柿叶多糖的提取工艺研究(附件)
摘 要目的：研究柿叶多糖的热水浸提法提取工艺，为柿叶中多糖类化合物的开发利用提供理论依据。方法：以柿叶多糖的得率为指标，在单因素试验基础上设计正交试验，对柿叶多糖的热水浸提法提取工艺条件进行优化。结果：柿叶多糖的热水浸提法最佳工艺为：粉末过4号筛网、浸提温度为100℃、料液比为1:30、浸提时间为2h；提取2次，其最佳工艺多糖得率为10.9%。目 录
1 柿叶多糖的研究概况
1.1 柿叶多糖的药理作用 1
1.1.1 对心脑血管系统的作用 1
1.1.2 止血作用 1
1.1.3 降血脂作用 2
1.1.4 抗衰老作用 2
1.1.5 抗肿瘤作用 2
1.1.6 调节免疫功能 2
1.1.7 运动机能的作用 3
1.2 柿叶多糖的提取工艺 3
1.2.1 热水提取法 3
1.2.2 碱液提取法 4
1.2.3 酶提取法 4
1.2.4 超声波酶提取法 5
1.2.5 微波提取法 5
1.2.6 复合及其它提取法 5
1.3 柿叶多糖的研究背景 5
1.4 柿叶多糖的研究意义 5
1.5 柿叶多糖的发展前景 6
2 柿叶多糖的提取工艺研究
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 试验方法与内容 7
2.2.1 柿叶多糖的提取工艺流程 7
2.2.2 溶液的配置 7
2.2.3 测定方法 7
2.2.4 标准曲线的绘制 8
2.3 单因素试验 9
2.3.1 不同柿叶粉末粒度对多糖得率的影响 9
2.3.2 不同浸提温度对柿叶多糖得率的影响 11
2.3.3 提取时间对多糖提取率的影响 11
2.3.4 不同料液比对多糖提取率的影响 12
2.3.5 不同提取次数对多糖提取率的影响 13
2.3 正交试验设计 14
2.4 最优提取
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
素试验 9
2.3.1 不同柿叶粉末粒度对多糖得率的影响 9
2.3.2 不同浸提温度对柿叶多糖得率的影响 11
2.3.3 提取时间对多糖提取率的影响 11
2.3.4 不同料液比对多糖提取率的影响 12
2.3.5 不同提取次数对多糖提取率的影响 13
2.3 正交试验设计 14
2.4 最优提取工艺验证 15
2.5 小结 15
参考文献 16
致谢 18
1柿叶多糖的研究概况
柿子树多为栽培种，为落叶大乔木，大多数种植在河北、山西、陕西、华东、中南及辽宁、甘肃、台湾等地。树高14m左右，颜色为深灰色至灰黑色，树皮为长方块状开裂；树枝开展，深棕色的皮孔，刚开始萌芽的树叶有柔毛，单叶互生而长，叶片的形状为卵状椭圆形至倒卵形或近圆形，先端渐尖或钝，全缘，基部阔楔形，主脉生柔毛，有短柔毛，沿脉密被褐色绒毛，上面深绿色，下面淡绿色。浆果形状多为卵圆球形，橙黄色或鲜黄色，基部有宿存柿蒂。种子为褐色，椭圆形。花期在5月份，果期910月份[1]。
柿叶为我国传统中药材，柿叶的主要成分包括有机酸类、黄酮类、三萜类、多酚类、挥发性成分、脂肪酸、香豆素类、植物甾醇、多糖以及胡萝卜素等[2]。综合上述内容,傅建敏等[3]认为今后应加强不同种类柿资源叶片有效成分含量的遗传变异和时空变化等应用基础研究,并在此基础上培育有效成分含量高的叶用柿良种及原料林,从而为相关产业的可持续发展提供技术支撑和资源保障，满足现代化生物医药的发展需求。
现就近年来柿叶多糖的药理作用和提取工艺等方面的研究概况总结如下:
1.1柿叶多糖的药理作用
1.1.1对心脑血管系统的作用
