母鼠日粮添加胆碱对断奶iugr仔鼠生长及脂代谢的影响
本试验旨在系统研究日粮添加胆碱对断奶IUGR仔鼠生长及脂代谢的影响，为IUGR的防治提供依据。取生长状态相同或相近的SD母鼠18只，确定怀孕0.5天，在适宜的环境下进行饲养，在怀孕第10天进行限饲。分为正常采食、IUGR和IUGR胆碱组（分别饲喂基础日粮、限饲50%基础日粮、限饲50%基础日粮并添加2%胆碱），当仔鼠出生后母鼠恢复原本饲料配方直至仔鼠达21日龄时终止。结果表明母鼠饲粮中添加胆碱对IUGR仔鼠体重的影响仅在三周龄时无显著差异(P > 0.05)；而对0天仔鼠的血糖影响差异极显著(P < 0.01)；在三周龄仔鼠血清指标中总胆固醇差异不显著(P > 0.05)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)差异显著；三周龄IUGR仔鼠的心、肝、胰、肾、肺、脾、脑、睾丸及小肠重量部分差异显著；在IUGR小鼠脂肪沉积方面仅肾周脂差异极显著(P < 0.01)。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1引言1
2材料与方法2
2.1实验设计 2
2.2试验对象 2
2.3饲养管理 2
2.4 样本采集与指标测定2
2.4.1样本称重 3
2.4.2血糖含量测定 3
2.4.3血清生化指标测定 3
3结果与分析3
3.1母鼠日粮添加胆碱对新生IUGR仔鼠体重的影响 3
3.2母鼠日粮添加胆碱对新生IUGR仔鼠血糖的影响3
3.3母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠血清生化指标的影响 4
3.4母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠器官重量的影响 4
3.5母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠脂肪沉积的影响 5
4讨论 5
致谢6
参考文献6
母鼠日粮添加胆碱对断奶IUGR仔鼠生长及脂代谢的影响
引言
1 引言
胆碱作为一种必需的水溶性营养素，通常被划分到维生素B族，是构成生物膜、乙酰胆碱合成、甲基代谢所必须的成分，[1]但它并不完全符合维生素的经 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
典定义，维生素主要以辅酶或催化剂的形式参与机体代谢，不参与构成体组织和能量物质，而胆碱则是作为细胞结构物质发挥其生理功能。
多胎动物在母体子宫内发育迟缓（IUGR）会普遍导致胎儿出生时低体重或极低体重，组织器官发育不良[2]，并程序化补偿生长导致个体生长速度和脂肪沉积量高于同类非IUGR个体[3][4]，并由于体内脂肪过多严重影响个体的健康水平及成产能力。这一现象也存在于人类社会中，若母体在孕期营养不良则会导致胎儿出生体重低于地方平均值，但在日后的成长过程中由于补偿生长的影响导致个体在生长发育过程中体重超重甚至肥胖，严重影响健康，这一现象已经趋于严峻不容忽视[5]。例如FLD（脂肪性肝病）是一种以肝脏甘油三酯过度累积为特征的代谢疾病。引起FLD的主要原因是肝脏脂肪酸合成、转运与氧化之间的平衡被破坏。除了过量饮酒、大量能量摄入以及遗传因素外，营养代谢紊乱也是其中原因之一[6]。
缺乏胆碱会使合成脂蛋白的重要原料磷脂酰胆碱的合成量不足，进而引起肝脏脂蛋白合成减少，阻碍了脂肪向血液中转运这一通路，引起脂肪在肝脏内堆积，胆碱很可能通过胆碱氧化这一途径生成甜菜碱，继而通过蛋氨酸再甲基化途径间接参与S腺苷甲硫氨酸的合成，进而以S腺苷甲硫氨酸为活性甲基供体[7]参与甲基代谢促进肉碱合成[8]，增强组织中脂肪酸氧化，提高组织对脂肪酸的降解，最终达到降低动物脂肪沉积的作用[9]。
除此之外，在采食蛋白质水平差异不显著的情况下，饲粮中添加胆碱可使机体中UN含量显著降低，并可促进肌纤维的快速生长，调控肌纤维类型由Ⅰ型向Ⅱ型发生转变，降低细胞内糖原的含量，有改善肉的品质，降低料重比的功效[10]，若缺乏胆碱则会导致动物腿部肌肉发育不良进而萎缩[11][12]。由于胆碱是神经递质乙酰胆碱的组成成分，对大脑发育和神经功能有重要意义，生长期小鼠长期缺乏胆碱会对大脑结构和功能永久损伤，也会引起动物记忆力下降、记忆缺失的问题[13]，同时，胆碱供应不足引起的乙酰胆碱缺乏使肌肉产生收缩障碍，也可能会进一步导致肌肉损伤。
