贯叶连翘中金丝桃素的提取工艺研究(附件)
摘 要本课题对陕产贯叶连中金丝桃素进行提取，以金丝桃素的提取率为考察指标，采用单因素实验结合正交实验的方法对影响金丝桃素提取率的因素进行考察。获得贯叶连翘中金丝桃素的最佳工艺条件为：乙醇浓度80%，料液比1:15，提取2次，提取时间40min，提取率为0.32%。验证实验表明，该工艺稳定，可靠。为贯叶连翘的进一步生产研究提供依据。 目 录
1 前言
1.1 贯叶连翘的简介 1
1.2 贯叶连翘的研究现状 1
1.3 贯叶连翘的化学成分 2
1.3.1苯并二蒽酮类 2
1.3.2间苯三酚类 2
1.3.3黄酮类化合物 2
1.3.4单宁类化合物 3
1.4 金丝桃素的理化性质 3
1.5 金丝桃素的提取方法 3
1.5.1水浸提法 3
1.5.2有机溶剂提取法 3
1.6 金丝桃素的测定方法 4
1.6.1分光光度法 4
1.6.2高效液相色谱法 5
1.7 金丝桃素的药理作用 5
1.7.1抗抑郁作用 5
1.7.2抗病毒作用 6
1.7.3抗癌抗肿瘤作用 6
1.8 课题研究的意义 7
2 贯叶连翘中金丝桃素的提取工艺研究
2.1 材料和仪器 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2 试验方法 8
2.2.1样品处理 8
2.2.2标准曲线的制备 8
2.2.3提取过程 9
2.2.4单因素实验 9
2.2.5正交实验 10
2.3实验结果与分析 10
2.3.1单因素实验结果 10
2.3.2正交实验结果 13
2.3.3验证试验 14
结论 15
参考文献 16
致谢 18
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘(Hypericum perforatumL.)，干燥全草又名叫小对叶草，属于藤黄
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
实验结果与分析 10
2.3.1单因素实验结果 10
2.3.2正交实验结果 13
2.3.3验证试验 14
结论 15
参考文献 16
致谢 18
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘(Hypericum perforatumL.)，干燥全草又名叫小对叶草，属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物，以植物的全草入药，它的味辛、苦、性平，可以清热凉血，调经解毒。贯叶连翘除了作为传统中药材入药以外，近年来的研究发现它还具有多种药理作用，如在治疗创伤、抗抑郁、抗肿瘤、抗炎、止咳、镇痛等方面都有着显著地效果。贯叶连翘的多种化学成分都具有较强的生物活性，如金丝桃素、贯叶金丝桃素、金丝桃苷、总黄酮、挥发性成分等，各化学成分之间相互协调作用，使得贯叶连翘的运用越来越广泛。随着对贯叶连翘的深入研究，使其在临床上有了广泛的应用，因而贯叶连翘成为近年来全球最畅销的药草之一。
我国贯叶连翘资源相当丰富，主要分布在西北及西南地区，但我国对金丝桃素的基础和应用研究不多，目前仅将金丝桃素含量大于0.3%的贯叶连翘提取物出口，且提取物中的金丝桃素含量相差较大，其中对原药材有效成分的提取率低是较大原因之一。《中国药典》2010年版一部对贯叶连翘的规定也仅限于对其中金丝桃苷，芦丁的鉴别与金丝桃苷的含量测定，而对于有效成分金丝桃素的研究则有欠缺。鉴于此，我们建立了金丝桃素提取工艺研究方法，以期为今后金丝桃素的研究奠定基础。
1.2 贯叶连翘的研究现状
贯叶连翘在德国作为民间的草药在治疗创伤、抗抑郁、治疗风湿痛风等已经有上千年的历史，是国际医药市场上最重要的抗抑郁植物制剂原料。近年来，贯叶连翘的研究主要集中于贯叶连翘提取物在药理作用的方面和化学成分的分析方面，随着研究的深入，越来越多的文献报道贯叶连翘提取物对多种疾病具有治疗作用，使其在中药研究领域受到强烈的关注，综合学者的研究成果，贯叶连翘还需要加强在其延缓衰老及抗肿瘤作用机理的研究、与其他药物联用副作用的研究、资源保护及生物技术的应用等方面[1]。
