超声辅助提取瞿麦中黄酮的工艺研究(附件)
摘 要本实验通过超声辅助法以瞿麦为原料，乙醇为提取剂，在单因素实验的基础上，通过响应面实验对超声辅助法提取瞿麦中总黄酮的工艺进行优化。其最佳工艺条件为料液比10.47倍、提取功率134.80W、乙醇浓度95%时，黄酮的提取率最大可以达到0.849%。
目 录
1绪论 1
1.1 研究目的和意义 1
1.2 瞿麦的概述 1
1.2.1瞿麦的形态特征 1
1.2.2瞿麦的生物学物学特征 2
1.3黄酮的提取方法 2
1.3.1乙醇回流提取法 2
1.3.2微波提取法 2
1.3.3酶法提取 3
1.3.4超临界流体萃取法 3
1.3.5超声波提取法 3
1.4黄酮类化合物的药理作用 4
1.4.1免疫调节作用 4
1.4.2抗氧化作用 4
1.4.3减轻血管内皮单层通透性增加作用 4
1.4.4抗病毒作用 4
1.4.5 抗癌抗肿瘤的作用 5
1.4.6止咳祛痰作用 5
1.4.7其他作用 5
2 实验部分 6
2.1 实验材料与仪器 6
2.2 标准溶剂的配制 7
2.2.1 试剂配制 7
2.2.2对照品溶液的制备 7
2.2.3供试品溶液的制备 7
2.2.4波长的选择 7 2.2.5 标准曲线的绘制 7
2.3方法学考察 8
2.3.1精密度试验 8
2.3.2稳定性试验 8
2.3.3重复性试验 8
2.4提取工艺流程 8
2.5单因素实验 8
2.5.1乙醇浓度对黄酮提取率的影响 8
2.5.2料液比对黄酮提取率的影响 8
2.5.3超声功率对黄酮提取率的影响 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
8
2.6响应曲面实验设计 8
2.7瞿麦中黄酮的得率计算 9
3 实验结果与分析 10
3.1 芦丁标准曲线的绘制 10
3.2精密度试验 10
3.3稳定性试验 10
3.4重复性试验 11
3.5 单因素试验结果 11
3.5.1乙醇浓度对黄酮提取率的影响 11
3.5.2料液比对黄酮提取率的影响 12
3.5.3超声功率对黄酮提取率的影响 12
3.6响应面试验及结果分析 13
3.6.1响应曲面法 13
3.6.2因素水平表设计 13
3.6.3回归模型方程 14
3.6.4各因素对提取率影响的响应面图 15
3.7 响应面试验结果验证 17
结语 18
参考文献 19
致谢 21
1绪论
1.1 研究目的和意义
本实验立足于对瞿麦研究的同时，以瞿麦黄酮得率为指标，通过响应面试验，优选最佳的提高瞿麦中黄酮产率的方案，因此提高瞿麦中黄酮的提取率。
瞿麦，又名野麦、石柱花、十样景花、巨句麦等,收载于2010年版《中国药典》[1]一部，是我国常用的传统中药，为石竹科石竹属植物瞿麦 Dianthus superbus L.的干燥地上部分。多生于海拔4003700米丘陵山地疏林下、林缘、草甸、沟谷溪边。产自中国、北欧、日本、西伯利亚、朝鲜和蒙古（西部和北部）。在我国主产于东北、华北、西北（如：陕西的太白山。）地区。瞿麦在历版中国药典中均有收载，它既可用于园林观赏，也可药用。性味苦、寒；归心经、小肠经、膀胱经。主治小便不通、热淋、血淋、砂石淋、目赤肿痛、经闭等症。在《本草经疏》等中医古籍文献中也记载瞿麦具有破血下胎、破胎堕子的功效[2]。药理作用方面：现代药理学的研究表明，瞿麦的药理作用很多，包括抗肿瘤作用、利尿作用、兴奋子宫作用、抗菌作用、免疫调节作用、抗氧化作用、溶血作用和其他作用。其主要成分有皂苷类、环肽类、黄酮类、蒽醌类、有机酸类、挥发油类、生物碱类、维生素、色素及多糖等。
