日粮中添加枯草芽孢杆菌fmbj对肉鸡生长性能肉品质和抗氧化能力的影响
本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌fmbJ（BS fmbJ）对肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响。共选用240只1日龄雄性AA肉鸡，随机分为4组，每组6重复，每重复10只鸡，分别饲喂基础日粮（CON组）、基础日粮+2×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS-1组）、基础日粮+3×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS-2组）和基础日粮+4×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS-3组）。CON组和BS组日粮中均不添加抗生素，试验期42 d。结果显示，与对照组相比，BS组显著提高了肉鸡的日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和饲料转化率（FCR）（P ＜ 0.05），以及其滴水损失、蒸煮损失等肉品质指标均得到显著改善（P ＜ 0.05）。此外，与对照组相比，BS组肉鸡血清和肝脏中的谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽还原酶（GR）等抗氧化酶的活性显著增强（P ＜ 0.05），血清和肝脏的丙二醛（MDA）含量显著降低（P ＜ 0.05），肝脏线粒体中活性氧（ROS）含量也显著（P ＜ 0.05）降低，以及转录因子NF-E2相关因子2（NrF2）、血红素氧合酶1（HO-1）等抗氧化酶基因表达得到显著改善（P ＜ 0.05）。综上所述，枯草芽孢杆菌fmbJ可以作为提高肉鸡抗氧化能力的饲料添加剂。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1菌株2
1.1.2试验动物2
1.2试验设计 2
1.3样品采集3
1.4测定指标和方法3
1.4.1生产性能的测定3
1.4.2肉鸡肉质的评定3
1.4.3抗氧化系统的测定4
1.4.4脂质过氧化的测定4
1.4.5肉鸡肝脏中线粒体的分离4
1.4.6活性氧（ROS）的测定4
1.4.7实时定量PCR分析4
1.5数据分析5
2结果与分析5
2.1生产性能5
2.2肉鸡胸肌肌肉品质6
2.3抗氧化系统 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
7
2.4抗氧化基因表达水平8
3讨论 9
3.1饲料中添加益生菌对肉鸡生长性能的影响9
3.2饲料中添加益生菌对肉鸡胸肌肌肉品质的影响9
3.3饲料中添加益生菌对肉鸡抗氧化能力的影响10
4结论 10
致谢11
参考文献12
日粮中添加枯草芽孢杆菌fmbJ对肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响
引言
当前各国提出了限制或禁止使用抗生素类添加剂，以此来避免过度使用抗生素而产生的负面影响，比如在人类疾病中的耐药性现象会导致相关疾病治疗的失败[1,2]。过度使用抗生素对现代家禽业有巨大的压力，因此也是促使人们发现新型替代品的动力。自从欧盟禁止饲料添加剂中使用抗生素以来，益生菌作为一种重要的抗生素饲料添加剂替代品受到了广泛地关注[3]。微生态制剂由于其无残留、无耐药性并且显著提高饲料利用率等优点而受到了越来越多的重视，因此，微生态制剂具有广阔的应用前景。已有研究证明，动物肠道内微生物是其黏膜屏障的主要成分，直接增强了动物肠道中益生菌的益生作用。有一些益生菌添加剂满足替代抗生素的要求，并且已经在生产中得到一定程度上的应用。益生菌可以通过改善机体的抗氧化能力，改善肉鸡的健康水平[4]。
氧化应激（Oxidative Stress，OS）是指由于体内氧化与抗氧化系统失衡，导致机体内更倾向于氧化作用而导致的中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由过多的自由基在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致疾病和衰老的重要因素之一[5]。当氧自由基的产生速度超过了抗氧化酶系统的清除能力时，过多的氧自由基通过离子化和加成等方式主要通过攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用[6]。脂质过氧化是疾病发生的主要原因之一。反应性氧化物（Reactive Oxidative Species, ROS）是血管细胞增长的重要细胞内信号，过度的反应性氧化物将导致氧化应激，包括超氧阴离子（.O?）、羟自由基（OH）和过氧化氢（H?O?）等[7]。机体内有一个复杂的天然酶和非酶抗氧化系统来防御由自由基或氧化物质造成的氧化应激,酶抗氧化系统主要包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）等[8]，是机体内存在的主要的自由基清除因子，可以改善自由基对肝细胞造成的损害；非酶抗氧化系统主要包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、α硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等[9]。近年来对非酶抗氧化剂的研究表明，饮食中添加抗氧化剂有助于预防疾病，提高生活品质。