传统中医认为贯叶连翘其气微，味微苦涩；可舒肝解郁；清热利湿；消肿止痛还具有清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎的功效。
现代药理研究表明：贯叶连翘具有抗抑郁、抗病毒、抗菌、镇痛等作用。上世纪80年代后期，由于植物体内的化合物金丝桃素(hypericin)具有显著的抗DNA、RNA病毒繁殖作用而引起人们的广泛关注。目前，金丝桃素已作为主要治疗抑郁症、甲型肝炎、乙型肝炎及艾滋病的药物在德国、英国等国家上市，金丝桃素的多种药理作用，使其成为当前国际研究、开发的重点课题之一。目前关于金丝桃素的研究，国内多处于药理临床研究阶段，主要集中于肿瘤的辅助治疗和抗病毒研究方面，国外现已将其用于抑郁症、艾滋病等的临床治疗。鉴于金丝桃素突出的抗病毒作用，以及作为癌症的光化学治疗的一种有前途的内源性光敏剂，贯叶连翘在我国作为一种新发现的中药材品种，还未载入任何形式的法定质量标准。目前我国对贯叶连翘的研究还处在较低的水平，其提取物中金丝桃素等有效成分的含量偏低，不利于其研究和开发。贯叶连翘提取物及其制剂的研究，不但涉及重大疾病的治疗，而且还与现代重大社会问题有关，在我国具有巨大的现实市场和潜在市场。因此，对贯叶连翘中有效成分的研究还是很有必要的。
1.3 贯叶连翘化学成分
贯叶连翘中含有多种化学成分，通过药理实验研究表明其中的多种化学成分具有一定的生物活性，贯叶连翘中的不同生物活性成分具有不同的药理作用，各成分相互之间发挥协同作用从而用于不同疾病的治疗。
贯叶连翘中多种具有天然生物活性成分的化合物已被鉴定，以金丝桃素和伪金丝桃素为主，新鲜植物中含的原金丝桃素和原伪金丝桃素在阳光下可分别转化为金丝桃素和伪金丝桃素。依据学者研究可将贯叶连翘的化学成分概括为以下四部分:
1.3.1 苯并二蒽酮类
苯并二蒽酮类主要包括金丝桃素（hypericin）和伪金丝桃素(pseudohypericin)和一些前 体物质，如原金丝桃素（protohypericin），原伪金丝桃素（protopseudohypericin）。其中金丝桃素和伪金丝桃素是金丝桃属植物的特征成分，主要存在于花和芽中，在贯叶连翘中的含量一般为万分之几。伪金丝桃素的含量是金丝桃素的2－4倍
1 前言
1.1 贯叶连翘的简介 1
1.2 贯叶连翘的研究现状 1
1.3 贯叶连翘的化学成分 2
1.3.1苯并二蒽酮类 2
1.3.2间苯三酚类 2
1.3.3黄酮类化合物 2
1.3.4单宁类化合物 3
1.4 金丝桃素的理化性质 3
1.5 金丝桃素的提取方法 3
1.5.1水浸提法 3
1.5.2有机溶剂提取法 3
1.6 金丝桃素的测定方法 4
1.6.1分光光度法 4
1.6.2高效液相色谱法 5
1.7 金丝桃素的药理作用 5
1.7.1抗抑郁作用 5
1.7.2抗病毒作用 6
1.7.3抗癌抗肿瘤作用 6
1.8 课题研究的意义 7
2 贯叶连翘中金丝桃素的提取工艺研究
2.1 材料和仪器 8
2.1.1材料 8
2.1.2仪器 8
2.2 试验方法 8
2.2.1样品处理 8
2.2.2标准曲线的制备 8
2.2.3提取过程 9
2.2.4单因素实验 9
2.2.5正交实验 10
2.3实验结果与分析 10
2.3.1单因素实验结果 10
2.3.2正交实验结果 13
2.3.3验证试验 14
结论 15
参考文献 16
致谢 18
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘(Hypericum perforatumL.)，干燥全草又名叫小对叶草，属于藤黄
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
实验结果与分析 10
2.3.1单因素实验结果 10
2.3.2正交实验结果 13
2.3.3验证试验 14
结论 15
参考文献 16
致谢 18
