姜黄素对iugr鼠骨骼肌糖酵解的影响
探究姜黄素对宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）鼠骨骼肌糖酵解的影响。采用日粮限饲的方法构建IUGR鼠模型，试验设计为NBW组、NC组、IUGR组和IC组，NBW和IUGR分别为正常和IUGR鼠，饲喂基础日粮；NC和IC也分别为正常和IUGR鼠，饲喂添加400 mg/kg姜黄素的日粮；4周龄时开始试验。结果显示（1）与NBW组相比，IUGR组大鼠肌肉乳酸含量及糖酵解潜值（glycolytic potential,GP）极显著升高（P < 0.01），己糖激酶（hexokinase,HK）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性显著升高（P < 0.05），琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH）活性显著降低（P < 0.05）。添加姜黄素后，IUGR鼠肌肉糖原含量显著升高（P < 0.05），IUGR鼠GP及SDH活性极显著升高（P < 0.01），HK及LDH活性极显著降低（P < 0.01）；（2）与NBW组相比，IUGR组大鼠肌肉AMP活化蛋白激酶（AMP kinase,AMPK）和细胞沉默调节蛋白1（Sirtuin 1,SIRT1）mRNA的表达量均显著升高（P < 0.05）。姜黄素能使IUGR鼠AMPK mRNA的表达量极显著降低（P < 0.01），显著降低IUGR鼠糖原合酶（Glycogen synthase,GS）mRNA的表达量（P < 0.05）。结论姜黄素对减弱IUGR鼠肌糖原分解程度，降低糖酵解有关酶活性，减少乳酸累积，提高肌肉品质有一定的潜在积极作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words2
引言2
1材料与方法2
1.1试验设计3
1.2饲养管理3
1.3样品采集3
1.4指标测定及方法3
1.4.1肌肉组织中糖酵解相关指标测定3
1.4.2肌肉组织中糖酵解基因的测定3
1.5数据统计与分析3
2结果与分析4
2.1姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖原和乳酸含量及糖酵解潜值的影响4< *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
br /> 2.2姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖代谢酶活性的影响4
2.3姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖酵解基因的影响5
3讨论5
3.1姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖原和乳酸含量及糖酵解潜值的影响5
3.2姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖代谢酶活性的影响6
3.3姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖酵解基因的影响6
4小结7
致谢7
参考文献7
姜黄素对IUGR鼠骨骼肌糖酵解的影响
引言
引言
宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）定义为妊娠期哺乳动物子宫内的胚胎或胎儿以及器官的发育被一定程度上所限制，因而生长缓慢的一种不良现象[1]。影响IUGR的原因有很多，如母体营养供应不足和环境应激等，其中母体营养供应不足是其主要原因之一[2]。这严重影响新生儿的体质和成活率，导致多种代谢疾病在成年后产生[3]。有研究表明，IUGR将降低猪出栏时的肉质 [4]。Thorn等[5]研究发现IUGR猪肌肉糖原大量分解，乳酸含量升高。并且，相似的研究结果也在小鼠[6]和反刍动物[7]上得到了验证。Magnusson等[8]发现IUGR猪肌肉中不但糖原很大程度酵解、乳酸含量升高，而且糖酵解潜能也发生了显著的提高。这些研究初步表明，IUGR可能会对肌肉品质造成不利影响。另有研究发现，作为肌肉糖酵解过程中的关键酶，肌酸激酶（creatine kinase,CK）的含量能表明机体的损伤程度，其活性大小能成为评价肉质的指标[9]。糖原会在IUGR猪体内大量酵解，使肌肉葡萄糖含量降低，CK活性因而提高；反之，若肉质良好则CK活性将保持稳定[10]。