相关研究表明，革兰氏阳性菌的非致病性芽孢杆菌，并且利用其产孢子的能力，可以作为添加剂应用于畜禽饲养中[10]。各种芽孢杆菌已经被广泛地用作人类和动物的饲用微生物，包括枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌[11,12]。枯草芽孢杆菌，一种孢子益生菌，可以在极端环境中代谢休眠，如过高或过低的pH值以及极高或极低的温度[13]。这种微生物可以以不同方式改善肠道和宿主健康，比如通过酸发酵的方式降低肠道pH值，刺激肠道免疫系统，增强肠道抗氧化能力，刺激肠上皮内淋巴细胞等[14]。包括枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。目前，我国允许在畜禽日粮中添加的芽孢杆菌菌种包括枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。日粮中添加枯草芽孢杆菌对生产有促进作用：刺激免疫系统、提高禽类的抗氧化能力[15,16]，同时，含有枯草芽孢杆菌的饲粮可提高肉鸡的肉品质[17,18]。本研究的目的是评估日粮中添加枯草芽孢杆菌fmbJ对肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 菌株 本实验中采用的枯草芽孢杆菌fmbJ（CGMCCN 0943），是在大学食品科技学院分离的一株野生型菌株，并由中国无锡恒泽元生物技术有限公司提供，保证在使用前至少有1.0×1011cfu/g，并在使用前保存在一个无菌容器中。
1.1.2 试验动物 由中国南京康欣禽业有限公司提供的一共240只1日龄的雄性AA肉仔鸡，体重差异不显著(P ＞ 0.05)。
1.2 试验设计
本试验选用1日龄健康AA肉鸡240只，随机分为4个处理组，每个处理设6个重复，每个重复10只鸡。肉仔鸡饲养于中国南京康欣禽业有限公司，并饲喂玉米豆粕型基础日粮。分别饲喂基础日粮（CON组）、基础日粮+2×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS1组）、基础日粮+3×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS2组）和基础日粮+4×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS3组）。CON组和BS组日粮中不添加抗生素。试验为期42 d。日粮配制达到或超过肉鸡营养需求标准（NRC，1994）。114 日龄的肉鸡饲养在3436 ℃的恒温室内，然后温度逐渐下降至实验结束时为26 ℃。所有鸡都饲养在恒定24 h光照中，并且自由采食。基础日粮组成及营养水平见表1。
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摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1菌株2
1.1.2试验动物2
1.2试验设计 2
1.3样品采集3
1.4测定指标和方法3
1.4.1生产性能的测定3
1.4.2肉鸡肉质的评定3
1.4.3抗氧化系统的测定4
1.4.4脂质过氧化的测定4
1.4.5肉鸡肝脏中线粒体的分离4
1.4.6活性氧（ROS）的测定4
1.4.7实时定量PCR分析4
1.5数据分析5
2结果与分析5
2.1生产性能5
2.2肉鸡胸肌肌肉品质6
2.3抗氧化系统 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
7
2.4抗氧化基因表达水平8
3讨论 9
3.1饲料中添加益生菌对肉鸡生长性能的影响9
3.2饲料中添加益生菌对肉鸡胸肌肌肉品质的影响9
3.3饲料中添加益生菌对肉鸡抗氧化能力的影响10
4结论 10
致谢11
参考文献12
日粮中添加枯草芽孢杆菌fmbJ对肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响
引言
