嗜水气单胞菌分离株的st分型及生物学特性分析

:嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)在淡水、土壤、人畜粪便等环境中广泛分布,为革兰阴性杆菌,其致病菌株会导致多种水产动物败血症,尤其会导致鱼类的运动性气单胞菌败血症(motile Aeromonas septicemia,MAS)。为了解从发病鱼体分离的嗜水气单胞菌的分子分型特点及其生物学特性,本研究对流行菌株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和相关特性分析。研究结果表明,4株菌均为ST251型,均有溶血性、溶蛋白活性、生物被膜形成能力和运动能力,对斑马鱼的致病性较强,LD50在1.4×103 ~ 3.9×103 CFU。本研究为有效防控MAS的暴发流行提供了依据。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 菌株 2
1.2 实验试剂、培养基及实验动物 2
1.3 实验仪器 2
1.4 多为点序列分型 2
1.4.1 粗提PCR模板 2
1.4.2 MLST分型 2
1.4.3 PCR反应 3
1.4.4 MLST分析 3
1.5 斑马鱼致病性试验 3
1.6生物被膜形成能力测定 3
1.7运动能力测定 4
1.7.1游动能力测定 4
1.7.2群集运动能力测试 4
1.8 细菌胞外产物活性的测定 4
1.8.1 溶血活性的测定 4
1.8.2蛋白酶活性 4
1.9恩诺沙星对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC) 4
2 结果 5
2.1 多为点序列分型 5
2.2 嗜水气单胞菌对斑马鱼的半数致死量 5
2.3 生物被膜形成能力 6
2.4 运动能力 6
2.4.1 游动能力 6
2.4.2 群集运动能力 6
2.5 细菌胞外产物的活性 7
2.5.1 细菌胞外产物的溶血价 7
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2.5.2 细菌胞外产物的蛋白酶活性 7
2.6 MIC检测 7
3 讨论 8
致谢 9
参考文献 10
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