高脂日粮对小鼠卵巢发育的影响研究(附件)
肥胖和超重在当下变得十分普遍，在大量可获得高热量食物面前和久坐不动的生活方式的驱动下，对全球公共健康构成严重威胁。在畜牧生产中，能量代谢也是一个重要的方面。然而，能量代谢对动物繁殖的影响还需要大量的研究。本实验的目的是研究高脂日粮对小鼠卵巢的影响。方法为购入三周龄小鼠10只，随机平均分成2 组，实验组每天喂食脂肪含量60%的高脂饲料，对照组每天喂食常规饲料。饲养到15周龄后采集小鼠的卵巢、肝脏、脂肪组织，蜡块包埋后再进行组织切片、HE染色、观察不同发育阶段的卵巢卵泡发育状况、肝脏脂肪化程度等。记录实验结果，进行比较，得出研究结果。两组的体重差异显著，肥胖模型成功建立。肝脏等器官的脏器系数差异显着。小鼠血清检测中孕酮、雌激素、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三脂的浓度，高脂组较对照组差异显著（P<0.05）。The effects of high - fat diet on ovarian development in miceStudent majoring in Animal Science Gong SihaoTutor Shi Fangxiong Wei Quanwei
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 仪器及试剂3
1.1.1 试验仪器 3
1.1.2试验试剂3
1.2 实验动物及试验设计3
1.2.1 实验动物3
1.2.2 实验设计3
1.2.3 试验模型的建立3
1.2.4 试验方法4
1.3 数据处理和统计分析7
2 结果与分析7
2.1 高脂日粮对小鼠体重的影响 7
2.2 各组织脏器指数分析8
2.3 卵巢H&E染色结果、各级卵泡形态8
2.4 肝脏组织H&E染色结果9
2.5 血清检测结果分析10
3 讨论12
致谢12
参考文献13
高脂日粮对小鼠卵巢发育的影响研究
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
/> 引言
体重增加导致肥胖是由于能量失衡，食物的能量摄入长期超过生命活动和新陈代谢过程所消耗的能量[1]。
脂肪是生命运转的必需品，其在多种疾病的发病机制的信号传导中起一定作用。脂肪里的脂肪酸对我们的大脑、免疫系统乃至生殖系统的正常运作来说十分重要，生殖轴（下丘脑、垂体和性腺）表现出一定“营养传感”的机制，并与营养状况和生育相关[2]。脂肪组织的内分泌功能对性腺的影响人体脂肪组织分为白色脂肪和棕色脂肪两种。棕色脂肪分布于肩、颈、腋窝和肩胛区，主要以产热的方式来释放能量，以抵御体温过低和肥胖。由于成年人拥有的活性棕色脂肪存储量与肥胖呈负相关，因而棕色脂肪在人类肥胖和能量平衡中起到重要作用[3]。白色脂肪广泛分布于皮下网膜等处，不仅是能量储存器官，也是重要的内分泌器官。脂肪组织对性腺的影响主要就是通过释放脂肪因子，如瘦素、脂联素、抑制素和 Ghrelin 等来发挥作用的[4]。
世界范围内肥胖的患病率急剧上升，研究表明过量摄入高热量食物会增加包括心血管疾病、糖尿病、骨关节炎、癌症和代谢紊乱在内的各种严重健康问题的风险[5]，以及生殖中断[68]。特别是，肥胖表现出性别差异，女性比男性发病率高[9,10]。流行病学调查清晰地表明超过正常范围的脂肪导致月经异常，排卵困难和不孕[11]。进一步阐明肥胖对女性生殖功能的影响。然而，肥胖是否影响卵巢卵泡发育、卵泡储备或卵巢寿命，其机制尚不清楚[12]。
繁殖是一种复杂的生物学功能，使延续物种。生殖系统在控制复杂的监管网络，允许最大繁殖效率，也适应环境和内部条件。在哺乳动物和其他脊椎动物，这些生殖信号集成在不同级别的下丘脑垂体性腺（HPG；也被称为促性腺激素轴）这主要是由三大套因素：下丘脑促性腺激素释放肽，激素（GnRH）、垂体促性腺激素，LH和FSH和性腺激素，类固醇激素和肽类。这些元素被连接到前馈和反馈调节循环，从而保证生殖激素的调节—激素分泌和性腺功能的发展[13]。因此，全面认识和评价肥胖对雌性卵巢卵泡的影响，不仅对于深入研究卵泡发育的调节机制具有重要意义，而且也有利于阐明肥胖更深层的影响，并为解决由肥胖引起的各种问题提供新的方法和思路。因此通过研究肥胖对雌性小鼠卵巢卵泡的影响，不仅对物种的繁衍和人类的健康具有重要的意义。