当前各国提出了限制或禁止使用抗生素类添加剂，以此来避免过度使用抗生素而产生的负面影响，比如在人类疾病中的耐药性现象会导致相关疾病治疗的失败[1,2]。过度使用抗生素对现代家禽业有巨大的压力，因此也是促使人们发现新型替代品的动力。自从欧盟禁止饲料添加剂中使用抗生素以来，益生菌作为一种重要的抗生素饲料添加剂替代品受到了广泛地关注[3]。微生态制剂由于其无残留、无耐药性并且显著提高饲料利用率等优点而受到了越来越多的重视，因此，微生态制剂具有广阔的应用前景。已有研究证明，动物肠道内微生物是其黏膜屏障的主要成分，直接增强了动物肠道中益生菌的益生作用。有一些益生菌添加剂满足替代抗生素的要求，并且已经在生产中得到一定程度上的应用。益生菌可以通过改善机体的抗氧化能力，改善肉鸡的健康水平[4]。
氧化应激（Oxidative Stress，OS）是指由于体内氧化与抗氧化系统失衡，导致机体内更倾向于氧化作用而导致的中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由过多的自由基在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致疾病和衰老的重要因素之一[5]。当氧自由基的产生速度超过了抗氧化酶系统的清除能力时，过多的氧自由基通过离子化和加成等方式主要通过攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用[6]。脂质过氧化是疾病发生的主要原因之一。反应性氧化物（Reactive Oxidative Species, ROS）是血管细胞增长的重要细胞内信号，过度的反应性氧化物将导致氧化应激，包括超氧阴离子（.O?）、羟自由基（OH）和过氧化氢（H?O?）等[7]。机体内有一个复杂的天然酶和非酶抗氧化系统来防御由自由基或氧化物质造成的氧化应激,酶抗氧化系统主要包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）等[8]，是机体内存在的主要的自由基清除因子，可以改善自由基对肝细胞造成的损害；非酶抗氧化系统主要包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、α硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等[9]。近年来对非酶抗氧化剂的研究表明，饮食中添加抗氧化剂有助于预防疾病，提高生活品质。
相关研究表明，革兰氏阳性菌的非致病性芽孢杆菌，并且利用其产孢子的能力，可以作为添加剂应用于畜禽饲养中[10]。各种芽孢杆菌已经被广泛地用作人类和动物的饲用微生物，包括枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌[11,12]。枯草芽孢杆菌，一种孢子益生菌，可以在极端环境中代谢休眠，如过高或过低的pH值以及极高或极低的温度[13]。这种微生物可以以不同方式改善肠道和宿主健康，比如通过酸发酵的方式降低肠道pH值，刺激肠道免疫系统，增强肠道抗氧化能力，刺激肠上皮内淋巴细胞等[14]。包括枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。目前，我国允许在畜禽日粮中添加的芽孢杆菌菌种包括枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。日粮中添加枯草芽孢杆菌对生产有促进作用：刺激免疫系统、提高禽类的抗氧化能力[15,16]，同时，含有枯草芽孢杆菌的饲粮可提高肉鸡的肉品质[17,18]。本研究的目的是评估日粮中添加枯草芽孢杆菌fmbJ对肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 菌株 本实验中采用的枯草芽孢杆菌fmbJ（CGMCCN 0943），是在大学食品科技学院分离的一株野生型菌株，并由中国无锡恒泽元生物技术有限公司提供，保证在使用前至少有1.0×1011cfu/g，并在使用前保存在一个无菌容器中。
1.1.2 试验动物 由中国南京康欣禽业有限公司提供的一共240只1日龄的雄性AA肉仔鸡，体重差异不显著(P ＞ 0.05)。
1.2 试验设计
本试验选用1日龄健康AA肉鸡240只，随机分为4个处理组，每个处理设6个重复，每个重复10只鸡。肉仔鸡饲养于中国南京康欣禽业有限公司，并饲喂玉米豆粕型基础日粮。分别饲喂基础日粮（CON组）、基础日粮+2×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS1组）、基础日粮+3×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS2组）和基础日粮+4×1010 cfu/kg枯草芽孢杆菌fmbJ（BS3组）。CON组和BS组日粮中不添加抗生素。试验为期42 d。日粮配制达到或超过肉鸡营养需求标准（NRC，1994）。114 日龄的肉鸡饲养在3436 ℃的恒温室内，然后温度逐渐下降至实验结束时为26 ℃。所有鸡都饲养在恒定24 h光照中，并且自由采食。基础日粮组成及营养水平见表1。
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