柚子皮抑菌活性物质分离及分析
目 录
1 引言 1
1.1 研究背景 1
1.2 柚皮中主要抑菌活性物质 1
1.3 发展前景 2
1.4 研究目的及意义 3
2 材料与方法 3
2.1 材料与仪器 3
2.2 实验方法 4
2.2.1 超声波法提取黄酮类化合物 4
2.2.2 有机溶剂法提取胡柚皮精油 6
2.2.3 抑菌试验 7
3 结果与分析 9
3.1 芦丁标准曲线 9
3.2 不同因素对黄酮类化合物得率的影响 9
3.2.1 原材料的选择 9
3.2.2 料液比对黄酮类化合物得率的影响 10
3.2.3 提取温度对黄酮类化合物得率的影响 10
3.2.4 提取时间对黄酮类化合物得率的影响 11
3.2.5 乙醇浓度对黄酮类化合物得率的影响 12
3.2.6 正交试验确定最佳工艺条件 12
3.2.7 HSCCC实验结果与分析 13
3.3 不同因素对精油得率的影响 15
3.3.1 提取温度对精油得率的影响 15
3.3.2 提取时间对精油产率的影响 16
3.3.3料液比对精油产率的影响 16
3.3.4 正交试验确定最佳工艺条件 17
3.4 抑菌试验结果与分析 18
3.4.1 胡柚皮原提液的抑菌效果 18
3.4.2 胡柚皮中黄酮与精油抑菌效果的比较 19
结论 20
致谢 21
参 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
考文献22
1 2 引言
1.1 研究背景
柚子(Citrus grandis)又名朱奕、雷柚、气柑、文旦等,为芸香科(Rutaceae)柑橘属(citrus)常绿果树的果实,起源于东南亚或我国南方一带,据记载在我国已有3000多年的栽培历史[1]。其分布广泛,南从海南省,北至陕西省汉中地区,东从台湾省,西至青藏高原东南的察隅都有分布[2]。其果实营养丰富,色香味美,既宜鲜食,又宜加工,是柑橘王国中的一朵奇葩,被美誉为“天然罐头”[3]。
柚子是我国名特优水果之一。这不仅是因为柚果风味独特，而且更重要的是它营养价值堪称柑桔之最，含有蛋白质、脂肪及维生素B1、B2、E和P等人体中不可缺少的营养元素[4]。 据测定,每100 mL柚果汁中含维生素C 120-137 mg,超过了1 mg/g，是甜橙的1倍，桔类的 4 倍。可溶性固形物含量为13.0%-15.9%,柠檬酸含量为0.321%,除含有水分、维生素、矿物质这些人体必需的营养素外，还含有多种生理活性成分如：生物碱类、类柠檬苦素、黄酮类、香精油、天然色素、膳食纤维等化合物，具有止咳、镇痛、降血糖、降血脂、降低毛细血管脆性等功效。中医认为柚子有健脾胃，润肺，补血，清肠，助消化等功效，可以促进伤口愈合，能较好的治疗败血症。[5]
柚皮为柚果实的外皮，占整个柚子43%-48%，柚子加工和食用后的胡柚皮一般均废弃，绝大部分柚皮因霉烂变质而丢弃，造成了资源极大浪费，而且还污染环境。其实柚皮不但色泽鲜艳,还有一定的抑菌效果,还可从中提取柚皮精油、柚皮苷等食品添加剂，从而提高资源利用率。因此,本文针对胡柚皮抑菌活性物质进行分离及分析，为更好地研究胡柚皮提供依据。
1.2 柚皮中主要抑菌活性物质
柚皮提取物对真菌和细菌均有抑制或杀死作用，如：黑曲霉、链核盘菌属、白地霉、扩展青霉、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌、猪霍乱沙门氏菌等。胡柚皮提取物中抑菌活性物质主要为黄酮类化合物和柚皮精油。
1.2.1 黄酮类化合物
黄酮类化合物泛指具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连接而形成的一系列化合物。柑橘属植物含有丰富的黄酮类化合物（Flavonoids），它们以苷类形式和游离态（苷元）的形式广泛存在于植物界，在植物的生长、发育、开花、结果以及抑菌防病等方面有着重要作用。柚中黄酮类化合物主要包括：（1）黄酮类：大多数被羟基、甲氧基多取代，如川陈皮素等；（2）二氢黄酮类：大多数被多羟基取代，如柚皮素等；（3）二氢黄酮苷类：大多数是 7-O-葡萄糖苷，芸香糖苷，如柚皮苷，橙皮苷等。柚皮中黄酮类化合物含量在1％ - 6％左右，主要为是二氢黄酮苷类合物，其中柚皮苷占80％以上。柚皮苷具有抑菌作用，能抑制金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、埃希大肠杆菌及某些真菌的生长。
黄酮苷元一般难溶于或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多酚羟基而显酸性，故可溶于碱性水溶液、吡甲酰胺及二甲基甲酰胺中。
