宁德市瘦肉精监管与检测现状分析
:我国禁止在饲料中添加“瘦肉精”,但在利益的驱动下仍有些养殖户和商户无视国家法律,非法使用瘦肉精以促进动物肌肉生长。这些非法牟利者巨大利益的背后,却是以牺牲广大无辜群众健康为代价。因此,相关监管执法部门对此检控显得尤为重要。本文综述了瘦肉精的本质及危害,结合作者实习地的“瘦肉精”检测现状详细介绍“瘦肉精”专项整治中的抽检过程与抽检结果,并分析监管过程中存在的问题和建议意见,旨在为相关行业管理提供参考资料。
定点突变不耐热肠毒素ltak63ltar72基因的表达及纯化
:大肠杆菌不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin, LT)是肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)分泌的一种热不稳定肠毒素。LT能引起人和哺乳动物发生水样腹泻,但具有极强的黏膜免疫原性和黏膜佐剂活性,其无毒突变体在黏膜免疫研究中有重要作用。本实验通过PCR重叠延伸法得到LTAK63和LTAR72 2个LT的突变体,测序结果显示突变序列与预期一致。通过NcoⅠ和XholⅠ双酶切将目的基因与pET-16b表达载体连接,并使其在BL2
山羊副流感病毒3型js2013株n蛋白的原核表达及间接elisa抗体检测方法的建立
:山羊副流感病毒3型可引起山羊严重的呼吸道疾病,造成免疫抑制与组织损伤,引起广泛的发病与死亡。本研究将目的基因扩增后连接到质粒pET32a(+)上,构建重组质粒pET32a-N,并转化至原核表达系统大肠杆菌BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达出大量重组N蛋白。采用Ni 柱亲和层析法纯化重组蛋白,通过SDS-PAGE与Western blot鉴定,证明其具有良好的抗原性与特异性。利用纯化的蛋白作为包被抗原优化间接ELISA反应条件确定其最佳抗原包被浓度为1ug/ml、血清稀释度为1:200、血清作用时间
猪链球菌2型丝氨酸蛋白酶的原核表达及其多克隆抗体的制备
【目的】克隆猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2, SS2)强毒株SS2-1的丝氨酸蛋白酶(Extracellular serine protease, ESP)编码基因并进行原核表达,纯化重组蛋白,制备多克隆抗体,为后续研究丝氨酸蛋白酶的功能研究奠定基础。【方法】利用PCR方法扩增SS2-1的ESP胞内区(不含信号肽)及不含功能结构域的截短ESP’,构建重组表达质粒pET32a-ESP和pET28a- ESP’,转化到大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE鉴定表
猪链球菌2型类溶血素蛋白的原核表达及其抗血清制备
本研究旨在利用大肠杆菌原核表达猪链球菌2型类溶血素蛋白,并制备相应的多克隆抗体。采用PCR 法从猪链球菌2 型强毒株SS2-1基因组扩增目的基因HlyC,即类溶血素基因,构建重组表达载体并进行HindIII/SalⅠ双酶切鉴定,鉴定阳性者用IPTG诱导重组蛋白表达,其产物采用SDS-PAGE电泳法进行鉴定,鉴定阳性者采用His 亲和层析柱进行纯化,制备兔抗重组蛋白血清。通过溶血活性试验和血平板溶血活性检测评定类溶血素蛋白功能。 结果显示成功将目的基因插入到表达质粒中,并获得纯度较高的重组蛋白,利用重组蛋白
猪链球菌2型菌蜕的制备及其对小鼠免疫效果评价