现有研究主要集中于IUGR个体日粮中添加胆碱对体内脂代谢的影响，而通过哺乳期对母体日粮中添加胆碱对IUGR个体脂代谢的影响则未见报道。本试验旨在研究母体通过母体效应对IUGR个体生长及脂代谢的影响。
2 材料与方法
2．1 试验设计
选择日龄、体重基本一致(约280g)的雌性SD大鼠18只，随机分为3个组，每组6只大鼠，单个大鼠为1个重复，具体分组处理见表1。
表1 试验设计方案
分组
对照组
IUGR组
IUGR胆碱组
妊娠09天
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
妊娠10天后
自由采食基础日粮
限饲50%基础日粮
限饲50%基础日粮+2%胆碱
哺乳期
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮+2%胆碱
2.2 试验对象
本试验采用体重相近的健康雌性白化大鼠18只，随机分成三组，每组6只，每只单独饲养。适时交配，采用阴道涂片镜检法确定怀孕0.5天。
2.3 饲养管理
在温度、湿度适宜的环境下进行饲养，每日光照、黑暗时间为1：1，在怀孕第10天进行限饲。妊娠10天后三组饲喂的日粮如下：①对照组：饲喂基础日粮；②IUGR组：限饲50%基础日粮；③IUGR胆碱组：限饲50%基础日粮并添加2%胆碱。在仔鼠出生后调整为每只母鼠哺育6只仔鼠（公母各半）。母鼠仍饲喂原方案里的日粮，均为自由采食。哺乳期每周称取仔鼠体重。
2.4 样品采集
在仔鼠出生时每窝择取仔鼠两只，使用血糖仪测量血糖含量。在仔鼠断奶时每窝择取仔鼠2只（公母各半）空腹8小时，称重后屠宰取血清，置80度冰箱备用。解剖取心、肝、脾、肺、肾、胰、脑、十二指肠、空肠、回肠以及雄性仔鼠的睾丸以及腹脂、肾周脂称重，计算器官或组织的相对重量。计算公式为：器官相对重量=器官重/体重*100；脂肪相对含量=脂肪重/体重*1000。
2.5 血清指标的测定
按照各自的说明书使用试剂盒测定各项生化指标，包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、葡萄糖、总胆红素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。
2.6 数据分析
试验原始数据使用Excel初步整理后，采用SPSS中的单因素方差分析(oneway ANOVA)，使用Duncan法进行多重比较，结果以平均值和标准误形式表示，以P < 0.05 和P < 0.01为差异限制和极显著的标准。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1引言1
2材料与方法2
2.1实验设计 2
2.2试验对象 2
2.3饲养管理 2
2.4 样本采集与指标测定2
2.4.1样本称重 3
2.4.2血糖含量测定 3
2.4.3血清生化指标测定 3
3结果与分析3
3.1母鼠日粮添加胆碱对新生IUGR仔鼠体重的影响 3
3.2母鼠日粮添加胆碱对新生IUGR仔鼠血糖的影响3
3.3母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠血清生化指标的影响 4
3.4母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠器官重量的影响 4
3.5母鼠日粮添加胆碱对21天IUGR仔鼠脂肪沉积的影响 5
4讨论 5
致谢6
参考文献6
母鼠日粮添加胆碱对断奶IUGR仔鼠生长及脂代谢的影响
引言
1 引言
胆碱作为一种必需的水溶性营养素，通常被划分到维生素B族，是构成生物膜、乙酰胆碱合成、甲基代谢所必须的成分，[1]但它并不完全符合维生素的经 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
典定义，维生素主要以辅酶或催化剂的形式参与机体代谢，不参与构成体组织和能量物质，而胆碱则是作为细胞结构物质发挥其生理功能。
