7种肿瘤相关抗原bap31基因转录后调控分子的筛选和初步验证

宫颈癌是女性生殖道患病率最高的恶性肿瘤,严重危害女性健康,而肿瘤抗原B细胞受体相关蛋白31(BAP31)在宫颈癌组织中高水平表达,对其发病机制有一定影响。为探究BAP31基因转录后调控分子,查阅生物信息学预测网站筛选出7种可能与BAP31基因转录后调控的miRNA,先分别用对应mimics做双荧光素酶报告系统分析,再转染Hela细胞,用Western Blot进一步筛选,再用RT-PCR定量检测。结果显示,有6种miRNA均可与BAP31基因3’UTR区结合,其中miRNA-362-3p与BAP31成明显负相关。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言(或绪论)1
1 材料与方法2
1.1 试验试剂、材料 2
1.2 主要仪器、设备 3
1.3 生物信息学预测网站初步筛选miRNA 3
1.4 双荧光素酶报告系统验证3
1.5 mimics转染Hela细胞3
1.6 提蛋白并定量3
1.6.1 提蛋白3
1.6.2 定量3
1.7 Western Blot测BAP31表达量3
1.7.1 跑胶3
1.7.2 转膜4
1.7.3 封闭4
1.7.4 敷一抗4
1.7.5 敷二抗4
1.7.6 发光4
1.8 RTPCR测含量4
2 结果与分析4
2.1 初步筛选出7种miRNA4
2.2 初步验证7种miRNA分子4
2.2.1 双荧光素酶报告系统结果4
2.2.2 Western Blot结果5
2.3 RTPCR检测病人肿瘤组织与癌旁组织中7种miRNA相对含量6
3 讨论6
致谢7
参考文献7
7种肿瘤相关抗原BAP31基因转录后调控分子的筛选和初步验证

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