利用数据资料库查阅文献，通过比较研究方法来看，本课题选用超声辅助提取瞿麦中黄酮的提取工艺进行优化研究，通过对乙醇浓度、料液比、超声功率这几个因素进行单因素实验，运用 DesignExpert 软件进行 BoxBehnken 响应面实验设计，优选出最佳工艺条件。
1.2 瞿麦的概述
1.2.1 瞿麦的形态特征
瞿麦为石竹科，是多年生草本植物。生于海拔4003700米丘陵山地疏林下、林缘、草甸、沟谷溪边。产自中国、北欧、日本、西伯利亚、朝鲜和蒙古（西部和北部）。在我国主产于东北、华北、西北（如：陕西的太白山。）地区。采摘最佳时间为夏季和秋季。一般情况下首先除去杂质，然后晒干。最后切段，备用。茎呈圆柱形，上部有分枝，长3060厘米，其茎的外貌出现淡绿色或者是黄绿色，无毛，其茎节略膨大，茎内中空，种子细小，味淡。叶呈条形至条状披针形，枝端具花及果实，花萼筒状，长2.73.7厘米。花瓣呈丝状，其花瓣呈棕紫色或棕黄色。苏果呈长筒形，种子微小，多半无臭，味淡。
1.2.2 瞿麦的生物学物学特征
叶：表皮有稀疏的角质条纹，气孔略下陷，多数直轴式，少数为不等式或不定式。瞿麦叶的上表皮细胞为多角形，下表皮细胞为长方形，非腺毛少见，为2个细胞组成，先端尖。
茎：表皮细胞呈长方形，垂周壁连珠状增厚，成直轴式气孔。螺纹导管比较多，也有环纹，梯纹，都具缘孔纹，网纹导管。
花萼:下表皮面观呈类方形，垂周壁稍弯曲或者平直连珠状增厚，呈现细密弯曲的角质线纹。草酸钙簇晶较多，纤维散在或成束。
花粉:花粉粒呈现圆球形，具散孔，孔数1017，表面有网状皱纹。粉末呈黄绿色或者黄棕色。
目 录
1绪论 1
1.1 研究目的和意义 1
1.2 瞿麦的概述 1
1.2.1瞿麦的形态特征 1
1.2.2瞿麦的生物学物学特征 2
1.3黄酮的提取方法 2
1.3.1乙醇回流提取法 2
1.3.2微波提取法 2
1.3.3酶法提取 3
1.3.4超临界流体萃取法 3
1.3.5超声波提取法 3
1.4黄酮类化合物的药理作用 4
1.4.1免疫调节作用 4
1.4.2抗氧化作用 4
1.4.3减轻血管内皮单层通透性增加作用 4
1.4.4抗病毒作用 4
1.4.5 抗癌抗肿瘤的作用 5
1.4.6止咳祛痰作用 5
1.4.7其他作用 5
2 实验部分 6
2.1 实验材料与仪器 6
2.2 标准溶剂的配制 7
2.2.1 试剂配制 7
2.2.2对照品溶液的制备 7
2.2.3供试品溶液的制备 7
2.2.4波长的选择 7 2.2.5 标准曲线的绘制 7
2.3方法学考察 8
2.3.1精密度试验 8
2.3.2稳定性试验 8
2.3.3重复性试验 8
2.4提取工艺流程 8
2.5单因素实验 8
2.5.1乙醇浓度对黄酮提取率的影响 8
2.5.2料液比对黄酮提取率的影响 8
2.5.3超声功率对黄酮提取率的影响 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
8
2.6响应曲面实验设计 8
2.7瞿麦中黄酮的得率计算 9
3 实验结果与分析 10
3.1 芦丁标准曲线的绘制 10
3.2精密度试验 10
3.3稳定性试验 10
3.4重复性试验 11
