和缓艾美耳球虫肌动蛋白解聚因子基因的克隆与原核表达

为研究和缓艾美耳球虫肌动蛋白解聚因子(ADF)的免疫原性,对和缓艾美耳球虫(E.mitis)的ADF基因进行了克隆和原核表达。根据GenBank上已公布的ADF基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR技术扩增和缓艾美耳球虫的ADF基因,并与原核表达载体pET-32a连接,构建原核表达载体pET-32a-ADF,转化入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE 鉴定表达产物。结果表明,试验成功克隆了和缓艾美耳球虫的ADF基因,并表达出了分子质量单位约为30 KD的融合蛋白,蛋白在上清和包涵

地区屠宰场样品中猪丹毒丝菌的分离与鉴定

为调查上海地区猪丹毒丝菌的潜在感染情况,本实验对2015年度来自上海地区的两家生猪屠宰场共计60份猪扁桃体样本进行猪丹毒丝菌检测。经细菌分离培养、形态学及培养特性观察共分离获得29株疑似猪丹毒丝菌样本。结合生化鉴定及针对16S rRNA建立的特异性PCR检测,共获得16株阳性样本。该16株阳性样品的测序结果经与NCBI数据库比对确认为猪丹毒丝菌,因此,该批样本中猪丹毒的检出率为26.67%,可见上海地区健康猪群中的猪丹毒仍存在一定程度的隐性感染,提示养殖人员须给以一定关注。Student majo

家禽血清h5n1亚型禽流感病毒抗体的检测与分析

为科学防控H5N1亚型禽流感提供依据,于2015年7-11月在江苏省不同地区的活禽市场、种禽养殖场以及散养户中采集了鸡、鸭和鹅的血清样品共计1213份。样品按家禽的种类分鸡的样品765份,鸭的样品223份,鹅的血清样品225份;按家禽养殖来源分活禽市场血清样品共有675份,来源于种禽场的血清样品共有302份,来源于散养户的血清样品共有236份;按家禽来源地分苏南血清样品814份,苏中血清样品152份,苏北血清样品247份。通过对血清中的H5N1亚型禽流感病毒的HI抗体检测结果显示,在1213份样品中抗体阳

日本血吸虫凝溶胶蛋白的克隆与表达

日本血吸虫病流行于中国、菲律宾、印度尼西亚等地,是一种人畜共患寄生虫病,严重危害人畜健康。筛选高效的疫苗候选分子、更加特异的诊断抗原以及新的药物靶点成为血吸虫病防控的需求,是控制血吸虫病流行, 消除其对人类健康危害的关键。由肠上皮和(或)表皮以及其他特异排泄分泌器官在整个生命周期释放或分泌的排泄分泌产物能引起宿主免疫调节反应。本文对日本血吸虫排泄分泌蛋白凝溶胶蛋白的编码基因进行克隆和表达,利用PCR技术扩增基因,获得了1122 bp的cDNA序列。构建了重组表达质粒pET-28a(+)-gelsolin,

昆虫细胞悬浮培养增殖重组杆状病毒条件优化

昆虫细胞杆状病毒表达系统被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统。本研究对sf9细胞摇瓶悬浮培养过程及利用sf9细胞摇瓶悬浮培养增殖杆状病毒条件进行了优化。在sf9细胞摇瓶悬浮培养120 h达到生长顶峰8×106 cell/ml时,测得 Gluc(mm)6.9 ;Gln(mm)6.27 ;Lac(mm)15.6;NH4+(mm)25.73。对在摇瓶中增殖杆状病毒工艺优化进行研究,用正交实验讨论细胞初始浓度(ICD)和感染复数(MOI)间的关系,接毒后96 h收毒检测。实验结果表明,当初始密度在1×106 c

北京地区犬细小病毒病临床调查研究

:犬细小病毒由于其抵抗外界环境能力强,易产生变异株导致免疫失败,对各年龄犬都易感,治愈犬体内终身携带病毒并散毒成为潜在传染源,因此是现在养犬业所面对重要传染病之一。本论文根据北京观赏宠物医院自2011年至2015年收治的临床病例进行分析,发现犬传染病病例1104例,其中犬细小病毒病占51.09%,共564例。通过对其发病率及其常见类型、治疗效果、发病犬是否免疫和不同季节、不同年龄、不同血统、不同性别犬等因素与患病关系进行数量统计及发病率分析,发现对发病率影响较明显的有季节因素,犬只年龄,免疫状况,血统等;

和缓艾美耳球虫过氧化物酶基因克隆与表达(附件)

:根据NCBI上公布的和缓艾美耳球虫过氧化物酶(Peroxiredoxin,PRX)基因序列设计一对特异性引物,以和缓艾美耳球虫孢子化卵囊中提取的总RNA为模板,通过RT-PCR克隆PRX基因,构建pET32a-PRX重组质粒,然后将重组质粒转化入E.coli BL21,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白。对重组质粒测序表明克隆到的PRX基因翻译的氨基酸序列与GenBank中和缓艾美耳球虫过氧化物酶氨基酸序列一致。用DNA Star以及CBS Pediction Servers上的工具对PRX蛋白进行生物信

喹诺酮类药物对嗜水气单胞菌的体外抑菌研究

:嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是一种能够引起多种淡水养殖鱼类败血症的重要致病菌,在自然界中广泛分布,给水产养殖业造成了较严重的经济损失。多种抗生素能够抑杀该菌,尤其是氟喹诺酮类药物在这类病害的防治过程中发挥了不可替代的作用。为评估嗜水气单胞菌对喹诺酮类药物恩诺沙星的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定26株流行菌株的最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),并用PCR方法检测相关耐药基因gyrA与parC。结果显示,26株嗜水气单胞

嗜水气单胞菌分离株的st分型及生物学特性分析

:嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)在淡水、土壤、人畜粪便等环境中广泛分布,为革兰阴性杆菌,其致病菌株会导致多种水产动物败血症,尤其会导致鱼类的运动性气单胞菌败血症(motile Aeromonas septicemia,MAS)。为了解从发病鱼体分离的嗜水气单胞菌的分子分型特点及其生物学特性,本研究对流行菌株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和相关特性分析。研究结果表明,4株菌均为ST251型,均有溶血性、溶蛋白活性、生物被膜形成能

四例犬急性胰腺炎的诊疗及体会

:犬急性胰腺炎在宠物临床中较为多发,是胰酶消化自身胰脏所导致的一种消化道疾病。该病的影响因素较多,常见临床症状表现为腹痛、呕吐及发热,由于临床特征不典型,因此易与其他消化道疾病或者传染病相混淆。该病的治疗方案较为复杂,治疗周期长,早期及时正确诊断有极其重要的意义。本文主要介绍了4例犬急性胰腺炎病例,从临床症状、诊断手法和治疗方案及预后等各方面进行研究,以期为犬急性胰腺炎的诊治提供指导。

地区20132015年猪圆环病毒2型(pcv2)感染情况调查

:猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属,为已知的最小的动物病毒之一。现已知PCV有两个血清型,即PCV-1和PCV-2。PCV-1为非致病性的病毒,而PCV-2对猪有致病性。猪对PCV-2具有较强的易感性,感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒,经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。近年来PCV-2已成为仅次之PRRSV的第二大严重危害世界养猪业的病毒性病原。现为了解上海及周边地区PCV-2的流行情况,掌握上海地区PCV-2感染的主要亚型并为PCV-2的防

好棒文