多胎动物在母体子宫内发育迟缓（IUGR）会普遍导致胎儿出生时低体重或极低体重，组织器官发育不良[2]，并程序化补偿生长导致个体生长速度和脂肪沉积量高于同类非IUGR个体[3][4]，并由于体内脂肪过多严重影响个体的健康水平及成产能力。这一现象也存在于人类社会中，若母体在孕期营养不良则会导致胎儿出生体重低于地方平均值，但在日后的成长过程中由于补偿生长的影响导致个体在生长发育过程中体重超重甚至肥胖，严重影响健康，这一现象已经趋于严峻不容忽视[5]。例如FLD（脂肪性肝病）是一种以肝脏甘油三酯过度累积为特征的代谢疾病。引起FLD的主要原因是肝脏脂肪酸合成、转运与氧化之间的平衡被破坏。除了过量饮酒、大量能量摄入以及遗传因素外，营养代谢紊乱也是其中原因之一[6]。
缺乏胆碱会使合成脂蛋白的重要原料磷脂酰胆碱的合成量不足，进而引起肝脏脂蛋白合成减少，阻碍了脂肪向血液中转运这一通路，引起脂肪在肝脏内堆积，胆碱很可能通过胆碱氧化这一途径生成甜菜碱，继而通过蛋氨酸再甲基化途径间接参与S腺苷甲硫氨酸的合成，进而以S腺苷甲硫氨酸为活性甲基供体[7]参与甲基代谢促进肉碱合成[8]，增强组织中脂肪酸氧化，提高组织对脂肪酸的降解，最终达到降低动物脂肪沉积的作用[9]。
除此之外，在采食蛋白质水平差异不显著的情况下，饲粮中添加胆碱可使机体中UN含量显著降低，并可促进肌纤维的快速生长，调控肌纤维类型由Ⅰ型向Ⅱ型发生转变，降低细胞内糖原的含量，有改善肉的品质，降低料重比的功效[10]，若缺乏胆碱则会导致动物腿部肌肉发育不良进而萎缩[11][12]。由于胆碱是神经递质乙酰胆碱的组成成分，对大脑发育和神经功能有重要意义，生长期小鼠长期缺乏胆碱会对大脑结构和功能永久损伤，也会引起动物记忆力下降、记忆缺失的问题[13]，同时，胆碱供应不足引起的乙酰胆碱缺乏使肌肉产生收缩障碍，也可能会进一步导致肌肉损伤。
现有研究主要集中于IUGR个体日粮中添加胆碱对体内脂代谢的影响，而通过哺乳期对母体日粮中添加胆碱对IUGR个体脂代谢的影响则未见报道。本试验旨在研究母体通过母体效应对IUGR个体生长及脂代谢的影响。
2 材料与方法
2．1 试验设计
选择日龄、体重基本一致(约280g)的雌性SD大鼠18只，随机分为3个组，每组6只大鼠，单个大鼠为1个重复，具体分组处理见表1。
表1 试验设计方案
分组
对照组
IUGR组
IUGR胆碱组
妊娠09天
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
妊娠10天后
自由采食基础日粮
限饲50%基础日粮
限饲50%基础日粮+2%胆碱
哺乳期
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮
自由采食基础日粮+2%胆碱
2.2 试验对象
本试验采用体重相近的健康雌性白化大鼠18只，随机分成三组，每组6只，每只单独饲养。适时交配，采用阴道涂片镜检法确定怀孕0.5天。
2.3 饲养管理
在温度、湿度适宜的环境下进行饲养，每日光照、黑暗时间为1：1，在怀孕第10天进行限饲。妊娠10天后三组饲喂的日粮如下：①对照组：饲喂基础日粮；②IUGR组：限饲50%基础日粮；③IUGR胆碱组：限饲50%基础日粮并添加2%胆碱。在仔鼠出生后调整为每只母鼠哺育6只仔鼠（公母各半）。母鼠仍饲喂原方案里的日粮，均为自由采食。哺乳期每周称取仔鼠体重。
2.4 样品采集
在仔鼠出生时每窝择取仔鼠两只，使用血糖仪测量血糖含量。在仔鼠断奶时每窝择取仔鼠2只（公母各半）空腹8小时，称重后屠宰取血清，置80度冰箱备用。解剖取心、肝、脾、肺、肾、胰、脑、十二指肠、空肠、回肠以及雄性仔鼠的睾丸以及腹脂、肾周脂称重，计算器官或组织的相对重量。计算公式为：器官相对重量=器官重/体重*100；脂肪相对含量=脂肪重/体重*1000。
2.5 血清指标的测定
按照各自的说明书使用试剂盒测定各项生化指标，包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、葡萄糖、总胆红素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。
2.6 数据分析
试验原始数据使用Excel初步整理后，采用SPSS中的单因素方差分析(oneway ANOVA)，使用Duncan法进行多重比较，结果以平均值和标准误形式表示，以P < 0.05 和P < 0.01为差异限制和极显著的标准。
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