esco2调控小鼠卵母细胞染色体黏合的分子机制
乙酰转移酶2(establishment of sister chromatid cohesion N-acetyltransferase 2, ESCO2 )是人体内ECO1的同源物之一,具有调节姐妹单色单体的凝聚,修复DNA双链断裂损伤的作用。然而它在卵母细胞减数分裂中的作用尚不清楚。在本实验中,我们在小鼠卵母细胞中检测到了ESCO2定位在染色体轴线空隙,与黏连蛋白亚基定位相同。而通过siRNA基因沉默的ESCO2,也导致了小鼠卵母细胞发育成熟的过程中,多种纺锤体缺陷和染色体排列异常现象。另外通过染色体铺片实验,我们还观察到ESCO2沉默的MII期卵母细胞中,非整倍体发生率较高。因此,这些数据表明ESCO2在调节纺锤体的组装和保证小鼠卵母细胞中的整倍体,起到了重要作用。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
绪论3
1材料与方法4
1.1实验动物4
1.2实验抗体与试剂4
1.3 卵母细胞采集与培养5
1.4 siRNA显微注射5
1.5 免疫荧光与激光共聚焦显微镜检测5
1.6免疫蛋白印记法(Western Blot)6
1.7 染色体铺片7
1.8 数据统计与分析7
2结果与分析 7
2.1 ESCO2在小鼠卵母细胞减数分裂期间定位在染色体轴线空隙7
2.2 ESCO2对维持小鼠卵母细胞正常的纺锤体形成和染色体排列有重要作用8
2.3 ESCO2对小鼠卵母细胞整倍体的维持具有重要作用9
3讨论 10
参考文献11
致谢 11
图1ESCO2的定位 8
图2WB实验结果9
图3纺锤体及染色体异常统计9
图4染色体铺片实验数据统计10
ESCO2调控小鼠卵母细胞染色体黏合的分子机制
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
绪论3
1材料与方法4
1.1实验动物4
1.2实验抗体与试剂4
1.3 卵母细胞采集与培养5
1.4 siRNA显微注射5
1.5 免疫荧光与激光共聚焦显微镜检测5
1.6免疫蛋白印记法(Western Blot)6
1.7 染色体铺片7
1.8 数据统计与分析7
2结果与分析 7
2.1 ESCO2在小鼠卵母细胞减数分裂期间定位在染色体轴线空隙7
2.2 ESCO2对维持小鼠卵母细胞正常的纺锤体形成和染色体排列有重要作用8
2.3 ESCO2对小鼠卵母细胞整倍体的维持具有重要作用9
3讨论 10
参考文献11
致谢 11
图1ESCO2的定位 8
图2WB实验结果9
图3纺锤体及染色体异常统计9
图4染色体铺片实验数据统计10
ESCO2调控小鼠卵母细胞染色体黏合的分子机制
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