chodg4423g10的商业化培养基驯化筛选及营养补充优化(附件)
CHO-DG44-23G10细胞能生产抗人肿瘤坏死因子(TNF)的人源化单克隆抗体,生产过程中宿主细胞的产物表达水平主要受培养基和培养工艺的影响。本实验对该细胞系对各种商业培养基驯化培养,通过对活细胞密度、细胞活力、细胞倍增、蛋白表达量、生产速率等参数的监测比较,最终筛选出该细胞系在CD FortiCHOTM培养基中表达速率最高,可进行进一步优化。通过测定培养液上清中的葡萄糖浓度,间歇补加葡萄糖,初步建立基于葡萄糖的动态流加培养过程。
hs25对人肝细胞内cyp酶诱导作用研究
本研究利用LC-MS/MS法和Real-Time PCR法,对新药HS-25对细胞色素P450(CYP)酶的诱导作用进行评价。主要以CYP1A2,CYP2B6,CYP3A4三种亚型为研究对象。将复苏后的人肝细胞与高、中、低浓度的受试物HS-25或阳性诱导剂以及CYP450酶特异性探针底物共同培养72h,并且以特异性底物的代谢产物(对乙酰氨基酚,羟基安非他酮以及1’-羟基咪达唑仑)作为测定CYP1A2,CYP2B6,CYP3A4代谢活性的标志,建立3种特异性代谢产物的LC-MS/MS法并通过测定代谢产物生成
pmrb插入突变介导大肠杆菌对多粘菌素e耐药的机制
大肠杆菌多药耐药、泛耐药菌株的出现已经成为了当今医学临床治疗的难题,多粘菌素俨然成为最后的药物选择,但不可避免的在临床上已经产生了多粘菌素耐药株,使大肠杆菌病的治疗面临巨大的阻碍。阐明大肠杆菌对多粘菌素的耐药机制对延缓细菌耐药性产生及寻找新的药物靶位均具有重要意义。目前本实验室发现1株体外诱导的多粘菌素耐药菌株二元调控系统的pmrB基因在229位插入了一段30 bp的序列,这个序列位于两个AGCCTG之间并复制了pmrB中HAMP结构域序列,为验证该插入突变是否参与多粘菌素耐药性产生,本实验通过Red同源
一例犬尿石症的诊断与防治方法
犬尿石症(canine urolithiasis)是指尿路中的无机盐或有机盐类结晶的凝结物,即结石或多量结晶刺激尿路粘膜而引起出血、炎症和阻塞的一种泌尿器官疾病[1]。临床常见症状为腹痛、排尿量少、血尿甚至无尿,排尿时努责等,若不及时治疗,随着病程延长可引起犬的死亡。本文根据接诊的犬尿结石病例,通过对病例进行临床症状观察、血液常规检查、X光检查以及B超检查等来进行诊断,进而选择合适的治疗方法予以治疗,并根据治疗效果探讨了犬尿石症的预防措施。
亚硫酸氢盐测序pcr法(bsp)对大鼠肝脏irs2基因的甲基化检测(附件)
DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式之一,对机体的基因稳定遗传有重要意义。随着研究的深入,其检测方法越来越多,本实验用亚硝酸盐测序PCR法(BSP),通过3730测序平台对大鼠4个肝脏样品IRS2基因甲基化进行检测,每个样品测10次,将测序的结果用ChromaPro软件生成Fasta格式,将生成的Fasta文件导入BISMA网站上分析,得出IRS2基因CpG岛的甲基化突变率。
免疫增强剂cvc1302对口蹄疫疫苗的免疫效力评价
:口蹄疫是一种烈性传染性人兽共患病。提高口蹄疫疫苗免疫效果,不仅有利于养殖业的健康发展,而且有利于人类公共卫生的发展。为研究CVC1302以伴侣形式添加到口蹄疫疫苗后对该疫苗的免疫效力和免疫安全性的影响,本研究选取6-8周龄的仔猪进行不同批次的不同种类口蹄疫疫苗的免疫,分别选取O型FMD灭活疫苗(招标苗),O,A,亚I三价灭活疫苗(精品苗)及多肽疫苗三类,进行免疫增强剂CVC1302伴侣疫苗的添加及不添加伴侣的常规疫苗对照,观察免疫猪免疫后的反应,免疫后28天采血检测不同组别的液相阻断ELISA抗体水平。