正如大家所知的，哺乳动物卵巢具有两个重要的功能：雌配子的产生和卵巢甾体激素（如雌激素和孕酮）的合成。这些卵巢甾体激素通过激素的反馈通路调节卵泡细胞生长和分化。此外，卵巢合成雌二醇（E2）的能力，是正常的卵泡功能的主要指标之一。雄激素产生卵泡膜细胞层通过转换应用于颗粒细胞雌激素的合成[14]。此外，颗粒细胞产生雌激素，并暴露于外源性雌激素，由于E2的产生，可能会引发卵巢颗粒细胞中的雌激素的负反馈调节[15]。
自从发现颗粒细胞可合成雌激素，可以推断出E2可能在颗粒细胞的的增殖和分化中[16]发挥重要作用。并且，E2在哺乳动物生殖过程中起着至关重要的功能，尤其是调节卵泡发育和卵子发生。此外，成熟卵泡所产生的雌激素也是子宫内膜增生期的一个关键的因素。
颗粒细胞在雌性动物中起到生殖类固醇激素生产和调节卵巢的周期性功能的作用。另外，颗粒细胞形成卵泡微环境，促进卵母细胞发育，提供能量，清除废物，参与分子信号传递[17]。卵母细胞和伴随的颗粒细胞吸引和保持共生关系[18]。可以说，在卵巢中起着至关重要的作用，如限制卵泡排卵数量，从而保证一定数量的胚胎可以成功的发育。颗粒细胞受旁分泌和自分泌因子共同作用调节。这些分泌因子决定类固醇激素合成的细胞会黄素化还是转化进入其他通路，还有颗粒细胞黄素化的细胞的寿命是否将延长，这对维护卵巢功能具有重要意义[19]。
肥胖导致游离脂肪酸增多，长期高浓度的游离脂肪酸肯能导致卵泡生理改变，最终导致卵母细胞发育能力受损，通过直接影响和间接影响复杂卵丘卵母细胞通过改变颗粒细胞功能。游离脂肪酸暴露主要影响参与凋亡途径的脂质代谢，氧化应激，和类固醇激素。重要的是，从游离脂肪酸暴露卵泡卵母细胞发育能力表现出显著降低（囊胚形成）[20]。高游离脂肪酸可能导致卵泡孕酮浓度升高，这可能表明可能出现过早黄素化，这可能会降低颗粒细胞的敏感性，随后的影响对排卵的刺激。游离脂肪酸的变动可能会影响卵泡激素的合成与反应排卵刺激。这也许可以解释排卵周期和排卵障碍的在患有代谢疾病的妇女中发病率较高。
1 材料与方法
1.1 仪器及试剂
1.1.1 仪器
仪器名称
型号
生产厂家
真空干燥箱
DZF6020
上海新苗医疗器械制造有限公司
全自动生物组织包埋机
YD6D
浙江省金华市医疗设备厂
石蜡切片机
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 仪器及试剂3
1.1.1 试验仪器 3
1.1.2试验试剂3
1.2 实验动物及试验设计3
1.2.1 实验动物3
1.2.2 实验设计3
1.2.3 试验模型的建立3
1.2.4 试验方法4
1.3 数据处理和统计分析7
2 结果与分析7
2.1 高脂日粮对小鼠体重的影响 7
2.2 各组织脏器指数分析8
2.3 卵巢H&E染色结果、各级卵泡形态8
2.4 肝脏组织H&E染色结果9
2.5 血清检测结果分析10
3 讨论12
致谢12
参考文献13
高脂日粮对小鼠卵巢发育的影响研究
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
/> 引言
体重增加导致肥胖是由于能量失衡，食物的能量摄入长期超过生命活动和新陈代谢过程所消耗的能量[1]。
脂肪是生命运转的必需品，其在多种疾病的发病机制的信号传导中起一定作用。脂肪里的脂肪酸对我们的大脑、免疫系统乃至生殖系统的正常运作来说十分重要，生殖轴（下丘脑、垂体和性腺）表现出一定“营养传感”的机制，并与营养状况和生育相关[2]。脂肪组织的内分泌功能对性腺的影响人体脂肪组织分为白色脂肪和棕色脂肪两种。棕色脂肪分布于肩、颈、腋窝和肩胛区，主要以产热的方式来释放能量，以抵御体温过低和肥胖。由于成年人拥有的活性棕色脂肪存储量与肥胖呈负相关，因而棕色脂肪在人类肥胖和能量平衡中起到重要作用[3]。白色脂肪广泛分布于皮下网膜等处，不仅是能量储存器官，也是重要的内分泌器官。脂肪组织对性腺的影响主要就是通过释放脂肪因子，如瘦素、脂联素、抑制素和 Ghrelin 等来发挥作用的[4]。
