60coγ辐照处理对猪血清蛋白抗原性及紫外光谱的影响
[目的]本实验旨在研究60Co-γ辐照处理对猪血清白蛋白抗原性及紫外光谱的影响。[方法]采用一系列的不同梯度辐照剂量0（对照组）、1、3、5、7、10 kGy 6个不同水平对猪血清白蛋白冻干样品的水溶液进行辐照处理然后通过酶联免疫吸附反应探究其抗原性，然后在对其进行紫外光谱照射[结果]猪血清白蛋白冻干样品水溶液经过辐照处理后抗原性降低，并且其紫外光谱的强度升高[结论] 60Co-γ辐照处理可能导致猪血清白蛋白免疫原性的降低。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1材料与方法2
1.1材料2
1.1.1实验材料2
1.1.2实验试剂2
1.1.3主要仪器3
1.2方法3
1.2.1辐照处理 2
1.2.1.1配置蛋白溶液 2
1.2.1.2辐照处理2
1.2.2酶联免疫吸附3
1.2.2.1试剂准备3
1.2.2.2 操作步骤3
1.2.3紫外光谱3
1.2.6数据处理3
2 结果与分析3
2.1辐照对PSA抗原性影响3
2.1.1数据处理4
2.1.2数据分析4
2.2辐照对PSA紫外光谱影响4
2.2.1 数据处理4
2.2.2数据分析5
3讨论5
3.1蛋白质的抗原性5
3.2辐照处理5
3.3酶联反应6
3.4紫外光谱分析6
致谢7
参考文献8 60Coγ辐照处理对猪血清蛋白抗原性及紫外光谱的影响
引言
猪血清白蛋白，是一种球蛋白，存在于猪血清中，也是血清的总要组成部分。猪血由红细胞和血浆构成，在血液中大约有46％血浆蛋白。在血液中蛋白质的种类很多，其中白蛋白的主要作用是：能够维持渗透压、具有载体作用、营养作用和PH缓冲作用。猪血清对于细胞培养实验而言是很重要的组成部分，它具有诱导细胞分化和促进细胞增殖等生物学功能 [1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
]。猪肉作为我国最普遍的动物性食品，据国家局统计表明，2004年我国猪血产量非常多，高达140万吨。由于本实验需要先经过辐照处理，实验样品中的水分含量会对实验结果产生影响，所以本实验采用从美国购买的猪血清白蛋白冻干样品，确保实验的准确性，减少实验误差[2]。
现今社会，动物性食品成为人们日常获得蛋白的重要来源之一，而有些动物性产品，会使人产生过敏反应，有些甚至会使人产生变态反应导致疾病甚至死亡。食物过敏主要是指人们对于食物所产生的一种不良生理反应，是一种变态反应。据国外流行病学调查显示，对于有些动物性食品过敏的人群可以占到4%总人口以及6%～7%3岁以下婴幼儿。所以动物性是品的安全问题显得尤为重要。我们既要满足对于动物性食品的需求，也要保障自身的安全，合理摄入动物性食品。这就要求我们严格控制动物性食品的质量，尽可能的保证其安全性，延长其保鲜时间，这就要依靠先进的技术手段和科学方法。
近几年，韩国、德国以及加拿大等国报道中显示，辐照可改变肉制品中过敏原蛋白质的降解、交联和分子构象，破坏抗原决定簇，或可成为降低食物过敏反应的技术手段。鱼、虾、蟹、牛乳等异体蛋白所引起的过敏已为人所熟知，但猪肉引起过敏则非常罕见。此前，剔除动物性食品中所含有的蛋白质成分来防止食物过敏发生的方法是极端错误的策略。
辐照技术，是一种现在很常用的技术手段，辐照技术可以加速大分子物质的降解，使分子构象发生改变。近年来研究调查显示，辐照对螨以及链格孢菌等其他致敏原具有破坏作用，于是对其进行了免疫机理研究，结果表明辐照破坏了上述过敏原的抗原表位，让其丧失了致敏活性[3]。为了进一步研究，又对虾的蛋白，鸡蛋中的蛋白等进行了实验，结果表明其抗原表位均遭到了破坏，以至于丧失致敏活性。所以，本实验中采用猪的血清白蛋白进行辐照处理，探究其抗原性的变化[4]。由于辐照技术操作简单、灭菌效果可靠，对食物中的营养物质破坏较少，所以辐照技术还可以用于食物的灭菌和食物的保藏。辐照处理可以有效减少水分流失,并且可以延缓VC和可滴定酸下降的速度,抑制糖酸比的上升。辐照处理可以保持较高的总糖和还原糖的含量。