亮氨酸对iugr及正常断奶仔猪肠道绒毛形态及二糖酶活性的影响
子宫内发育迟缓(IUGR)对胎儿生理机能和后期代谢产生深远影响,在猪生产上IUGR发生率和死亡率高 ,对养猪生产效益影响巨大。本试验旨在研究亮氨酸对IUGR及正常断奶仔猪肠道绒毛形态及二塘酶活性的影响。本研究选用新生IUGR仔猪和正常体重仔猪，14日龄断奶，各分两组，分别饲喂基础日粮和添加了0.35%的亮氨酸的基础日粮，35日龄屠宰取样。结果表明（1）与正常组相比，IUGR组断奶仔猪的肠道绒毛高度、绒毛宽度、绒毛面积显著减小（P<0.05），隐窝深度显著增加（P<0.05）；日粮中添加亮氨酸可增加绒毛高度、绒毛宽度、绒毛面积，降低隐窝深度。（2）与正常组相比，IUGR组断奶仔猪麦芽糖酶、蔗糖酶活性提高，乳糖酶活性降低；日粮中添加亮氨酸可以提高小肠中三种二糖酶的活性（P<0.01），变化极显著。综上所述，日粮中添加亮氨酸对IUGR断奶仔猪肠道形态及功能具有改善作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1.材料与方法2
1.1试验材料 2
1.2饲养管理 2
1.3样品采集 2
1.4测定指标与方法 2
1.4.1肠道形态学测定 2
1.4.2二糖酶测定 3
1.5数据处理 3
结果分析3
2.1生产性能分析 3
2.2肠绒毛形态分析 4
2.3肠道二糖酶活性分析 5
3.讨论6
4.小结7
致谢7
参考文献7
亮氨酸对IUGR及正常断奶仔猪肠道绒毛形态及二糖酶活性的影响
引言
引言：IUGR（Intrauterine growth retardation）又称为子宫内生长阻滞，是胎儿在母体子宫内发育障碍的总称，表现为生长上没有达到遗传潜能，出生时低体重或极低体重；各组织器官生长发育受损，在猪生产中发生率约为15%20%[1,2]。生产上通常将初生重小于1.1 kg的新生仔猪定义为IUGR仔猪，而正常初生重仔猪初生重大于1.4 kg。
肠道是营养 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
物质消化和吸收的重要场所，也是营养物质代谢的重要器官。仔猪新生期是肠道发育的重要阶段，小肠生长速度比体内其它器官快[3]。IUGR会导致仔猪胃肠道重量减轻，绒毛萎缩和黏膜损伤,降低肠道对营养物质的消化吸收以及仔猪的存活率[49]。养猪生产中仔猪早期断奶和IUGR均可导致肠道黏膜发育受损,引起肠道功能紊乱综合症,致使仔猪腹泻、死亡，后期生长缓慢、饲料利用率低等[2,1012]。因此，生产中需采取措施来加快新生仔猪胃肠道的发育，减缓肠道应激所产生的影响。
L亮氨酸与L异亮氨酸、L缬氨酸被称为支链氨基酸，在生物体内具有特殊的生理功能，参与细胞内多种化合物的合成，是生物体内不可缺少的营养成分[13]。在营养方面，亮氨酸自身在调节氨基酸与蛋白质代谢中起重要作用，研究表明，亮氨酸是骨骼肌与心肌中唯一可调节蛋白质周转的氨基酸，并且L亮氨酸的代谢产物α－酮异己酸也具有调节蛋白质代谢的作用。此外，亮氨酸作为一种支链氨基酸，还具有氧化供能和调节机体免疫的功能[14]。
本课题主要通过在IUGR断奶仔猪和正常初生重断奶仔猪饲料中添加一定量的亮氨酸，研究亮氨酸对IUGR断奶仔猪和正常断奶仔猪肠道形态和相关酶活性的影响，试图通过本实验，找到改善IUGR猪肠道功能，提高其消化率和饲料利用率，加快其生长速度的方法；从而应用于生产实践，减少养猪业的成本和损失，提高经济效益。
1.材料与方法
1.1试验材料
选择相同日龄的正常和 IUGR 新生仔猪（杜洛克×长白×大白）各 16 头，公母各半。出生后 12 小时内分别寄养于胎次相同、体重相似的母猪哺乳。IUGR 仔猪的选择参照 Xu 等[12]的方法，统计分析试验猪场近两年仔猪初生重数据，将体重小于猪场仔猪平均重 2个标准差的仔猪确定为 IUGR 仔猪。试验采用 2×2因子设计，14 日龄断奶，将16头正常断奶仔猪和16头 IUGR断奶仔猪分别随机分成四个处理组（n=8/组）：NC组（正常断奶仔猪，基础日粮），NL组（正常断奶仔猪，基础日粮+0.35%亮氨酸），IC 组（IUGR 断奶仔猪，基础日粮），IL组（IUGR 断奶仔猪，基础日粮+0.35%亮氨酸），35 日龄屠宰取样。