1.2.2 柚皮精油
柚皮精油由菇烯类、醇类、醛类和酷类组成，是存在于柚子表皮油泡层中的一类具有芳香气味，且在常温下能挥发的油状液体物质的总称，是化学成分较为复杂的一类混合物，主要为萜烯类、芳香族类、脂肪族类等化合物。柚皮精油具有柚子所独特的风味,芳香宜人,且能够起到祛痰、止咳、平喘、镇痛、抗菌消炎、促进胃肠蠕动、促进消化液分泌、溶解胆结石和清除自由基等作用，对神经系统能起到安抚的效果,可以舒缓焦虑,具有良好的催眠效果;对风湿疼及关节肿大最有效果。同时因为胡柚皮挥发油的芳香气息,可当作功能性增香剂广泛应用于医药、食品、饮料、化妆品等行业。除此之外，其还具有一定的药用价值和经济价值。
1.3 发展前景
随着科学的发展,新技术新方法的应用，从天然产物提取分离有效成分的研究与发展已形成浪潮，发展迅猛。天然产物的研究成果已广泛应用于医药、保健食品、营养食品、食品添加剂、化工日用品、农药等各领域。提取天然产物中的功能物质己成为全世界的研究热点和重点。我国的香袖资源丰富，在南方各省份多有种植。在加工柚果和生鲜食用时，约有40% - 50%的皮渣产生，在国内，加工生产的果皮除少数用于中药和制取香精油外，大部分被当做垃圾处理，不能加以利用，不仅造成了资源的浪费，而且还污染了环境。对胡柚皮抑菌实验的研究可以充分利用胡柚皮抑菌的作用，经化学处理、物理理，获得具有很高使用价值的天然食品添加剂。这样既可以使废弃的天然有机化学资源得到合理利用，又可以提高原料的综合利用度，降低生产成本，提高经济价值，并且对环境起到了一定的保护作用。
1.4 研究目的及意义
柚子具有很高的营养价值和药用价值，平时我们食用后的胡柚皮都是废弃，并且工厂对柚子果实进行加工都会剩余大量果皮，这样不仅对环境造成污染，对资源来说也是一种极大的浪费。本文研究胡柚皮的抑菌活性物质以及其抑菌效果，可以帮助我们更好的了解胡柚皮的价值，为胡柚皮的综合利用以及制作成食品防腐剂提供了一种参考。
本文由于时令的原因选择胡柚作为研究对象，且查阅资料发现研究胡柚相关的文献较少。因此，研究胡柚皮的抑菌活性物质，不仅是为了更好的了解柚子的生理功能，同时为更好的利用胡柚皮提高依据。
2 材料与方法
2.1 材料与仪器
1 引言 1
1.1 研究背景 1
1.2 柚皮中主要抑菌活性物质 1
1.3 发展前景 2
1.4 研究目的及意义 3
2 材料与方法 3
2.1 材料与仪器 3
2.2 实验方法 4
2.2.1 超声波法提取黄酮类化合物 4
2.2.2 有机溶剂法提取胡柚皮精油 6
2.2.3 抑菌试验 7
3 结果与分析 9
3.1 芦丁标准曲线 9
3.2 不同因素对黄酮类化合物得率的影响 9
3.2.1 原材料的选择 9
3.2.2 料液比对黄酮类化合物得率的影响 10
3.2.3 提取温度对黄酮类化合物得率的影响 10
3.2.4 提取时间对黄酮类化合物得率的影响 11
3.2.5 乙醇浓度对黄酮类化合物得率的影响 12
3.2.6 正交试验确定最佳工艺条件 12
3.2.7 HSCCC实验结果与分析 13
3.3 不同因素对精油得率的影响 15
3.3.1 提取温度对精油得率的影响 15
3.3.2 提取时间对精油产率的影响 16
3.3.3料液比对精油产率的影响 16
3.3.4 正交试验确定最佳工艺条件 17
3.4 抑菌试验结果与分析 18
3.4.1 胡柚皮原提液的抑菌效果 18
3.4.2 胡柚皮中黄酮与精油抑菌效果的比较 19
结论 20
致谢 21
参 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
考文献22
1 2 引言
1.1 研究背景
柚子(Citrus grandis)又名朱奕、雷柚、气柑、文旦等,为芸香科(Rutaceae)柑橘属(citrus)常绿果树的果实,起源于东南亚或我国南方一带,据记载在我国已有3000多年的栽培历史[1]。其分布广泛,南从海南省,北至陕西省汉中地区,东从台湾省,西至青藏高原东南的察隅都有分布[2]。其果实营养丰富,色香味美,既宜鲜食,又宜加工,是柑橘王国中的一朵奇葩,被美誉为“天然罐头”[3]。
柚子是我国名特优水果之一。这不仅是因为柚果风味独特，而且更重要的是它营养价值堪称柑桔之最，含有蛋白质、脂肪及维生素B1、B2、E和P等人体中不可缺少的营养元素[4]。 据测定,每100 mL柚果汁中含维生素C 120-137 mg,超过了1 mg/g，是甜橙的1倍，桔类的 4 倍。可溶性固形物含量为13.0%-15.9%,柠檬酸含量为0.321%,除含有水分、维生素、矿物质这些人体必需的营养素外，还含有多种生理活性成分如：生物碱类、类柠檬苦素、黄酮类、香精油、天然色素、膳食纤维等化合物，具有止咳、镇痛、降血糖、降血脂、降低毛细血管脆性等功效。中医认为柚子有健脾胃，润肺，补血，清肠，助消化等功效，可以促进伤口愈合，能较好的治疗败血症。[5]