通过辐照处理，可以对人和动物的血浆袋进行灭菌，使其长期被保存并不发生变形 。在当今社会食品辐照技术越来越普遍，已成为一种新兴产业，在全世界大概有200座高于50万居里的60Coγ辐照源，大约有1000台电子加速器来使商业正常运营。近年来我国有很多不同容量的辐照装置，大约有120座，并且有近50台电子加速器用来辐照 [5]。辐照射线处理食品，目前属于一种新型的非热加工技术，与传统的低温灭菌、高温消毒、微生物、化学等方法相比较，非加工热技术不仅仅可以实现热加工所预期的加工效果，并且还能降低食物中有害微生物的数量，不仅可以维持食物原本具有的感官性能及其营养品质，还可以保存食物本身所含的热敏性营养成分，有热加工无可比拟的优势。但是对于非热加工技术对食物过敏原影响的研究并不深入，有待探讨。
酶联免疫吸附反应是（ELISA）是当代临床实验室中最为常见的检测免疫学指标的一项操作，并且非常受欢迎应用非常广泛，被广泛应用在乙肝、丙肝、梅毒、和艾滋病以及结核病等具有传染性的疾病诊断中以及激素的检测，ELISA具有灵敏度非常高、特异性强、快速简单、成本较低、环保并且适用于大批人群筛查等一系列优点。酶联免疫吸附反应是一种特别的试剂分析方法，以免疫酶技术为基础，发展而来的一种新型的免疫测定方法，其试剂便于保存、结果分析比较客观，是当前实验室中检测抗原抗体最为经济、 最为普遍的一种试验诊断方法。它的原理是将抗原 ( 抗体 ) 相结合于固相载体表面，然后将待测抗体 ( 抗原 ) 、酶标抗原 ( 抗体 ) 和固相抗原 ( 抗体 ) 特异性结合形成一种免疫复合物，经过洗涤使免疫复合物和待测抗体 ( 抗原 ) 呈一定比例，并加入特定酶反应底物让其与固相上的酶反应然后变色，并根据所呈现的颜色做定性或者定量分析，最后得出检测结果。所以本实验采用ELISA，对辐照后的样品进行特异性的抗原抗体反应，然后对免疫反应结果进行定量计算与分析，从而判断本实验中猪血清白蛋白在经过辐照处理后抗原性的改变[6]。
紫外吸收光谱仪是紫外吸收光谱仪种最为常见的一种，由光源，吸收池，检测器等构成，可以进行简单的结构分析。在相同环境下，相同扫描波长和扫描速度，通过显示出来的吸光值进行对比分析，从而探究其蛋白质结构是否改变[7]。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1材料与方法2
1.1材料2
1.1.1实验材料2
1.1.2实验试剂2
1.1.3主要仪器3
1.2方法3
1.2.1辐照处理 2
1.2.1.1配置蛋白溶液 2
1.2.1.2辐照处理2
1.2.2酶联免疫吸附3
1.2.2.1试剂准备3
1.2.2.2 操作步骤3
1.2.3紫外光谱3
1.2.6数据处理3
2 结果与分析3
2.1辐照对PSA抗原性影响3
2.1.1数据处理4
2.1.2数据分析4
2.2辐照对PSA紫外光谱影响4
2.2.1 数据处理4
2.2.2数据分析5
3讨论5
3.1蛋白质的抗原性5
3.2辐照处理5
3.3酶联反应6
3.4紫外光谱分析6
致谢7
参考文献8 60Coγ辐照处理对猪血清蛋白抗原性及紫外光谱的影响
引言
猪血清白蛋白，是一种球蛋白，存在于猪血清中，也是血清的总要组成部分。猪血由红细胞和血浆构成，在血液中大约有46％血浆蛋白。在血液中蛋白质的种类很多，其中白蛋白的主要作用是：能够维持渗透压、具有载体作用、营养作用和PH缓冲作用。猪血清对于细胞培养实验而言是很重要的组成部分，它具有诱导细胞分化和促进细胞增殖等生物学功能 [1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
]。猪肉作为我国最普遍的动物性食品，据国家局统计表明，2004年我国猪血产量非常多，高达140万吨。由于本实验需要先经过辐照处理，实验样品中的水分含量会对实验结果产生影响，所以本实验采用从美国购买的猪血清白蛋白冻干样品，确保实验的准确性，减少实验误差[2]。