柿叶醇提取物能增加麻醉狗心输出量、心脏指数和心搏指数，使心率明显减慢，柿叶醇提取物使麻醉狗心脏负荷减少，总外周血管阻力和血压明显下降、冠脉流量明显增加，分钟张力时间指数降低、心脏每分钟的耗氧量下降[4]。研究员在研究心脑血管系统疾病时，注射柿叶多糖到体蛙与兔心的体内，发现其能增加两者之间的冠状动脉的血流量，为了实验的严谨性，再次注射柿叶多糖到小老鼠和狗体内时，其冠状动脉血循环也得以增加。因此，经实验验证柿叶多糖对心脑血管具有明显作用。
1.1.2止血作用
董长宏等[5]人研究认为，柿叶多糖具有活血止血作用，柿叶能使小鼠出血时间缩短44.7%，凝血时间缩短34.3%，用药4d后小鼠出血时间缩短62.5%凝血时间缩短70%。
1.1.3降血脂作用
柿叶多糖具有降血脂的作用，经常在临床上治疗高血脂和一些心脑血管疾病。于国萍等[6]证明了柿叶多糖有明显的降血脂作用。研究了甘油三酯、总胆固醇、低高密度脂蛋白通过高脂小鼠模型用不同的浓度看对其的影响。实验说明，多糖组小鼠血清（甘油三酯、总胆固醇、低高密度脂）比高脂组的低，但高密度脂蛋白比高脂组的显高，表明柿叶多糖具有降血脂的作用。唐娟等[7]用糖尿病和正常的小鼠做实验主要研究柿叶多糖具有降血糖的功能，用小鼠为110,210,410mg/kg。结论；质量分数为200mg/kg上的血糖值下降，对正常的小鼠无影响。
1.1.4抗衰老作用
据报道柿叶多糖能使果蝇寿命增长，使小鼠在缺氧时间存活长[8]。实验证明，柿叶多糖可降低衰老心肌比模型组，增加脑和肝中SOD活力；能过抑制组织活性，同时可增加果蝇的飞翔能力[9]。
史亚丽等[10]建立的模型小鼠（负重游泳）研究粗多糖的抗衰老，建立小鼠模型组后，使血浆中的酶活性下降，肝脏和心肌等组织内超氧化物歧化酶活性提高。说明柿叶的多糖能升高超氧化物歧化酶的活性，说明具有抗衰老的作用。检测结果表明AAPIIa具有抗衰老作用机制可使胸腺细胞周期改变，对其凋亡有抑制作用，使死亡率减少[9]。药物浓度范围在200600ug/mL时给药柿叶中性多糖和柿叶酸性多糖的细胞细胞存活率均为50%。在柿叶中性和酸性的多糖的条件下，细胞的活下机率为51%在药材的浓度210600ug/mL情况下[10]。
1.1.5 抗肿瘤作用
柿叶多糖的抗肿
1 柿叶多糖的研究概况
1.1 柿叶多糖的药理作用 1
1.1.1 对心脑血管系统的作用 1
1.1.2 止血作用 1
1.1.3 降血脂作用 2
1.1.4 抗衰老作用 2
1.1.5 抗肿瘤作用 2
1.1.6 调节免疫功能 2
1.1.7 运动机能的作用 3
1.2 柿叶多糖的提取工艺 3
1.2.1 热水提取法 3
1.2.2 碱液提取法 4
1.2.3 酶提取法 4
1.2.4 超声波酶提取法 5
1.2.5 微波提取法 5
1.2.6 复合及其它提取法 5
1.3 柿叶多糖的研究背景 5
1.4 柿叶多糖的研究意义 5
1.5 柿叶多糖的发展前景 6
2 柿叶多糖的提取工艺研究
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 试验方法与内容 7
2.2.1 柿叶多糖的提取工艺流程 7
2.2.2 溶液的配置 7
2.2.3 测定方法 7
2.2.4 标准曲线的绘制 8
2.3 单因素试验 9
2.3.1 不同柿叶粉末粒度对多糖得率的影响 9
2.3.2 不同浸提温度对柿叶多糖得率的影响 11
2.3.3 提取时间对多糖提取率的影响 11
2.3.4 不同料液比对多糖提取率的影响 12
2.3.5 不同提取次数对多糖提取率的影响 13
2.3 正交试验设计 14
2.4 最优提取
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
素试验 9
2.3.1 不同柿叶粉末粒度对多糖得率的影响 9
2.3.2 不同浸提温度对柿叶多糖得率的影响 11
2.3.3 提取时间对多糖提取率的影响 11
2.3.4 不同料液比对多糖提取率的影响 12
