贯叶连翘挥发性成分的提取工艺及抑菌活性研究(附件)

摘 要本研究采用水蒸气蒸馏法对陕产贯叶连翘中挥发性成分进行提取,在单因素实验的基础上,采用正交实验法对影响挥发油提取率的因素进行考察,获取最优的提取条件为:浸泡时间为16小时,提取时间为16小时,物料比为1:8,提取温度为110℃。抑菌实验表明,陕产贯叶连翘中挥发油对黑曲霉、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌均具有明显的抑制作用。目 录
1 前言
1.1 贯叶连翘的简介 1
1.2 贯叶连翘的研究进展 1
1.3 贯叶连翘化学成分 1
1.3.1 双蒽酮化合物 1
1.3.2 黄酮化合物 2
1.3.3 挥发性成分 2
1.3.4 其他成分 2
1.4 贯叶连翘的药理作用 2
1.4.1 抑菌作用 2
1.4.2 抗抑郁 3
1.4.3 抗病毒 3
1.4.4 抗肿瘤 3
1.4.5 其他作用 4
1.5 挥发性成分性质 4
1.6 挥发性成分的药理作用 4
1.7 课题研究意义 5
2挥发性成分的提取及抑菌活性研究
2.1 实验材料与仪器 6
2.1.1 主要材料与试剂 6
2.1.2 仪器与设备 6
2.2 贯叶连翘挥发性成分的提取 6
2.2.1 实验原理 6
2.2.2 挥发性成分的提取 6
2.2.3 不同因素对挥发性成分提取效果的影响 6
2.2.4 正交实验 7
2.3 抑菌活性的研究 7
2.4 实验结果与分析 8
2.4.1 单因素实验结果 8
2.4.2 正交实验结果 10
2.4.3 抑菌实验结果 12
结论 13
参考文献 15
致谢 17
1 前言
1.1 贯叶连翘的简介
贯叶连翘又名叫小对叶草,属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物,以植物的全草入药,它的味辛、苦、性平,可以清热凉血,调经解毒。贯叶连翘除了作为传统中药材入药
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/> 2.4.2 正交实验结果 10
2.4.3 抑菌实验结果 12
结论 13
参考文献 15
致谢 17
1 前言
1.1 贯叶连翘的简介
贯叶连翘又名叫小对叶草,属于藤黄科金丝桃属多年生的草本植物,以植物的全草入药,它的味辛、苦、性平,可以清热凉血,调经解毒。贯叶连翘除了作为传统中药材入药以外,近年来的研究发现它还具有多种药理作用,如在治疗创伤、抗抑郁、抗肿瘤、抗炎、止咳、镇痛等方面都有着显著地效果。贯叶连翘的多种化学成分都具有较强的生物活性,如金丝桃素、贯叶金丝桃素、金丝桃苷、总黄酮、挥发性成分等,各化学成分之间相互协调作用,使得贯叶连翘的运用越来越广泛。随着对贯叶连翘的深入研究,其在临床上已经得到广泛的应用,因而贯叶连翘成为近年来全球最畅销的药草之一。
1.2 贯叶连翘的研究进展
贯叶连翘在德国作为民间的草药在治疗创伤、抗抑郁、治疗风湿痛风等已经有上千年的历史,是国际医药市场上最重要的抗抑郁植物制剂原料。随着研究的深入,越来越多的文献报道贯叶连翘提取物对多种疾病具有治疗作用,使其在中药研究领域受到强烈的关注,贯叶连翘在其延缓衰老及抗肿瘤作用机理的研究、与其他药物联用副作用的研究、资源保护及生物技术的应用[1]已起到积极的作用。近年来,贯叶连翘的研究主要集中于贯叶连翘提取物的药理作用和化学成分的分析,而有关挥发性成分的提取和抑菌活性方面的研究方面的报道相对较少。因此,本研究对贯叶连翘挥发性成分进行相关研究。