现今社会，动物性食品成为人们日常获得蛋白的重要来源之一，而有些动物性产品，会使人产生过敏反应，有些甚至会使人产生变态反应导致疾病甚至死亡。食物过敏主要是指人们对于食物所产生的一种不良生理反应，是一种变态反应。据国外流行病学调查显示，对于有些动物性食品过敏的人群可以占到4%总人口以及6%～7%3岁以下婴幼儿。所以动物性是品的安全问题显得尤为重要。我们既要满足对于动物性食品的需求，也要保障自身的安全，合理摄入动物性食品。这就要求我们严格控制动物性食品的质量，尽可能的保证其安全性，延长其保鲜时间，这就要依靠先进的技术手段和科学方法。
近几年，韩国、德国以及加拿大等国报道中显示，辐照可改变肉制品中过敏原蛋白质的降解、交联和分子构象，破坏抗原决定簇，或可成为降低食物过敏反应的技术手段。鱼、虾、蟹、牛乳等异体蛋白所引起的过敏已为人所熟知，但猪肉引起过敏则非常罕见。此前，剔除动物性食品中所含有的蛋白质成分来防止食物过敏发生的方法是极端错误的策略。
辐照技术，是一种现在很常用的技术手段，辐照技术可以加速大分子物质的降解，使分子构象发生改变。近年来研究调查显示，辐照对螨以及链格孢菌等其他致敏原具有破坏作用，于是对其进行了免疫机理研究，结果表明辐照破坏了上述过敏原的抗原表位，让其丧失了致敏活性[3]。为了进一步研究，又对虾的蛋白，鸡蛋中的蛋白等进行了实验，结果表明其抗原表位均遭到了破坏，以至于丧失致敏活性。所以，本实验中采用猪的血清白蛋白进行辐照处理，探究其抗原性的变化[4]。由于辐照技术操作简单、灭菌效果可靠，对食物中的营养物质破坏较少，所以辐照技术还可以用于食物的灭菌和食物的保藏。辐照处理可以有效减少水分流失,并且可以延缓VC和可滴定酸下降的速度,抑制糖酸比的上升。辐照处理可以保持较高的总糖和还原糖的含量。通过辐照处理，可以对人和动物的血浆袋进行灭菌，使其长期被保存并不发生变形 。在当今社会食品辐照技术越来越普遍，已成为一种新兴产业，在全世界大概有200座高于50万居里的60Coγ辐照源，大约有1000台电子加速器来使商业正常运营。近年来我国有很多不同容量的辐照装置，大约有120座，并且有近50台电子加速器用来辐照 [5]。辐照射线处理食品，目前属于一种新型的非热加工技术，与传统的低温灭菌、高温消毒、微生物、化学等方法相比较，非加工热技术不仅仅可以实现热加工所预期的加工效果，并且还能降低食物中有害微生物的数量，不仅可以维持食物原本具有的感官性能及其营养品质，还可以保存食物本身所含的热敏性营养成分，有热加工无可比拟的优势。但是对于非热加工技术对食物过敏原影响的研究并不深入，有待探讨。
酶联免疫吸附反应是（ELISA）是当代临床实验室中最为常见的检测免疫学指标的一项操作，并且非常受欢迎应用非常广泛，被广泛应用在乙肝、丙肝、梅毒、和艾滋病以及结核病等具有传染性的疾病诊断中以及激素的检测，ELISA具有灵敏度非常高、特异性强、快速简单、成本较低、环保并且适用于大批人群筛查等一系列优点。酶联免疫吸附反应是一种特别的试剂分析方法，以免疫酶技术为基础，发展而来的一种新型的免疫测定方法，其试剂便于保存、结果分析比较客观，是当前实验室中检测抗原抗体最为经济、 最为普遍的一种试验诊断方法。它的原理是将抗原 ( 抗体 ) 相结合于固相载体表面，然后将待测抗体 ( 抗原 ) 、酶标抗原 ( 抗体 ) 和固相抗原 ( 抗体 ) 特异性结合形成一种免疫复合物，经过洗涤使免疫复合物和待测抗体 ( 抗原 ) 呈一定比例，并加入特定酶反应底物让其与固相上的酶反应然后变色，并根据所呈现的颜色做定性或者定量分析，最后得出检测结果。所以本实验采用ELISA，对辐照后的样品进行特异性的抗原抗体反应，然后对免疫反应结果进行定量计算与分析，从而判断本实验中猪血清白蛋白在经过辐照处理后抗原性的改变[6]。
紫外吸收光谱仪是紫外吸收光谱仪种最为常见的一种，由光源，吸收池，检测器等构成，可以进行简单的结构分析。在相同环境下，相同扫描波长和扫描速度，通过显示出来的吸光值进行对比分析，从而探究其蛋白质结构是否改变[7]。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/298.html