世界范围内肥胖的患病率急剧上升，研究表明过量摄入高热量食物会增加包括心血管疾病、糖尿病、骨关节炎、癌症和代谢紊乱在内的各种严重健康问题的风险[5]，以及生殖中断[68]。特别是，肥胖表现出性别差异，女性比男性发病率高[9,10]。流行病学调查清晰地表明超过正常范围的脂肪导致月经异常，排卵困难和不孕[11]。进一步阐明肥胖对女性生殖功能的影响。然而，肥胖是否影响卵巢卵泡发育、卵泡储备或卵巢寿命，其机制尚不清楚[12]。
繁殖是一种复杂的生物学功能，使延续物种。生殖系统在控制复杂的监管网络，允许最大繁殖效率，也适应环境和内部条件。在哺乳动物和其他脊椎动物，这些生殖信号集成在不同级别的下丘脑垂体性腺（HPG；也被称为促性腺激素轴）这主要是由三大套因素：下丘脑促性腺激素释放肽，激素（GnRH）、垂体促性腺激素，LH和FSH和性腺激素，类固醇激素和肽类。这些元素被连接到前馈和反馈调节循环，从而保证生殖激素的调节—激素分泌和性腺功能的发展[13]。因此，全面认识和评价肥胖对雌性卵巢卵泡的影响，不仅对于深入研究卵泡发育的调节机制具有重要意义，而且也有利于阐明肥胖更深层的影响，并为解决由肥胖引起的各种问题提供新的方法和思路。因此通过研究肥胖对雌性小鼠卵巢卵泡的影响，不仅对物种的繁衍和人类的健康具有重要的意义。
正如大家所知的，哺乳动物卵巢具有两个重要的功能：雌配子的产生和卵巢甾体激素（如雌激素和孕酮）的合成。这些卵巢甾体激素通过激素的反馈通路调节卵泡细胞生长和分化。此外，卵巢合成雌二醇（E2）的能力，是正常的卵泡功能的主要指标之一。雄激素产生卵泡膜细胞层通过转换应用于颗粒细胞雌激素的合成[14]。此外，颗粒细胞产生雌激素，并暴露于外源性雌激素，由于E2的产生，可能会引发卵巢颗粒细胞中的雌激素的负反馈调节[15]。
自从发现颗粒细胞可合成雌激素，可以推断出E2可能在颗粒细胞的的增殖和分化中[16]发挥重要作用。并且，E2在哺乳动物生殖过程中起着至关重要的功能，尤其是调节卵泡发育和卵子发生。此外，成熟卵泡所产生的雌激素也是子宫内膜增生期的一个关键的因素。
颗粒细胞在雌性动物中起到生殖类固醇激素生产和调节卵巢的周期性功能的作用。另外，颗粒细胞形成卵泡微环境，促进卵母细胞发育，提供能量，清除废物，参与分子信号传递[17]。卵母细胞和伴随的颗粒细胞吸引和保持共生关系[18]。可以说，在卵巢中起着至关重要的作用，如限制卵泡排卵数量，从而保证一定数量的胚胎可以成功的发育。颗粒细胞受旁分泌和自分泌因子共同作用调节。这些分泌因子决定类固醇激素合成的细胞会黄素化还是转化进入其他通路，还有颗粒细胞黄素化的细胞的寿命是否将延长，这对维护卵巢功能具有重要意义[19]。
肥胖导致游离脂肪酸增多，长期高浓度的游离脂肪酸肯能导致卵泡生理改变，最终导致卵母细胞发育能力受损，通过直接影响和间接影响复杂卵丘卵母细胞通过改变颗粒细胞功能。游离脂肪酸暴露主要影响参与凋亡途径的脂质代谢，氧化应激，和类固醇激素。重要的是，从游离脂肪酸暴露卵泡卵母细胞发育能力表现出显著降低（囊胚形成）[20]。高游离脂肪酸可能导致卵泡孕酮浓度升高，这可能表明可能出现过早黄素化，这可能会降低颗粒细胞的敏感性，随后的影响对排卵的刺激。游离脂肪酸的变动可能会影响卵泡激素的合成与反应排卵刺激。这也许可以解释排卵周期和排卵障碍的在患有代谢疾病的妇女中发病率较高。
1 材料与方法
1.1 仪器及试剂
1.1.1 仪器
仪器名称
型号
生产厂家
真空干燥箱
DZF6020
上海新苗医疗器械制造有限公司
全自动生物组织包埋机
YD6D
浙江省金华市医疗设备厂
石蜡切片机
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