hs25对人肝细胞内cyp酶诱导作用研究

本研究利用LC-MS/MS法和Real-Time PCR法，对新药HS-25对细胞色素P450（CYP）酶的诱导作用进行评价。主要以CYP1A2,CYP2B6,CYP3A4三种亚型为研究对象。将复苏后的人肝细胞与高、中、低浓度的受试物HS-25或阳性诱导剂以及CYP450酶特异性探针底物共同培养72h，并且以特异性底物的代谢产物（对乙酰氨基酚，羟基安非他酮以及1’-羟基咪达唑仑）作为测定CYP1A2,CYP2B6,CYP3A4代谢活性的标志，建立3种特异性代谢产物的LC-MS/MS法并通过测定代谢产物生成量计算相对酶活性来评价HS-25对3种CYP450同工酶的活性的诱导作用。对mRNA表达水平进行定量分析，计算ΔΔCT并以2-ΔΔCT作为其诱导倍数。结果阳性诱导剂奥美拉唑，利福平分别将CYP1A2，CYP2B6，CYP3A4的酶的活性提高到了原来的8.8倍，3.1倍，8.4倍，mRNA表达量提高到了原来的13.4倍，5.7倍，9.1倍，诱导模型构建成功。而高,中,低浓度的化合物HS-25对CYP酶不存在明显的诱导作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1材料 2
1.2方法 2
1.2.1细胞的培养和化合物的接种3
1.2.2细胞毒性测试4
1.2.3酶的活性的测试4
1.2.4 mRNA表达水平的测定5
2结果与分析6
2.1细胞毒性结果6
2.2酶活测定结果7
2.3 mRNA定量测定结果7
3讨论 8
致谢9
参考文献9
附录10
HS25对人肝细胞内CYP酶诱导作用研究

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