2.3.5 不同提取次数对多糖提取率的影响 13
2.3 正交试验设计 14
2.4 最优提取工艺验证 15
2.5 小结 15
参考文献 16
致谢 18
1柿叶多糖的研究概况
柿子树多为栽培种，为落叶大乔木，大多数种植在河北、山西、陕西、华东、中南及辽宁、甘肃、台湾等地。树高14m左右，颜色为深灰色至灰黑色，树皮为长方块状开裂；树枝开展，深棕色的皮孔，刚开始萌芽的树叶有柔毛，单叶互生而长，叶片的形状为卵状椭圆形至倒卵形或近圆形，先端渐尖或钝，全缘，基部阔楔形，主脉生柔毛，有短柔毛，沿脉密被褐色绒毛，上面深绿色，下面淡绿色。浆果形状多为卵圆球形，橙黄色或鲜黄色，基部有宿存柿蒂。种子为褐色，椭圆形。花期在5月份，果期910月份[1]。
柿叶为我国传统中药材，柿叶的主要成分包括有机酸类、黄酮类、三萜类、多酚类、挥发性成分、脂肪酸、香豆素类、植物甾醇、多糖以及胡萝卜素等[2]。综合上述内容,傅建敏等[3]认为今后应加强不同种类柿资源叶片有效成分含量的遗传变异和时空变化等应用基础研究,并在此基础上培育有效成分含量高的叶用柿良种及原料林,从而为相关产业的可持续发展提供技术支撑和资源保障，满足现代化生物医药的发展需求。
现就近年来柿叶多糖的药理作用和提取工艺等方面的研究概况总结如下:
1.1柿叶多糖的药理作用
1.1.1对心脑血管系统的作用
柿叶醇提取物能增加麻醉狗心输出量、心脏指数和心搏指数，使心率明显减慢，柿叶醇提取物使麻醉狗心脏负荷减少，总外周血管阻力和血压明显下降、冠脉流量明显增加，分钟张力时间指数降低、心脏每分钟的耗氧量下降[4]。研究员在研究心脑血管系统疾病时，注射柿叶多糖到体蛙与兔心的体内，发现其能增加两者之间的冠状动脉的血流量，为了实验的严谨性，再次注射柿叶多糖到小老鼠和狗体内时，其冠状动脉血循环也得以增加。因此，经实验验证柿叶多糖对心脑血管具有明显作用。
1.1.2止血作用
董长宏等[5]人研究认为，柿叶多糖具有活血止血作用，柿叶能使小鼠出血时间缩短44.7%，凝血时间缩短34.3%，用药4d后小鼠出血时间缩短62.5%凝血时间缩短70%。
1.1.3降血脂作用
柿叶多糖具有降血脂的作用，经常在临床上治疗高血脂和一些心脑血管疾病。于国萍等[6]证明了柿叶多糖有明显的降血脂作用。研究了甘油三酯、总胆固醇、低高密度脂蛋白通过高脂小鼠模型用不同的浓度看对其的影响。实验说明，多糖组小鼠血清（甘油三酯、总胆固醇、低高密度脂）比高脂组的低，但高密度脂蛋白比高脂组的显高，表明柿叶多糖具有降血脂的作用。唐娟等[7]用糖尿病和正常的小鼠做实验主要研究柿叶多糖具有降血糖的功能，用小鼠为110,210,410mg/kg。结论；质量分数为200mg/kg上的血糖值下降，对正常的小鼠无影响。
1.1.4抗衰老作用
据报道柿叶多糖能使果蝇寿命增长，使小鼠在缺氧时间存活长[8]。实验证明，柿叶多糖可降低衰老心肌比模型组，增加脑和肝中SOD活力；能过抑制组织活性，同时可增加果蝇的飞翔能力[9]。
史亚丽等[10]建立的模型小鼠（负重游泳）研究粗多糖的抗衰老，建立小鼠模型组后，使血浆中的酶活性下降，肝脏和心肌等组织内超氧化物歧化酶活性提高。说明柿叶的多糖能升高超氧化物歧化酶的活性，说明具有抗衰老的作用。检测结果表明AAPIIa具有抗衰老作用机制可使胸腺细胞周期改变，对其凋亡有抑制作用，使死亡率减少[9]。药物浓度范围在200600ug/mL时给药柿叶中性多糖和柿叶酸性多糖的细胞细胞存活率均为50%。在柿叶中性和酸性的多糖的条件下，细胞的活下机率为51%在药材的浓度210600ug/mL情况下[10]。
1.1.5 抗肿瘤作用
柿叶多糖的抗肿
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