黑粉菌生长相关蛋白um12046原核表达与纯化
玉米是我国最主要的粮食作物之一，也是重要的饲料来源和工业原料。在我国玉米产区，玉米黑粉病在玉米各个生长期均有发生,发病较为普遍且危害严重。Tctex-1是一种细胞质动力蛋白轻链，参与了一些真菌菌丝细胞生长速度的调节。根据序列分析，UM12046是玉米黑粉菌中Tctex-1家族的成员。本研究通过把编码UM12046的基因连接到不同的表达载体中，构建了UM12046的表达载体，将构建好的载体转化至大肠杆菌细胞进行重组蛋白的表达，并分析了不同缓冲液及pH对UM12046可溶性的影响, 建立了UM12046初步纯化的方法。为大量制备该蛋白和蛋白质晶体生长的筛选以及该蛋白结构解析奠定基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1绪论1
1.1玉米黑粉病研究进展2
1.1.1玉米黑粉病的发病因素 2
1.1.2玉米黑粉病的发病症状及规律 2
1.1.3玉米黑粉病的危害2
1.1.4玉米黑粉病的防治方法3
1.2玉米黑粉菌研究进展3
1.2.1玉米黑粉菌的基本特征特性3
1.2.2玉米黑粉菌的生长周期3
1.2.3玉米黑粉菌菌丝的侵染机制4
1.3 Tctex1及其在菌丝生长中的作用4
1.4大肠杆菌蛋白质表达系统4
1.5本实验研究目的及意义5
2实验材料与方法6
2.1实验材料6
2.1.1大肠杆菌菌种、质粒及所用基因6
2.1.2常用工具酶6
2.1.3试剂盒以及化学试剂6
2.1.4实验常用培养基及溶液的配方7
2.1.5其他材料8
2.2仪器和设备8
2.3实验方法9
2.3.1表达载体构建9
2.3.2蛋白质的诱导表达与纯化10
3实验结果与分析12
3.1 UM12046原核表达载体的构建12
3.1.1 UM12046扩增12
3.1.2 载体片段的制备12
3.1.3 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
转化子菌液PCR检测12
3.1.4 序列测定13
3.2 UM12046诱导表达与纯化13
3.2.1 不同表达载体筛选13
3.2.2 pHAT2 UM12046诱导表达13
3.2.3不同pH对UM12046可溶性的影响13
3.2.4不同缓冲液对UM12046可溶性的影响15
4 讨论16
致谢17
参考文献18
黑粉菌生长相关蛋白UM12046原核表达与纯化
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1绪论1
1.1玉米黑粉病研究进展2
1.1.1玉米黑粉病的发病因素 2
1.1.2玉米黑粉病的发病症状及规律 2
1.1.3玉米黑粉病的危害2
1.1.4玉米黑粉病的防治方法3
1.2玉米黑粉菌研究进展3
1.2.1玉米黑粉菌的基本特征特性3
1.2.2玉米黑粉菌的生长周期3
1.2.3玉米黑粉菌菌丝的侵染机制4
1.3 Tctex1及其在菌丝生长中的作用4
1.4大肠杆菌蛋白质表达系统4
1.5本实验研究目的及意义5
2实验材料与方法6
2.1实验材料6
2.1.1大肠杆菌菌种、质粒及所用基因6
2.1.2常用工具酶6
2.1.3试剂盒以及化学试剂6
2.1.4实验常用培养基及溶液的配方7
2.1.5其他材料8
2.2仪器和设备8
2.3实验方法9
2.3.1表达载体构建9
2.3.2蛋白质的诱导表达与纯化10
3实验结果与分析12
3.1 UM12046原核表达载体的构建12
3.1.1 UM12046扩增12
3.1.2 载体片段的制备12
3.1.3 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
转化子菌液PCR检测12
3.1.4 序列测定13
3.2 UM12046诱导表达与纯化13
3.2.1 不同表达载体筛选13
3.2.2 pHAT2 UM12046诱导表达13
3.2.3不同pH对UM12046可溶性的影响13
3.2.4不同缓冲液对UM12046可溶性的影响15
4 讨论16
致谢17
参考文献18
黑粉菌生长相关蛋白UM12046原核表达与纯化
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