atpip1;4水通道蛋白对拟南芥抗病性的影响

摘要:水通道蛋白(aquaporin, AQP)不仅具有运输水分的作用,还可以选择性的运转一些小分子物质如活性氧、气体和一些小分子代谢物,而这些小分子物质与植物生长发育、耐旱抗病等密切相关。目前关于水通道蛋白在植物抗病机制中的作用尚不清楚。本文利用农杆菌介导法将水通道蛋白基因AtPIP1;4片段转入拟南芥野生型Col-0植株内,并成功在其体内表达。通过Southern Blot研究出 AtPIP1;4过表达株系的基因拷贝数。研究表明,水通道蛋白基因AtPIP1;4对拟南芥抗病机制具有一定的调控作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1植物和微生物材料及其培养2
1.2方法 2
1.2.1 转基因拟南芥表达载体pCAMBIA 的保存 2
1.2.2 转基因拟南芥AtPIP1;4过表达植株的获得2
1.2.3 转基因拟南芥AtPIP1;4过表达种子的筛选 3
1.2.4转基因拟南芥植株的鉴定3
1.2.4.1 拟南芥总DNA的提取 3
1.2.4.2 PCR 扩增 4
1.2.5 地高辛标记探针Southern Blot杂交 4
1.2.5.1 探针标记步骤(20μl体系)4
1.2.5.2 酶切 4
1.2.5.3 做胶 4
1.2.5.4 电泳 4
1.2.5.5 关于凝胶处理 4
1.2.5.6 转膜 5
1.2.5.7 转膜结束后 5
1.2.5.8 洗膜 5
1.2.5.9 预杂交和杂交 5
1.2.5.10 检测 5
1.2.5.11 显色5
1.2.6 突变体拟南芥纯合体种子的筛选6
2 结果与分析 6
2.1转基因拟南芥过表达植株的产生与鉴定6
2.2 拟南芥AtPIP1;4过表达基因在拟南芥中的拷贝数 8
2.3 拟南芥A
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tPIP1;4 突变体的鉴定9
3 结论与讨论 10
致谢10
参考文献11
AtPIP1;4水通道蛋白对拟南芥抗病性的影响

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