猪圆环病毒2型的分离与鉴定(附件)

为获得猪圆环病毒2型（PCV2）病毒分离株，本研究对江苏省某猪场采集的疑似PCV2阳性病料进行鉴定。将鉴定为PCV2阳性的病料处理后接种猪肾细胞（PK-15），连续盲传20代；通过PCR、荧光定量PCR和间接免疫荧光的方法对分离毒株进行鉴定，并进行TCID50测定。结果表明，猪场病料为PCV2阳性；分离到一株PCV2分离株，该毒株在PK-15细胞上至少可以稳定传代20代，第20代的TCID50为10-4.29/0.1ml。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1材料 4
1.2方法 4
1.2.1引物的设计与合成4
1.2.2病料的处理4
1.2.3病料PCV2的DNA的提取4
1.2.4病料PCV2的普通PCR的鉴定5
1.2.5病料PCV2的分离培养5
1.2.6 PCV2分离株普通PCR的鉴定5
1.2.7 PCV2分离株荧光定量PCR的鉴定5
1.2.8 PCV2分离株间接免疫荧光的测定5
1.2.9 PCV2分离株TCID50的测定6
2 结果与分析6
2.1病料PCV2的普通PCR的鉴定结果6
2.2 PCV2分离株普通PCR的鉴定结果7
2.3 PCV2分离株荧光定量PCR的鉴定结果7
2.3.1荧光定量PCR的标准曲线7
2.3.2 PCV2分离株的Ct值7
2.4 PCV2分离株间接免疫荧光测定的结果8
2.5 PCV2分离株TCID50测定的结果8
3 讨论9
致谢10
参考文献11
猪圆环病毒2型的分离与鉴定

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