姜黄素（Curcumin）是从姜黄中提取到的一种植物性多酚，同时也是姜黄发挥其药理作用最重要的活性成分[11]。1815年被首次发现之后，姜黄素就成为世界诸多国家广泛应用的天然色素之一。姜黄素是联合国粮农组织专家委员会和世界卫生组织批准使用的一种食品添加剂，被食品加工领域广泛应用。有研究发现，除了具有良好的着色性，姜黄素还具有多种营养活性和药理学功能，其中就包括对肌肉糖酵解的影响 [12]。葡萄糖是机体的主要能量物质，血糖含量的高低在一定程度上反映了机体对糖类化合物的消化吸收程度以及能量营养状况。有研究表明，在育肥猪日粮中添加姜黄素后，猪血糖含量逐渐趋于稳定，营养水平有所提高[13]。郑清梅等[14]和胡忠泽等[15]分别在罗非鱼日粮中添加姜黄素试验也得到类似的结果。此外，黄山凌子等[16]研究也表明姜黄素具有改善血糖紊乱的作用。
综上表明，IUGR不仅会使乳酸含量升高，显著提高糖酵解潜能，而且还会使肌酸激酶的活性提高，从而导致肉品质下降。而姜黄素对调节糖代谢紊乱具有一定的帮助作用。然而，当下关于curcumin、IUGR与糖代谢三者相联系的研究较少。故本研究通过限制母鼠妊娠期营养供给来建立IUGR鼠模型，考察IUGR对骨骼肌糖酵解的作用结果；并为IUGR鼠饲料提供姜黄素，来探讨IUGR鼠骨骼肌糖酵解中姜黄素发挥的调节作用，为姜黄素在低出生重动物上的营养作用探究和人类糖尿病等的研究和预防治疗提供一定的科学依据。
1材料与方法
1.1试验设计
试验总共选择40只第1胎SD母鼠（SPF级，同期发情配种），将母鼠随机分成正常组和营养限制组，正常组不限制采食，营养限制组的采食量则限定为相同孕龄正常组单位体重采食量的一半，参照前人的方法进行IUGR鼠模型的构建[17]。正常组母鼠分娩得正常仔鼠（NBW），日粮限饲组母鼠分娩仔鼠为IUGR鼠[18]。在哺乳期间，NBW和IUGR母鼠的采食与饮水均无干预。21天时，停止全部仔鼠的母乳供应，并设置为期1周的适应期。NBW组每窝选取1只窝均重鼠，随机分配至NBW组和NC组，IUGR组也按照每窝选择1只体重接近于窝均重小鼠分为IUGR组和IC组，每组10只小鼠。正式试验从第4周开始，至8周龄结束，试验期间NBW组和IUGR组均采食基础日粮，对NC组和IC组饲喂添加400 mg/kg姜黄素的日粮。
1.2饲养管理
试验前1周对鼠房进行彻底的清扫和甲醛高锰酸钾熏蒸消毒，持续通风空舍1周。试验期间，按时清扫鼠房和更换垫料，鼠房温度控制在25±1℃，保持通风和12小时循环光照，并且卫生防疫从严把关。从南京江宁青龙山动物繁殖场购买所需基础日粮，curcumin由广东科虎提供（纯度>99.0%）。动物饲养试验在大学动物科技学院动物房进行。
1.3样品采集
8周龄时，每组选择体重接近的6只大鼠，先进行麻醉处理，再将其断颈处死，然后迅速切下腿部肌肉，保存于液氮中。
1.4指标测定及方法
1.4.1肌肉组织中糖酵解相关指标测定
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words2
引言2
1材料与方法2
1.1试验设计3
1.2饲养管理3
1.3样品采集3
1.4指标测定及方法3
1.4.1肌肉组织中糖酵解相关指标测定3
1.4.2肌肉组织中糖酵解基因的测定3
1.5数据统计与分析3
2结果与分析4
2.1姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖原和乳酸含量及糖酵解潜值的影响4< *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
br /> 2.2姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖代谢酶活性的影响4
2.3姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖酵解基因的影响5
3讨论5
3.1姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖原和乳酸含量及糖酵解潜值的影响5
3.2姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖代谢酶活性的影响6