免疫增强在山豆根多糖及其硫酸酯治疗鸭病毒性肝炎中的作用
:山豆根多糖(BSRPS)及其硫酸化产物山豆根多糖硫酸酯(sBSRPS),具有抗鸭肝炎病毒(DHAV)活性的作用。然而,它们的抗病毒机制仍然不明确。本文研究了免疫增强在BSRPS和sBSRPS治疗鸭病毒性肝炎(DVH)中的作用。首先通过MTT法测定两者刺激淋巴细胞增殖的效果,然后,用DHAV对雏鸭进行攻毒,并用BSRPS和sBSRPS进行治疗。用酶联免疫吸附法测定总抗体(Ab)、干扰素γ(IFN-γ)、肝细胞生长因子(HGF)、白介素(IL)-2、IL-6和IL-8等细胞因子。结果表明,BSRPS可以稳定
内生真菌次生代谢产物的分离纯化及药理活性研究
:内生真菌因其与宿主之间在长期的共进化中,建立了稳定的互惠共生关系,也产生了各种各样对其自身及宿主具有重要作用的次生代谢产物,很多在免疫调节剂、酶抑制剂、抗代谢物质以及新型抗肿瘤物质有重要应用。因此对微生物次生代谢产物的研究不仅能让我们发现更多结构新颖的化合物,更有助于具有药理活性的化合物的发掘。本论文从正常的落叶松中分离筛选到一株真菌,对其进行发酵,对其次生代谢产物进行分离、纯化、鉴定及生物活性评价。
冇骨消对sars样冠状病毒wiv1复制的影响
:SARS冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus, SARS-CoV)感染引起人严重急性呼吸综合症,为高传染性和高致性病原。蝙蝠SARS样冠状病毒(SARS-like Coronavirus, SL-CoV) WIV1和SARS-CoV高度同源,有相同的进化起源,并且两者利用相同的受体入侵细胞。已有研究显示药用植物冇骨消及其成分可以抑制人类冠状病毒NL63(Human coronavirus, HCoV-NL63)的复制,本实验测试了冇骨消的四
亚精胺通过增加肝脏自噬缓解慢性应激对肝脏损伤的机制研究
慢性应激是导致动物肝脏损伤的重要因素。亚精胺能激活机体自噬功能,清除损坏的细胞器,改善细胞功能。本研究拟通过地塞米松注射模拟小鼠慢性应激,并通过腹腔注射亚精胺探讨其是否通过激活肝脏自噬缓解慢性应激对肝脏的损害。研究结果显示腹腔注射地塞米松和亚精胺都显著降低了小鼠体重。亚精胺注射能导致肝窦内红细胞聚集,极显著升高血清中ALT、AST、LDH的活性,显著增加了BUN的含量,但显著降低了血糖含量。亚精胺注射显著升高了肝脏SAT1的基因和蛋白表达,但只在mRNA水平影响自噬基因的表达。我们的结果表明腹腔注射亚精胺
伊维菌素脂质纳米粒的离体透皮吸收测定
本文主要介绍了一种探究伊维菌素纳米脂质粒(IVM-SLN)离体透皮吸收的方法,以离体鼠皮为实验材料,运用改良Franz透皮扩散池,以市售伊维菌素透皮剂作为对照,在规定时间点测定伊维菌素单位面积的透过量。结果显示,IVM-SLN及市售伊维菌素透皮剂单位面积透过量分别为46.67±1.57 μg/cm2和27.62±2.27 μg/cm2,与市售伊维菌素透皮剂相比,24 h内IVM-SLN累积透过率显著增加(P<0.05, n=3)。结果显示,本实验室制备的(IVM-SLN)透皮效率要高于市售伊维菌素透皮剂,