柚皮为柚果实的外皮，占整个柚子43%-48%，柚子加工和食用后的胡柚皮一般均废弃，绝大部分柚皮因霉烂变质而丢弃，造成了资源极大浪费，而且还污染环境。其实柚皮不但色泽鲜艳,还有一定的抑菌效果,还可从中提取柚皮精油、柚皮苷等食品添加剂，从而提高资源利用率。因此,本文针对胡柚皮抑菌活性物质进行分离及分析，为更好地研究胡柚皮提供依据。
1.2 柚皮中主要抑菌活性物质
柚皮提取物对真菌和细菌均有抑制或杀死作用，如：黑曲霉、链核盘菌属、白地霉、扩展青霉、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌、猪霍乱沙门氏菌等。胡柚皮提取物中抑菌活性物质主要为黄酮类化合物和柚皮精油。
1.2.1 黄酮类化合物
黄酮类化合物泛指具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连接而形成的一系列化合物。柑橘属植物含有丰富的黄酮类化合物（Flavonoids），它们以苷类形式和游离态（苷元）的形式广泛存在于植物界，在植物的生长、发育、开花、结果以及抑菌防病等方面有着重要作用。柚中黄酮类化合物主要包括：（1）黄酮类：大多数被羟基、甲氧基多取代，如川陈皮素等；（2）二氢黄酮类：大多数被多羟基取代，如柚皮素等；（3）二氢黄酮苷类：大多数是 7-O-葡萄糖苷，芸香糖苷，如柚皮苷，橙皮苷等。柚皮中黄酮类化合物含量在1％ - 6％左右，主要为是二氢黄酮苷类合物，其中柚皮苷占80％以上。柚皮苷具有抑菌作用，能抑制金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、埃希大肠杆菌及某些真菌的生长。
黄酮苷元一般难溶于或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多酚羟基而显酸性，故可溶于碱性水溶液、吡甲酰胺及二甲基甲酰胺中。
1.2.2 柚皮精油
柚皮精油由菇烯类、醇类、醛类和酷类组成，是存在于柚子表皮油泡层中的一类具有芳香气味，且在常温下能挥发的油状液体物质的总称，是化学成分较为复杂的一类混合物，主要为萜烯类、芳香族类、脂肪族类等化合物。柚皮精油具有柚子所独特的风味,芳香宜人,且能够起到祛痰、止咳、平喘、镇痛、抗菌消炎、促进胃肠蠕动、促进消化液分泌、溶解胆结石和清除自由基等作用，对神经系统能起到安抚的效果,可以舒缓焦虑,具有良好的催眠效果;对风湿疼及关节肿大最有效果。同时因为胡柚皮挥发油的芳香气息,可当作功能性增香剂广泛应用于医药、食品、饮料、化妆品等行业。除此之外，其还具有一定的药用价值和经济价值。
1.3 发展前景
随着科学的发展,新技术新方法的应用，从天然产物提取分离有效成分的研究与发展已形成浪潮，发展迅猛。天然产物的研究成果已广泛应用于医药、保健食品、营养食品、食品添加剂、化工日用品、农药等各领域。提取天然产物中的功能物质己成为全世界的研究热点和重点。我国的香袖资源丰富，在南方各省份多有种植。在加工柚果和生鲜食用时，约有40% - 50%的皮渣产生，在国内，加工生产的果皮除少数用于中药和制取香精油外，大部分被当做垃圾处理，不能加以利用，不仅造成了资源的浪费，而且还污染了环境。对胡柚皮抑菌实验的研究可以充分利用胡柚皮抑菌的作用，经化学处理、物理理，获得具有很高使用价值的天然食品添加剂。这样既可以使废弃的天然有机化学资源得到合理利用，又可以提高原料的综合利用度，降低生产成本，提高经济价值，并且对环境起到了一定的保护作用。
1.4 研究目的及意义
柚子具有很高的营养价值和药用价值，平时我们食用后的胡柚皮都是废弃，并且工厂对柚子果实进行加工都会剩余大量果皮，这样不仅对环境造成污染，对资源来说也是一种极大的浪费。本文研究胡柚皮的抑菌活性物质以及其抑菌效果，可以帮助我们更好的了解胡柚皮的价值，为胡柚皮的综合利用以及制作成食品防腐剂提供了一种参考。
本文由于时令的原因选择胡柚作为研究对象，且查阅资料发现研究胡柚相关的文献较少。因此，研究胡柚皮的抑菌活性物质，不仅是为了更好的了解柚子的生理功能，同时为更好的利用胡柚皮提高依据。
2 材料与方法
2.1 材料与仪器
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