猪链球菌是猪的重要致病菌,同时也是一种重要的人畜共患病原。研制安全、有效的疫苗是防控该类疫病的关键。细菌菌蜕作为新型疫苗不仅可以诱导机体产生坚强的免疫应答,而且它具有安全性。本研究探索用氢氧化钠制备猪链球菌2型菌蜕,并用BALB/c小鼠评价菌蜕免疫效果。氢氧化钠对猪链球菌2型SS-1最小抑菌浓度为2mg/mL,用该浓度氢氧化钠诱导菌蜕形成,扫描电镜观察显示部分菌有清晰的溶菌孔道。为评价菌蜕疫苗免疫效果,将小鼠随机分成三组A组(未免疫的对照组),B组(背部皮下注射SS2灭活苗),C组(背部皮下注射SS2菌蜕
猪链球菌新血清型荚膜多糖提取纯化及组成研究
一些细菌能在细胞壁外围产生一种粘液样物质被称为荚膜。荚膜多糖具有抗吞噬活性,对猪链球菌的感染和致病力有非常重要的作用,以其为基础的疫苗研究正在开展。本试验拟摸索猪链球菌新血清型分离株荚膜的最适培养条件,提取、超滤并冻干后采用Sephacryl S-300凝胶层析柱进行分离纯化得到多种组分,并经Dot-ELISA鉴定后采用高效液相色谱法、硫酸-苯酚法以及BCA蛋白定量法对荚膜多糖及各组分进行初步分析研究。结果得到两种免疫原性较好的组分并测得其分子量、糖含量及蛋白含量。
盐酸替洛隆对新城疫lasota株疫苗免疫效果的影响研究
盐酸替洛隆是一种常用的干扰素诱导剂,而新城疫是目前我国分布最广、危害最严重的禽病之一。本文章旨在研究盐酸替洛隆对新城疫LaSota株疫苗免疫效果的影响。本实验是通过设置不同剂量的实验组并利用微量血凝-血凝抑制法研究给予盐酸替洛隆这一药物对于同时接种新城疫疫苗的鸡产生的抗体水平的影响,结果发现在疫苗免疫的同时根据雏鸡体重以30mg/kg的剂量给予盐酸替洛隆是可以提高雏鸡体内的新城疫抗体水平。这一结果表明盐酸替洛隆在未来的养鸡业中具有良好的应用前景。
市某猪场猪四种病毒性疫病混合感染的鉴定
:重庆市某猪场出现了一起以母猪发生繁殖障碍,新生仔发病率和病死率均高为特征的疾病。经过流行病学调查、临床症状观察、病理学检查与实验室检测,诊断为猪圆环病毒II型、细小病毒、伪狂犬病毒、日本乙型脑炎病毒混合感染。采用隔离消毒和用药治疗等综合性措施后,疫情已得到有效的控制,猪场进入正常生产。本次病例的诊治为养猪业可能发生的猪圆环病毒II型、细小病毒、伪狂犬病毒、日本乙型脑炎病毒混合感染提供了可行性建议和借鉴经验。
新猪源干扰素刺激基因(isg)的筛选与功能初步鉴定
:本研究通过NCBI数据库查找猪源基因信息,分析潜在的猪源ISGs基因,通过BALST比对以及生物信息学软件分析不同品种猪的ISGs基因序列的同源性和保守序列,设计扩增目的ISGs的引物,从干扰素作用24h后的PAM细胞中提取总RNA, RT-PCR扩增出目的基因ISG-1056、ISG-3143、ISG-6247和ISG-PPBP。将目的基因与pFlag7.1载体连接,构建重组质粒用于过表达实验。目的ISGs的RNA干扰和基因过表达实验均初步验证了ISG-3143对日本乙型脑炎病毒(JEV)具有抑制作用
新疆某牛场布鲁氏杆菌病的监测
:牛布氏杆菌病是 由布氏杆菌引起的人畜共患的一种慢性传染病 、一直是令养牛业最头痛的问题、这不仅是因为其带来的经济损失巨大、也是由于其引起的原因错综复杂难易防治。该病的临床特征是引起母牛流产或早产,故又称传染性流产并常引起子宫内膜炎导致受精障碍而不孕;公牛感染后发生睾丸、附睾、前列腺和贮精囊炎,造成无精子症或精子缺乏而致使生殖力降低或不育。据调查 ,我国各省市奶牛布氏杆菌病相当普遍。因此,防治与控制奶牛布氏杆菌病是每一个养牛工作者应该重视的问题。应力求系统的了解其致病的因素及诊断技术,针对病因,掌握其防治