3.3姜黄素对IUGR大鼠骨骼肌糖酵解基因的影响6
4小结7
致谢7
参考文献7
姜黄素对IUGR鼠骨骼肌糖酵解的影响
引言
引言
宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）定义为妊娠期哺乳动物子宫内的胚胎或胎儿以及器官的发育被一定程度上所限制，因而生长缓慢的一种不良现象[1]。影响IUGR的原因有很多，如母体营养供应不足和环境应激等，其中母体营养供应不足是其主要原因之一[2]。这严重影响新生儿的体质和成活率，导致多种代谢疾病在成年后产生[3]。有研究表明，IUGR将降低猪出栏时的肉质 [4]。Thorn等[5]研究发现IUGR猪肌肉糖原大量分解，乳酸含量升高。并且，相似的研究结果也在小鼠[6]和反刍动物[7]上得到了验证。Magnusson等[8]发现IUGR猪肌肉中不但糖原很大程度酵解、乳酸含量升高，而且糖酵解潜能也发生了显著的提高。这些研究初步表明，IUGR可能会对肌肉品质造成不利影响。另有研究发现，作为肌肉糖酵解过程中的关键酶，肌酸激酶（creatine kinase,CK）的含量能表明机体的损伤程度，其活性大小能成为评价肉质的指标[9]。糖原会在IUGR猪体内大量酵解，使肌肉葡萄糖含量降低，CK活性因而提高；反之，若肉质良好则CK活性将保持稳定[10]。
姜黄素（Curcumin）是从姜黄中提取到的一种植物性多酚，同时也是姜黄发挥其药理作用最重要的活性成分[11]。1815年被首次发现之后，姜黄素就成为世界诸多国家广泛应用的天然色素之一。姜黄素是联合国粮农组织专家委员会和世界卫生组织批准使用的一种食品添加剂，被食品加工领域广泛应用。有研究发现，除了具有良好的着色性，姜黄素还具有多种营养活性和药理学功能，其中就包括对肌肉糖酵解的影响 [12]。葡萄糖是机体的主要能量物质，血糖含量的高低在一定程度上反映了机体对糖类化合物的消化吸收程度以及能量营养状况。有研究表明，在育肥猪日粮中添加姜黄素后，猪血糖含量逐渐趋于稳定，营养水平有所提高[13]。郑清梅等[14]和胡忠泽等[15]分别在罗非鱼日粮中添加姜黄素试验也得到类似的结果。此外，黄山凌子等[16]研究也表明姜黄素具有改善血糖紊乱的作用。
综上表明，IUGR不仅会使乳酸含量升高，显著提高糖酵解潜能，而且还会使肌酸激酶的活性提高，从而导致肉品质下降。而姜黄素对调节糖代谢紊乱具有一定的帮助作用。然而，当下关于curcumin、IUGR与糖代谢三者相联系的研究较少。故本研究通过限制母鼠妊娠期营养供给来建立IUGR鼠模型，考察IUGR对骨骼肌糖酵解的作用结果；并为IUGR鼠饲料提供姜黄素，来探讨IUGR鼠骨骼肌糖酵解中姜黄素发挥的调节作用，为姜黄素在低出生重动物上的营养作用探究和人类糖尿病等的研究和预防治疗提供一定的科学依据。
1材料与方法
1.1试验设计
试验总共选择40只第1胎SD母鼠（SPF级，同期发情配种），将母鼠随机分成正常组和营养限制组，正常组不限制采食，营养限制组的采食量则限定为相同孕龄正常组单位体重采食量的一半，参照前人的方法进行IUGR鼠模型的构建[17]。正常组母鼠分娩得正常仔鼠（NBW），日粮限饲组母鼠分娩仔鼠为IUGR鼠[18]。在哺乳期间，NBW和IUGR母鼠的采食与饮水均无干预。21天时，停止全部仔鼠的母乳供应，并设置为期1周的适应期。NBW组每窝选取1只窝均重鼠，随机分配至NBW组和NC组，IUGR组也按照每窝选择1只体重接近于窝均重小鼠分为IUGR组和IC组，每组10只小鼠。正式试验从第4周开始，至8周龄结束，试验期间NBW组和IUGR组均采食基础日粮，对NC组和IC组饲喂添加400 mg/kg姜黄素的日粮。
1.2饲养管理
试验前1周对鼠房进行彻底的清扫和甲醛高锰酸钾熏蒸消毒，持续通风空舍1周。试验期间，按时清扫鼠房和更换垫料，鼠房温度控制在25±1℃，保持通风和12小时循环光照，并且卫生防疫从严把关。从南京江宁青龙山动物繁殖场购买所需基础日粮，curcumin由广东科虎提供（纯度>99.0%）。动物饲养试验在大学动物科技学院动物房进行。
1.3样品采集
8周龄时，每组选择体重接近的6只大鼠，先进行麻醉处理，再将其断颈处死，然后迅速切下腿部肌肉，保存于液氮中。
1.4指标测定及方法
1.4.1肌肉组织中糖酵解相关指标测定
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