brca1在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用

: BRCA1（Breast cancer gene 1）是乳腺以及卵巢癌症中高度表达的肿瘤抑制因子，参与了DNA损伤修复，细胞周期调控以及细胞凋等众多过程。但BRCA1在猪卵巢颗粒细胞凋亡中作用的研究还未见报道。为了探索BRCA1在猪卵泡颗粒细胞凋亡中的作用，本试验采用RNA干扰技术敲减猪卵巢颗粒细胞中BRCA1基因；通过流式细胞术对细胞周期与凋亡水平进行检测；利用实时荧光定量PCR技术检测凋亡相关基因BCL-2和BAX的mRNA的表达。结果发现设计的小干扰RNA（RNAi）可有效敲减猪卵巢颗粒细胞中BRCA1基因表达；敲减BRCA1基因后猪卵巢颗粒细胞的细胞周期阻滞在G1期（P<0.01），S期内细胞显著降低(P<0.05)，同时细胞凋亡水平极显著上调（P<0.01）；促凋亡基因BAX表达水平显著上调（P<0.05），抑凋亡基因BCL-2无显著变化。综上，本试验证实在猪卵巢颗粒细胞中敲减BRCA1能够促进细胞凋亡，影响细胞周期，为研究BRCA1在猪卵泡闭锁和繁殖中的作用提供到了依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1材料与方法2
1.1试验样品 2
1.2主要仪器 2
1.3溶液的配制 3
1.3.1细胞培养溶液的配制3
1.3.2 RNA提取所需试剂3
1.3.3小干扰RNA的合成与配制3
1.4颗粒细胞的培养3
1.5干扰RNA的转染3
1.6组织总RNA提取与反转录3
1.7颗粒实时荧光定量PCR3
1.8细胞凋亡的检测4
1.9细胞周期的检测4
2结果与分析4
2.1BRCA1基因siRNA的合成与验证4
2.2干扰BRCA1基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡水平的影响5
2.3干扰BRCA1基因对猪卵巢颗粒细胞周期的作用6
2.4干扰BRCA1基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡水相关基因表达的影响6
3讨论 7
致谢7
参考文献8
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在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用

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