3.5 单因素试验结果 11
3.5.1乙醇浓度对黄酮提取率的影响 11
3.5.2料液比对黄酮提取率的影响 12
3.5.3超声功率对黄酮提取率的影响 12
3.6响应面试验及结果分析 13
3.6.1响应曲面法 13
3.6.2因素水平表设计 13
3.6.3回归模型方程 14
3.6.4各因素对提取率影响的响应面图 15
3.7 响应面试验结果验证 17
结语 18
参考文献 19
致谢 21
1绪论
1.1 研究目的和意义
本实验立足于对瞿麦研究的同时，以瞿麦黄酮得率为指标，通过响应面试验，优选最佳的提高瞿麦中黄酮产率的方案，因此提高瞿麦中黄酮的提取率。
瞿麦，又名野麦、石柱花、十样景花、巨句麦等,收载于2010年版《中国药典》[1]一部，是我国常用的传统中药，为石竹科石竹属植物瞿麦 Dianthus superbus L.的干燥地上部分。多生于海拔4003700米丘陵山地疏林下、林缘、草甸、沟谷溪边。产自中国、北欧、日本、西伯利亚、朝鲜和蒙古（西部和北部）。在我国主产于东北、华北、西北（如：陕西的太白山。）地区。瞿麦在历版中国药典中均有收载，它既可用于园林观赏，也可药用。性味苦、寒；归心经、小肠经、膀胱经。主治小便不通、热淋、血淋、砂石淋、目赤肿痛、经闭等症。在《本草经疏》等中医古籍文献中也记载瞿麦具有破血下胎、破胎堕子的功效[2]。药理作用方面：现代药理学的研究表明，瞿麦的药理作用很多，包括抗肿瘤作用、利尿作用、兴奋子宫作用、抗菌作用、免疫调节作用、抗氧化作用、溶血作用和其他作用。其主要成分有皂苷类、环肽类、黄酮类、蒽醌类、有机酸类、挥发油类、生物碱类、维生素、色素及多糖等。
利用数据资料库查阅文献，通过比较研究方法来看，本课题选用超声辅助提取瞿麦中黄酮的提取工艺进行优化研究，通过对乙醇浓度、料液比、超声功率这几个因素进行单因素实验，运用 DesignExpert 软件进行 BoxBehnken 响应面实验设计，优选出最佳工艺条件。
1.2 瞿麦的概述
1.2.1 瞿麦的形态特征
瞿麦为石竹科，是多年生草本植物。生于海拔4003700米丘陵山地疏林下、林缘、草甸、沟谷溪边。产自中国、北欧、日本、西伯利亚、朝鲜和蒙古（西部和北部）。在我国主产于东北、华北、西北（如：陕西的太白山。）地区。采摘最佳时间为夏季和秋季。一般情况下首先除去杂质，然后晒干。最后切段，备用。茎呈圆柱形，上部有分枝，长3060厘米，其茎的外貌出现淡绿色或者是黄绿色，无毛，其茎节略膨大，茎内中空，种子细小，味淡。叶呈条形至条状披针形，枝端具花及果实，花萼筒状，长2.73.7厘米。花瓣呈丝状，其花瓣呈棕紫色或棕黄色。苏果呈长筒形，种子微小，多半无臭，味淡。
1.2.2 瞿麦的生物学物学特征
叶：表皮有稀疏的角质条纹，气孔略下陷，多数直轴式，少数为不等式或不定式。瞿麦叶的上表皮细胞为多角形，下表皮细胞为长方形，非腺毛少见，为2个细胞组成，先端尖。
茎：表皮细胞呈长方形，垂周壁连珠状增厚，成直轴式气孔。螺纹导管比较多，也有环纹，梯纹，都具缘孔纹，网纹导管。
花萼:下表皮面观呈类方形，垂周壁稍弯曲或者平直连珠状增厚，呈现细密弯曲的角质线纹。草酸钙簇晶较多，纤维散在或成束。
花粉:花粉粒呈现圆球形，具散孔，孔数1017，表面有网状皱纹。粉末呈黄绿色或者黄棕色。
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