1.2饲养管理
本试验于上海新农饲料股份有限公司朱行养殖场进行，所有试验猪饲养在清洁不锈钢代谢笼中，自由采食和饮水。每天清扫和消毒猪舍，猪舍温度和相对湿度分别控制在 25℃28℃和50%70%之间，每天保证 12 h 光照。仔猪的免疫按猪场正常的免疫程序进行，仔猪饲养管理措施严格执行卫生防疫制度。试验日粮配制参照 NRC（2012）猪的营养需要。
1.3 样品采集
试验结束时，在试验猪耳缘静脉注射戊巴比妥钠（30 mg/kg 体重）麻醉后安乐死，而后迅速打开腹腔取出肠道，剔除肠道表面肠系膜和淋巴结，将肠道分段，挤出食糜，取样本置于液氮速冻后于80℃冰箱保存，并取部分置于4%多聚甲醛中保存48h以上。
1.4测定指标与方法
1.4.1 生产性能测定
仔猪14日龄断奶时记录断奶体重，试验结束时记录35日龄体重，试验期间记录日增重以及日采食量，计算饲料转化率。
1.4.2肠道形态学测定
将固定好的肠道组织脱水后，用石蜡包埋，切片（5μm）,42℃温水中贴片，42℃拷片机拷片8h，之后进行常规HE染色，封片后切片置于光镜下进行形态学测量[15]。每个切片选取5个完好的绒毛和隐窝，并采用Nikon ECLIPSE 80i光镜显微系统和ImagePro Plus 6.0测量软件，测定绒毛高度（VH）、绒毛宽度（VW）和隐窝深度（CD），计算绒毛面积（VS），绒毛高度/绒毛宽度（HWR）、绒毛高度/隐窝深度（VCR）。
绒毛面积：s=π*w/2*√[(w/2)2+v2] [17]（π取3.14） (1)
注：w:绒毛宽度；
v:绒毛高度。
1.4.3二糖酶测定
取0.05mL黏膜上清液加入0.05mL 0.056 mol/L底物(麦芽糖、蔗糖、乳糖),在37℃水浴中准确反应30 min后,立即放入沸水浴中终止反应,冷却后加入0.4 mL蒸馏水。然后用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖释放量,测定使用全波长酶标仪，同时测定空白对照(先沸水浴再加酶液)。酶活力单位定义:每分钟分解1.0μmol/L底物为一个酶活力单位[16]。
二糖酶活力=xn/30a （2）
注:x：反应所释放的葡萄糖μmol/L；
a:二糖中葡萄糖释放量；麦芽糖为2,蔗糖和乳糖为1；
n:样品稀释倍数；
30:反应时间(min)。
目录
摘要1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1.材料与方法2
1.1试验材料 2
1.2饲养管理 2
1.3样品采集 2
1.4测定指标与方法 2
1.4.1肠道形态学测定 2
1.4.2二糖酶测定 3
1.5数据处理 3
结果分析3
2.1生产性能分析 3
2.2肠绒毛形态分析 4
2.3肠道二糖酶活性分析 5
3.讨论6
4.小结7
致谢7
参考文献7
亮氨酸对IUGR及正常断奶仔猪肠道绒毛形态及二糖酶活性的影响
引言
引言：IUGR（Intrauterine growth retardation）又称为子宫内生长阻滞，是胎儿在母体子宫内发育障碍的总称，表现为生长上没有达到遗传潜能，出生时低体重或极低体重；各组织器官生长发育受损，在猪生产中发生率约为15%20%[1,2]。生产上通常将初生重小于1.1 kg的新生仔猪定义为IUGR仔猪，而正常初生重仔猪初生重大于1.4 kg。
肠道是营养 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
物质消化和吸收的重要场所，也是营养物质代谢的重要器官。仔猪新生期是肠道发育的重要阶段，小肠生长速度比体内其它器官快[3]。IUGR会导致仔猪胃肠道重量减轻，绒毛萎缩和黏膜损伤,降低肠道对营养物质的消化吸收以及仔猪的存活率[49]。养猪生产中仔猪早期断奶和IUGR均可导致肠道黏膜发育受损,引起肠道功能紊乱综合症,致使仔猪腹泻、死亡，后期生长缓慢、饲料利用率低等[2,1012]。因此，生产中需采取措施来加快新生仔猪胃肠道的发育，减缓肠道应激所产生的影响。