1.3 贯叶连翘化学成分
1.3.1 双蒽酮化合物
贯叶连翘双蒽酮化合物中主要成分是金丝桃素和贯叶金丝桃素,两种化学成分之间相互协同作用,在抗抑郁、抗病毒、抗炎等方面有着很好的临床作用。目前的研究认为贯叶连翘中的金丝桃素和贯叶金丝桃素是抗抑郁的关键成分[2],实验表明它们可以通过抑制单胺氧化酶和抑制单胺类神经递质的摄取而发挥抗抑郁作用[3]。金丝桃素和贯叶金丝桃素在抗病毒方面的作用范围也是很广泛的,通过体外实验发现对单纯疱疹病毒、副流感病毒、牛痘病毒、疱疹口炎病毒、莫洛尼鼠白血病病毒、鼠巨噬细胞病毒、辛德比病毒等均有杀灭和抑制作用[4],对人巨噬细胞也有抑制作用[5]。
1.3.2 黄酮化合物
黄酮类化合物成分主要有金丝桃甙、芸香甙、槲皮甙、异槲皮甙及槲皮素等。槲皮素会对多种导致癌细胞产生或者是促进癌细胞生长的化学制剂产生拮抗作用[6],还可以抑制多种恶性肿瘤细胞的生长和转移[7]。贯叶连翘中贯叶金丝桃素和黄酮类物质在抗肿瘤中互相协调、疗效显著。由于贯叶连翘具有低毒素、资源丰富等特征,使贯叶连翘有望开发成一种新型的抗肿瘤药物[8]。
1.3.3 挥发性成分
挥发性成分中主要含有多种萜类化合物,它们均具有高沸点、易氧化、多同分异构体的性质[9]。有研究报道,贯叶连翘挥发性成分对革兰氏阳性菌的大部分菌体具有抑菌和杀菌作用,对少部分革兰氏阴性菌具有抑制作用。国外研究报道贯叶连翘的挥发性成分对真菌也有一定的抑制作用[10]。研究发现贯叶连翘提取物可对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌以及酿酒酵母菌等均有明显的抗菌作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌和杀菌作用效果最强[11],这可能与贯叶连翘地上部分组成挥发油的主要成分有关。为了促进贯叶连翘的进一步发展研究,对陕产贯叶连翘中的挥发性成分进行研究,发挥着举足轻重的作用。
1.3.4 其他成分
贯叶连翘中还含有大黄素蒽酚咖啡酸、绿原酸、胆碱、菸酸、β谷甾醇、无色花青素、胡萝卜素、维生素C及鞣质等[12]。
1.4 贯叶连翘的药理作用
贯叶连翘全草具有收敛作用、抗菌作用和止血作用。全草浸剂或者是提取物对动物毒副作用很小,通过静脉注射具有加强心脏活动,收缩血管,升高血压,利胆等[13]作用。
1.4.1 抑菌作用
贯叶连翘的醇提取物对大部分革兰氏阳性菌具有抗菌效力,对少部分革兰氏阴性菌也有一定的抑菌能力。据报道抗菌的有效成分是两种高度不饱和的树脂(贯叶连翘树脂Ⅰ及Ⅱ),对枯草杆菌、溶血性链球菌、肠球菌等均有作用;果实中含的有效成分较多,种子中的含量较少。根部、花有抗结核杆菌的作用。对贯叶连翘提取物进行抑菌活性的研究,实验表明,光照处理后的贯叶连翘提取物对黄色短杆菌的最小杀菌浓度是0.295mg/ mL,没有经过光照处理的最小杀菌浓度是0.270mg/ mL。各项检测都表明,贯叶连翘提取物对黄色短杆菌的抑菌作用和杀菌作用都依赖其浓度,浓度较低时具有抑菌作用,浓度较高时具有杀菌作用[14]。贯叶连翘提取物对金黄色葡萄球菌也有抑菌作用和杀菌作用,而且其抑菌和杀菌的作用效果与浓度有关,与光照无关。最小杀菌浓度为0.475mg/mL[15]。贯叶连翘提取物经过光照处理后

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