境内猪轮状病毒的流行病学调查
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1材料与方法 2
1主要试剂和主要仪器 2
1.1.1主要试剂与生物料料 2
1.1.2主要仪器 2
1.2 临床病料检测 2
1.2.1 PCR引物设计 2
1.2.2临床病料处理 2
1.2.3病料病毒总RNA的提取 2
1.2.4 cDNA的合成 2
1.2.5病料VP4基因PCR扩增 2
1.3 阳性样品VP4和VP7基因RTPCR扩增 3
1.3.1 VP7引物设计 3
1.3.2 RTPCR扩增 3
1.3.3 胶回收 3
1.3.4 连接 3
1.3.5 转化 3
1.3.6 提质粒 3
1.3.7序列分析 3
1.4 病毒全基因分析 4
1.4.1 PCR扩增引物 4
1.4.2 病毒总RNA的提取和cDNA的合成 4
1.4.3 病毒11个全基因片段PCR扩增 4
1.5病毒全基因测序结果分析 4
1.5.1 RotaC软件分析 4
1.5.2 遗传进化分析 4
2 结果与分析 4
2.1 临床病料阳性率 4
2.2 病毒VP4和VP7基因序列分析 4
2.3 PRV3957 全基因RTPCR扩增结果 5
2.4 PRV3957全基因测序分析 6
2.4.1 基因片段BLAST对比 6
2.4.2 PRV3957的RotaC软件分析 6
2.4.3 PRV3957的遗传进化分析 6
3 讨论 9
致谢 10
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