L亮氨酸与L异亮氨酸、L缬氨酸被称为支链氨基酸，在生物体内具有特殊的生理功能，参与细胞内多种化合物的合成，是生物体内不可缺少的营养成分[13]。在营养方面，亮氨酸自身在调节氨基酸与蛋白质代谢中起重要作用，研究表明，亮氨酸是骨骼肌与心肌中唯一可调节蛋白质周转的氨基酸，并且L亮氨酸的代谢产物α－酮异己酸也具有调节蛋白质代谢的作用。此外，亮氨酸作为一种支链氨基酸，还具有氧化供能和调节机体免疫的功能[14]。
本课题主要通过在IUGR断奶仔猪和正常初生重断奶仔猪饲料中添加一定量的亮氨酸，研究亮氨酸对IUGR断奶仔猪和正常断奶仔猪肠道形态和相关酶活性的影响，试图通过本实验，找到改善IUGR猪肠道功能，提高其消化率和饲料利用率，加快其生长速度的方法；从而应用于生产实践，减少养猪业的成本和损失，提高经济效益。
1.材料与方法
1.1试验材料
选择相同日龄的正常和 IUGR 新生仔猪（杜洛克×长白×大白）各 16 头，公母各半。出生后 12 小时内分别寄养于胎次相同、体重相似的母猪哺乳。IUGR 仔猪的选择参照 Xu 等[12]的方法，统计分析试验猪场近两年仔猪初生重数据，将体重小于猪场仔猪平均重 2个标准差的仔猪确定为 IUGR 仔猪。试验采用 2×2因子设计，14 日龄断奶，将16头正常断奶仔猪和16头 IUGR断奶仔猪分别随机分成四个处理组（n=8/组）：NC组（正常断奶仔猪，基础日粮），NL组（正常断奶仔猪，基础日粮+0.35%亮氨酸），IC 组（IUGR 断奶仔猪，基础日粮），IL组（IUGR 断奶仔猪，基础日粮+0.35%亮氨酸），35 日龄屠宰取样。
1.2饲养管理
本试验于上海新农饲料股份有限公司朱行养殖场进行，所有试验猪饲养在清洁不锈钢代谢笼中，自由采食和饮水。每天清扫和消毒猪舍，猪舍温度和相对湿度分别控制在 25℃28℃和50%70%之间，每天保证 12 h 光照。仔猪的免疫按猪场正常的免疫程序进行，仔猪饲养管理措施严格执行卫生防疫制度。试验日粮配制参照 NRC（2012）猪的营养需要。
1.3 样品采集
试验结束时，在试验猪耳缘静脉注射戊巴比妥钠（30 mg/kg 体重）麻醉后安乐死，而后迅速打开腹腔取出肠道，剔除肠道表面肠系膜和淋巴结，将肠道分段，挤出食糜，取样本置于液氮速冻后于80℃冰箱保存，并取部分置于4%多聚甲醛中保存48h以上。
1.4测定指标与方法
1.4.1 生产性能测定
仔猪14日龄断奶时记录断奶体重，试验结束时记录35日龄体重，试验期间记录日增重以及日采食量，计算饲料转化率。
1.4.2肠道形态学测定
将固定好的肠道组织脱水后，用石蜡包埋，切片（5μm）,42℃温水中贴片，42℃拷片机拷片8h，之后进行常规HE染色，封片后切片置于光镜下进行形态学测量[15]。每个切片选取5个完好的绒毛和隐窝，并采用Nikon ECLIPSE 80i光镜显微系统和ImagePro Plus 6.0测量软件，测定绒毛高度（VH）、绒毛宽度（VW）和隐窝深度（CD），计算绒毛面积（VS），绒毛高度/绒毛宽度（HWR）、绒毛高度/隐窝深度（VCR）。
绒毛面积：s=π*w/2*√[(w/2)2+v2] [17]（π取3.14） (1)
注：w:绒毛宽度；
v:绒毛高度。
1.4.3二糖酶测定
取0.05mL黏膜上清液加入0.05mL 0.056 mol/L底物(麦芽糖、蔗糖、乳糖),在37℃水浴中准确反应30 min后,立即放入沸水浴中终止反应,冷却后加入0.4 mL蒸馏水。然后用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖释放量,测定使用全波长酶标仪，同时测定空白对照(先沸水浴再加酶液)。酶活力单位定义:每分钟分解1.0μmol/L底物为一个酶活力单位[16]。
二糖酶活力=xn/30a （2）
注:x：反应所释放的葡萄糖μmol/L；
a:二糖中葡萄糖释放量；麦芽糖为2,蔗糖和乳糖为1；
n:样品稀释倍数；
30:反应时间(min)。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/667.html
