形成细小透明的露珠状菌落；在普通肉汤中，初均匀混独，以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜；明胶穿刺培养，沿穿剌孔呈线状生长，上粗下细。
目录
Abstract： 4
Key words 4
引言 4
1 材料与方法 5
1．1 培养基与主要试剂 5
1．2 实验动物 5
1．3 引物 5
1.3.1 兔巴氏杆菌特异性引物 5
1.3.2 细菌16S rRNA通用引物 6
1．4 细菌分离培养 6
1．5 分离菌株培养特性及生化实验 6
1．6 分离菌株 16S rRNA 基因的分析 6
1.6.1 分离菌株16S rRNA基因的PCR扩增 6
1.6.2 纯化产物基因测序 6
1．7 分离菌株的PCR鉴定 6
1．8 分离菌株药敏试验 7
1．9 动物实验 7
2 结果与分析 7
2．1 细菌分离培养及菌株特性 7
2.1.1 巴氏杆菌菌落 7
2.1.2 波氏败血杆菌与博代氏杆菌 8
2．2 巴氏杆菌生化实验 8
2．3 分离菌株16S RNA分析 8
2．4 分离菌株的PCR鉴定 9
2．5 分离菌株药敏试验 9
2．6 动物回归实验 10
3 讨论 12
致谢 13
兔呼吸道致病菌的检测与分析
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
动物医学专业学生 贺濛初
指导老师 剧世强
Detection and analysis of pathogenic bacteria from respiratory tract of rabbits
Student majoring in Veterinary Medicine HE Mengchu
Tutor JU Shiqiang
Abstract：In this experiment, the nasal secretions collected from rabbit rabbits with respiratory symptoms were identified and preliminary epidemiological investigation.Mainly from the Pasteurella start, the use of 16s rRNA gene amplification technology and specific PCR technology to identify pathogens.After the drug susceptibility test, and mice and rabbits model for virulent experiments, the characteristics of the isolated flora for rabbits to provide the basis for prevention and treatment of respiratory diseases. The main isolates were Pasteurella, Bordetella, Bordetella and hemolytic E. coli. The susceptibility test of mixed infection of several rabbits showed the diameter of the inhibition zone and corresponding sensitive antibiotics.The 16S rRNA gene sequence of Pseudomonas aeruginosa was 99% similar to that of Pasteurella multocida, and the culture characteristics and biochemical experiments were consistent with the characteristics of Pasteurella and the success of Pasteurella was carried out. Copy the disease and isolate the bacteria.
Key words: rabbit,16S rRNA gene amplification,Pasteurella,spcific PCR
引言：
兔多杀性巴氏杆菌病，又称兔出血性败血病，是由多杀性巴氏杆菌引起的一种在家兔生产中广泛存在而且危害性较大的呼吸道传染病[1]。该病病原血清型复杂，不同血清型之间交互免疫效果不理想，且在不同地区流行的血清型差异较大，给防治工作带来较大难度。支气管败血波氏杆菌病是由支气管败血波氏杆菌引起的一种多发性呼吸道疾病。这两种呼吸道传染病的发病率均较高，各年龄家兔均易感，临床上常出现混合感染，给养兔业造成严重的经济损失[2]。
多杀巴氏杆菌是一种两段纯圆，中央微突的短杆菌或球杆菌，长，宽，不形成芽胞，不运动，无鞭毛，革兰氏染色阴性的兼性厌氧菌。本菌在添加血清或血液的培养基上生长良好。在血琼脂上生成灰白色，湿润而粘稠的菌落，不溶血；在普通琼脂上形成细小透明的露珠状菌落；在普通肉汤中，初均匀混独，以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜；明胶穿刺培养，沿穿剌孔呈线状生长，上粗下细。
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