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘(Hypericum perforatumL.)，干燥全草又名叫小对叶草，属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物，以植物的全草入药，它的味辛、苦、性平，可以清热凉血，调经解毒。贯叶连翘除了作为传统中药材入药以外，近年来的研究发现它还具有多种药理作用，如在治疗创伤、抗抑郁、抗肿瘤、抗炎、止咳、镇痛等方面都有着显著地效果。贯叶连翘的多种化学成分都具有较强的生物活性，如金丝桃素、贯叶金丝桃素、金丝桃苷、总黄酮、挥发性成分等，各化学成分之间相互协调作用，使得贯叶连翘的运用越来越广泛。随着对贯叶连翘的深入研究，使其在临床上有了广泛的应用，因而贯叶连翘成为近年来全球最畅销的药草之一。
我国贯叶连翘资源相当丰富，主要分布在西北及西南地区，但我国对金丝桃素的基础和应用研究不多，目前仅将金丝桃素含量大于0.3%的贯叶连翘提取物出口，且提取物中的金丝桃素含量相差较大，其中对原药材有效成分的提取率低是较大原因之一。《中国药典》2010年版一部对贯叶连翘的规定也仅限于对其中金丝桃苷，芦丁的鉴别与金丝桃苷的含量测定，而对于有效成分金丝桃素的研究则有欠缺。鉴于此，我们建立了金丝桃素提取工艺研究方法，以期为今后金丝桃素的研究奠定基础。
1.2 贯叶连翘的研究现状
贯叶连翘在德国作为民间的草药在治疗创伤、抗抑郁、治疗风湿痛风等已经有上千年的历史，是国际医药市场上最重要的抗抑郁植物制剂原料。近年来，贯叶连翘的研究主要集中于贯叶连翘提取物在药理作用的方面和化学成分的分析方面，随着研究的深入，越来越多的文献报道贯叶连翘提取物对多种疾病具有治疗作用，使其在中药研究领域受到强烈的关注，综合学者的研究成果，贯叶连翘还需要加强在其延缓衰老及抗肿瘤作用机理的研究、与其他药物联用副作用的研究、资源保护及生物技术的应用等方面[1]。
传统中医认为贯叶连翘其气微，味微苦涩；可舒肝解郁；清热利湿；消肿止痛还具有清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎的功效。
现代药理研究表明：贯叶连翘具有抗抑郁、抗病毒、抗菌、镇痛等作用。上世纪80年代后期，由于植物体内的化合物金丝桃素(hypericin)具有显著的抗DNA、RNA病毒繁殖作用而引起人们的广泛关注。目前，金丝桃素已作为主要治疗抑郁症、甲型肝炎、乙型肝炎及艾滋病的药物在德国、英国等国家上市，金丝桃素的多种药理作用，使其成为当前国际研究、开发的重点课题之一。目前关于金丝桃素的研究，国内多处于药理临床研究阶段，主要集中于肿瘤的辅助治疗和抗病毒研究方面，国外现已将其用于抑郁症、艾滋病等的临床治疗。鉴于金丝桃素突出的抗病毒作用，以及作为癌症的光化学治疗的一种有前途的内源性光敏剂，贯叶连翘在我国作为一种新发现的中药材品种，还未载入任何形式的法定质量标准。目前我国对贯叶连翘的研究还处在较低的水平，其提取物中金丝桃素等有效成分的含量偏低，不利于其研究和开发。贯叶连翘提取物及其制剂的研究，不但涉及重大疾病的治疗，而且还与现代重大社会问题有关，在我国具有巨大的现实市场和潜在市场。因此，对贯叶连翘中有效成分的研究还是很有必要的。
1.3 贯叶连翘化学成分
贯叶连翘中含有多种化学成分，通过药理实验研究表明其中的多种化学成分具有一定的生物活性，贯叶连翘中的不同生物活性成分具有不同的药理作用，各成分相互之间发挥协同作用从而用于不同疾病的治疗。
贯叶连翘中多种具有天然生物活性成分的化合物已被鉴定，以金丝桃素和伪金丝桃素为主，新鲜植物中含的原金丝桃素和原伪金丝桃素在阳光下可分别转化为金丝桃素和伪金丝桃素。依据学者研究可将贯叶连翘的化学成分概括为以下四部分:
1.3.1 苯并二蒽酮类
苯并二蒽酮类主要包括金丝桃素（hypericin）和伪金丝桃素(pseudohypericin)和一些前 体物质，如原金丝桃素（protohypericin），原伪金丝桃素（protopseudohypericin）。其中金丝桃素和伪金丝桃素是金丝桃属植物的特征成分，主要存在于花和芽中，在贯叶连翘中的含量一般为万分之几。伪金丝桃素的含量是金丝桃素的2－4倍
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